Патенты автора МАКДОНАЛЬД Линн (US)
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к грызуну, содержащему в эндогенном локусе β2 микроглобулина последовательность нуклеиновой кислоты, содержащую экзон 1 эндогенного гена β2 микроглобулина грызуна, функционально связанную с нуклеиновой кислотой, содержащей последовательности, представленные в экзоне 2, экзоне 3 и экзоне 4 гена β2 микроглобулина человека. Изобретение эффективно в качестве биологической системы, которая может создавать иммунную систему, которая проявляет компоненты, имитирующие функцию иммунной системы человека. 5 з.п. ф-лы, 10 ил., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения антитела, которое связывается с представляющим интерес антигеном. Способ включает получение клетки млекопитающего, сконструированной для экспрессии антитела, которое является специфическим в отношении представляющего интерес антигена, вставку одного или нескольких генных сегментов VL человека и одного или нескольких генных сегментов JL человека и вставку одного или нескольких генных сегментов VL человека и одного или нескольких генных сегментов JL человека и эктопическую нуклеотидную последовательность, которая кодирует белок ADAM6 или его функциональный фрагмент. Изобретение эффективно для получения антитела, применимого для получения терапевтических средств для людей. 18 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к мыши для продуцирования цепи иммуноглобулина, а также к ее клетке. Также раскрыт способ получения вышеуказанной генетически модифицированной мыши, содержащей в своей зародышевой линии эндогенный локус тяжелой цепи иммуноглобулина, модифицированный для содержания геномной последовательности каппа (κ) зародышевого типа. Полученная мышь может быть эффективно использована для получения гибридного иммуноглобулинового связывающего белка, который содержит вариабельный домен легкой цепи человека, функционально связанный с константной областью тяжелой цепи, для получения антигенсвязывающего белка, содержащего гибридную цепь иммуноглобулина и легкую цепь, а также для получения биспецифического антитела. 7 н. и 20 з.п. ф-лы, 9 ил., 5 табл., 1 пр.
СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ НАЦЕЛЕННОЙ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ МОДИФИКАЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПАРНЫХ ГИДОВЫХ РНК // 2734770
Изобретение относится к генной инженерии. Предложен способ введения биаллельной модификации в целевой геномный локус с использованием системы CRISPR/Cas9, включающий введение Cas9, двух гидовых РНК и нацеливающего вектора, содержащего полинуклеотидную вставку, фланкированную 5' гомологичным плечом, которое гибридизуется с целевой 5'-последовательностью в пределах целевого геномного локуса, и 3' гомологичным плечом, которое гибридизуется с целевой 3'-последовательностью в пределах целевого геномного локуса. Настоящий способ также включает проведение количественного теста для оценки модификации аллеля и теста на сохранение для определения числа копий в образце геномной ДНК области целевой 5'- и/или 3'-последовательности, что позволяет различить правильную нацеленную вставку полинуклеотидной вставки от случайных трансгенных вставок и/или правильные нацеленные делеции от делеций, выходящих за пределы области целевого геномного локуса. 31 з.п. ф-лы, 18 ил., 14 табл., 7 пр.
МЫШИ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИЕ ЛЕГКУЮ ЦЕПЬ С ВАРИАБЕЛЬНОЙ ОБЛАСТЬЮ λ ЧЕЛОВЕКА И КОНСТАНТНОЙ ОБЛАСТЬЮ МЫШИ // 2724736
Изобретение относится к биотехнологии. Описан способ получения вариабельной области легкой цепи λ человека, при этом способ включает: (a) иммунизацию генетически модифицированной мыши антигеном, причем геном зародышевой линии генетически модифицированной мыши содержит: один или несколько генных сегментов Vλ человека и один или несколько генных сегментов Jλ человека, причем один или несколько генных сегментов Vλ человека и один или несколько генных сегментов Jλ человека заменяют эндогенные генные сегменты Vκ мыши и эндогенные генные сегменты Jκ; и причем один или несколько генных сегментов Vλ человека и один или несколько генных сегментов Jλ человека функционально связаны с эндогенным геном константной (Сκ) области легкой цепи κ мыши; и(b) выявление вариабельной области легкой цепи λ человека, которая кодирует вариабельный домен легкой цепи λ человека в антителе, которое специфически связывается с антигеном и было выработано генетически модифицированной мышью, причем вариабельная область легкой цепи λ человека происходит из генного сегмента Vλ человека, из одного или нескольких генных сегментов Vλ человека и генного сегмента Jλ человека, из одного или нескольких генных сегментов Jλ человека. Также описан способ получения вариабельного домена легкой цепи λ человека, включающий: (а) иммунизацию генетически модифицированной мыши антигеном, причем геном зародышевой линии генетически модифицированной мыши содержит: один или несколько генных сегментов Vλ человека и один или несколько генных сегментов Jλ человека, причем один или несколько генных сегментов Vλ человека и один или несколько генных сегментов Jλ человека заменяют эндогенные генные сегменты Vκ мыши и эндогенные генные сегменты Jκ; и причем один или несколько генных сегментов Vλ человека и один или несколько генных сегментов Jλ человека функционально связаны с эндогенным геном Сκ мыши; и (b) выявление вариабельного домена легкой цепи λ человека в антителе, которое специфически связывается с антигеном и было выработано генетически модифицированной мышью. 2 н. и 22 з.п. ф-лы, 13 ил., 8 табл., 7 пр.
ОПОСРЕДОВАННАЯ НУКЛЕАЗОЙ СБОРКА ДНК // 2707911
Изобретение относится к области биотехнологии и молекулярной биологии. Предложен in vitro способ сборки нуклеиновых кислот с использованием нуклеазного агента - комплекса гРНК-Cas, нуклеазы с цинковыми пальцами или эффекторной нуклеазы. Изобретение может быть использовано в прикладной биотехнологии и медицине благодаря увеличению эффективности создания длинных нуклеиновых кислот. 6 н. и 37 з.п. ф-лы, 19 ил., 1 табл., 14 пр.
Изобретение относится к биотехнологии. Описан способ модификации целевого геномного локуса в клетке млекопитающего, включающий в себя: введение в клетку нуклеазного агента, который осуществляет одно- или двухцепочечный разрыв в пределах целевого геномного локуса; введение в клетку первого большого нацеливающего вектора (LTVEC), который имеет длину по меньшей мере 10 т.п.н. и содержит первую полинуклеотидную вставку, фланкированную первым 5' гомологичным плечом и первым 3' гомологичным плечом, и второго LTVEC, который имеет длину по меньшей мере 10 т.п.н. и содержит вторую полинуклеотидную вставку, фланкированную вторым 5' гомологичным плечом и вторым 3' гомологичным плечом, причем суммарный размер первой полинуклеотидной вставки и второй полинуклеотидной вставки составляет по меньшей мере 100 т.п.н., причем первое 3' гомологичное плечо первого LTVEC имеет первую перекрывающуюся последовательность, гомологичную второму 5' гомологичному плечу второго LTVEC, и первое 5' гомологичное плечо первого LTVEC и второе 3' гомологичное плечо второго LTVEC гомологичны соответствующим геномным сегментам в пределах целевого геномного локуса, при этом целевой геномный локус модифицирован путем интеграции первой полинуклеотидной вставки и второй полинуклеотидной вставки между соответствующими геномными сегментами; и отбор клетки с проведенным нацеливанием, содержащей первую полинуклеотидную вставку и вторую полинуклеотидную вставку, интегрированные в целевой геномный локус. Изобретение позволяет модифицировать целевой геномный локус. 24 з.п. ф-лы, 4 ил., 9 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к мыши, содержащей в эндогенном локусе α-цепи FcγRI промотор α-цепи FcγRI и регуляторную последовательность, функционально связанные с геном α-цепи FcγRI, кодирующим α-цепь FcγRI, а также к способу ее создания. Также раскрыта эмбриональная стволовая клетка мыши для создания мыши, которая экспрессирует функциональный белок FcγRI, содержащий внеклеточный участок человеческой α-цепи FcγRI и внутриклеточный участок мышиной α-цепи FcγRI. Изобретение также относится к эмбриону мыши для создания мыши, которая экспрессирует функциональный белок FcγRI, содержащий внеклеточный участок человеческой α-цепи FcγRI и внутриклеточный участок мышиной α-цепи FcγRI. Изобретение позволяет эффективно получать мышь, которая экспрессирует белок FcγRI, содержащий внеклеточный участок α-цепи FcγRI человека и внутриклеточный участок α-цепи FcγRI мыши. 5 н. и 19 з.п. ф-лы, 32 ил., 3 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к генетически модифицированной мыши для получения антитела, содержащей в своем геноме зародышевой линии два неаранжированных генных сегмента Vκ иммуноглобулина человека и пять неаранжированных генных сегментов Jκ иммуноглобулина человека, функционально связанных с последовательностью константной области легкой цепи иммуноглобулина мыши, а также один или несколько неаранжированных генных сегментов VH иммуноглобулина человека, один или несколько неаранжированных генных сегментов DH иммуноглобулина человека и один или несколько неаранжированных генных сегментов JH иммуноглобулина человека, функционально связанных с последовательностью константной области тяжелой цепи иммуноглобулина мыши, а также к ее применению для получения антитела и для идентификации последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина человека. Также раскрыты выделенная В-клетка из вышеуказанной генетически модифицированной мыши, а также гибридома, полученная из указанной В-клетки. Изобретение позволяет эффективно получать антитело. 6 н. и 9 з.п. ф-лы, 19 ил., 26 табл., 14 пр.
ОТЛИЧНЫЕ ОТ ЧЕЛОВЕКА ЖИВОТНЫЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ГУМАНИЗИРОВАННЫЙ ГЕН ИНДУЦИРУЮЩЕГО ПРОЛИФЕРАЦИЮ ЛИГАНДА // 2671101
Изобретение относится к области биохимии, в частности к генетически модифицированному животному-грызуну, экспрессирующему гуманизированный белок April, а также к способу его получения. Геном вышеуказанного генетически модифицированного животного-грызуна содержит замещение геномного фрагмента эндогенного гена индуцирующего пролиферацию лиганда (April) грызуна на человеческий геномный фрагмент, содержащий экзоны 2-6 гена APRIL человека. Также раскрыты эмбриональная стволовая клетка, а также эмбрион вышеуказанного грызуна. Изобретение также относится к способу трансплантации клеток человека вышеуказанному грызуну. Изобретение позволяет эффективно получать грызуна, экспрессирующего гуманизированный белок April. 5 н. и 8 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл., 2 пр.
ОТЛИЧНЫЕ ОТ ЧЕЛОВЕКА ЖИВОТНЫЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ГУМАНИЗИРОВАННЫЙ ГЕН ФАКТОРА АКТИВАЦИИ В-КЛЕТОК // 2670016
Изобретение относится к области биохимии, в частности к генетически модифицированному животному-грызуну, экспрессирующему гуманизированный белок Baff, а также к способу его получения. Геном вышеуказанного генетически модифицированного животного-грызуна содержит замещение геномного фрагмента эндогенного гена Baff грызуна на человеческий геномный фрагмент, содержащий экзоны 3-6 гена BAFF человека, с образованием гуманизированного гена Baff. Также раскрыты эмбриональная стволовая клетка, а также эмбрион вышеуказанного грызуна. Изобретение также относится к способу трансплантации клеток человека вышеуказанному грызуну. Изобретение позволяет эффективно получать животное-грызуна, экспрессирующего гуманизированный белок Baff. 5 н. и 8 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл., 1 пр.
Изобретение относится к биохимии и представляет собой способ скрининга антитела широкого спектра действия против представляющего интерес антигена из патогена, который представляет собой ВИЧ, вирус гриппа или вирус гепатита С, включающий: (а) введение первого иммуногена, полученного из представляющего интерес антигена, мыши из линии мышей, содержащей в своей зародышевой линии: (i) ограниченный локус тяжелой цепи иммуноглобулина, содержащий единичный человеческий неперестроенный генный сегмент VH, который является человеческим генным сегментом VH1-69 или его полиморфным вариантом, один или более человеческих генных сегментов DH и один или более человеческих генных сегментов JH функционально связанных с нуклеотидной последовательностью константной области тяжелой цепи, (ii) генетически модифицированный локус легкой цепи иммуноглобулина, содержащий один или более человеческих генных сегментов Vκ и один или более человеческих генных сегментов Jκ, причем генные сегменты Vκ и Jκ функционально связаны с нуклеотидной последовательностью константной области легкой цепи, и при этом первый иммуноген содержит множество эпитопов; (b) создание у мыши возможности развития иммунного ответа на первый иммуноген, при этом иммунный ответ включает генерацию В-клеток мыши, которые экспрессируют последовательности VDJ тяжелой цепи человеческого иммуноглобулина (IgH) и последовательности VJ легкой цепи человеческого иммуноглобулина (IgL); (c) выделение клонально родственных В-клеток из мыши, которая экспрессирует рецептор В-клеток (BCR), который специфически связывает первый эпитоп первого иммуногена; (d) определение аминокислотных последовательностей VDJ IgH и VJ IgL указанного рецептора В-клеток (BCR) клонально родственных В-клеток; (e) получение из последовательностей VDJ IgH и VJ IgL аминокислотных последовательностей VDJ и VJ немутированного рецептора В-клеток (BCR); и одной или более аминокислотных последовательностей VDJ и VJ промежуточного предшественника рецептора В-клеток (BCR) указанных В-клеток на промежуточном этапе дифференцировки; (f) обеспечение множества вторых иммуногенов, содержащих вторые эпитопы, отличные от первого эпитопа, которые с повышенной аффинностью связываются с немутированным рецептором В-клеток (BCR) или промежуточным предшественником рецептора В-клеток (BCR) по сравнению с первым иммуногеном; (g) серийное введение другой мыши указанной линии вторых иммуногенов, выбранных из множества вторых иммуногенов со стадии (f), серийное введение, начиная со второго иммуногена, в немутированный BCR и далее вторых иммуногенов в промежуточные BCR последовательно более удаленные филогенетически от немутированного BCR; и (h) определение, включает ли иммунный ответ у мыши со стадии (g) антитело широкого спектра действия, которое связывает множество вторых эпитопов. Изобретение позволяет получить эффективный способ скрининга антител. 10 з.п. ф-лы, 7 ил.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к мыши для получения последовательностей вариабельной области иммуноглобулина человека, содержащей вставку одного или нескольких генных сегментов VL человека и одного или нескольких генных сегментов JL человека, вставку одного или нескольких генных сегментов VL человека и одного или нескольких генных сегментов JL человека и последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует белок ADAM6, к ее клетке и гибридоме, образованной из указанной клетки. Также раскрыт способ получения антигенсвязывающего белка, который связывается с представляющим интерес антигеном с использованием вышеуказанной мыши. Изобретение также относится к способу модификации локуса тяжелой цепи иммуноглобулина мыши, предусматривающему осуществление модификации мыши, которая приводит к снижению или устранению эндогенной активности ADAM6 у самца мыши, и осуществление модификации, которая включает в себя вставку последовательности нуклеиновой кислоты, которая кодирует белок ADAM6, в геном мыши. Изобретение позволяет эффективно получать антигенсвязывающий белок. 6 н. и 10 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 4 пр.
МЫШИ С ГУМАНИЗИРОВАННОЙ ЛЕГКОЙ ЦЕПЬЮ // 2664181
Изобретение относится к области биохимии, в частности к мыши для получения последовательностей вариабельной области иммуноглобулина человека, содержащей один или нескольких генных сегментов Vλ, человека и один или несколько генных сегментов Jλ, один или несколько генных сегментов VH человека, один или несколько генных сегментов DH человека и один или несколько генных сегментов JH и эктопическую последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует белок ADAM6 или его функциональный фрагмент, а также клетке вышеуказанной мыши. Также раскрыто применение вышеуказанной клетки для получения антигенсвязывающего белка, для получения гибридомы, для получения квадромы, для получения полностью человеческого антитела и вариабельных доменов антитела, а также применение вышеуказанной мыши для получения антигенсвязывающего белка. Изобретение также относится к способу получения антитела, которое связывается с представляющим интерес антигеном, с использованием вышеуказанной мыши. Изобретение позволяет эффективно получать последовательности вариабельной области иммуноглобулина человека. 13 н. и 52 з.п. ф-лы, 31 ил., 17 табл., 17 пр.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к грызуну, который экспрессирует химерный человеческий/относящийся к грызуну белковый комплекс МНС II, а также к его клетке и ткане. Также раскрыт способ модификации локуса МНС II мыши для экспрессии химерного человеческого/мышиного комплекса МНС II, а также способ идентификации рестриктированного по HLA класса II пептида, презентация которого клеткой человека и связывание лимфоцитом человека будет приводить к цитотоксичности несущей пептид клетки. Изобретение также относится к химерному человеческому/относящимуся к грызуну белковому комплексу МНС II для идентификации и отбора пептидов, которые будут обеспечивать подходящий ответ в Т-клетке человека. Изобретение позволяет эффективно получать грызуна, экспрессирующего химерный человеческий/относящийся к грызуну белковый комплекс МНС II. 7 н. и 15 з.п. ф-лы, 9 ил., 4 пр.
Настоящее изобретение относится к биотехнологии и генетической инженерии, в частности к генетически модифицированным грызунам, таким как мышь и крыса, которые экспрессируют химерный человеческий/не относящийся к человеку полипептид МНС I и/или человеческий полипептид β2 микроглобулина, а также к клеткам таких грызунов. Настоящее изобретение раскрывает способы получения указанных животных, а также способ идентификации эпитопа CTL и способ идентификации рестриктированного по HLA класса I пептида с их использованием. Настоящее изобретение позволяет получать биологические системы, которые будут создавать иммунную систему, которая проявляет компоненты, имитирующие функцию иммунной системы человека. 10 н. и 52 з.п. ф-лы, 10 ил., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Предложена мышь для продукции цепи иммуноглобулина. Мышь способна продуцировать цепь иммуноглобулина, включающую вариабельный домен легкой цепи, слитый с константным доменом тяжелой цепи, и содержит в своих зародышевых клетках первый нереаранжированный Vκ-сегмент легкой цепи человека и нереаранжированный Jκ-сегмент человека, функционально связанный с эндогенной нуклеотидной последовательностью константной области тяжелой цепи мыши в эндогенном мышином локусе тяжелой цепи. При этом первый нереаранжированный Vκ генный сегмент легкой цепи человека и нереаранжированный Jκ генный сегмент человека заменяют все функциональные эндогенные VH генные сегменты тяжелой цепи мыши, все функциональные эндогенные DH генные сегменты мыши и все функциональные эндогенные JH генные сегменты тяжелой цепи мыши в эндогенном мышином локусе тяжелой цепи. Также описано применение такой мыши для продукции антитела. 8 н. и 14 з.п. ф-лы, 21 ил., 5 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии. Описаны генетически модифицированные мыши, включая мышей с функциональным геном IgM и модифицированных для получения делеции домена CH1 и шарнирной области в константном домене тяжелой цепи, которая не является цепью IgM, например, в константном домене тяжелой цепи IgG. Предлагаются генетически модифицированные мыши, которые производят химерные антитела с вариабельной областью человека/константной областью мыши, имеющие только тяжелые цепи (антитела, в которых отсутствует легкая цепь), полностью мышиные антитела, имеющие только тяжелую цепь, или полностью человеческие антитела, имеющие только тяжелую цепь. Предложенная группа изобретений может быть использована в медицине. 15 н. и 48 з.п. ф-лы, 13 ил., 4 табл., 7 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и иммунологии. Изобретение относится к генетически модифицированным мышам, которые экспрессируют λ-вариабельные последовательности человека (hVλ), в том числе к мышам, которые экспрессируют последовательности hVλ из эндогенного локуса λ-легкой цепи мыши, мышам, которые экспрессируют последовательности hVλ из эндогенного локуса κ-легкой цепи мыши, и мышам, которые экспрессируют последовательности hVλ из трансгена или эписомы, при этом последовательность hVλ соединена с константной последовательностью мыши. Изобретение относится к мышам, которые являются источником подвергнутых соматической мутации λ-вариабельных последовательностей человека, подходящих для получения связывающих антиген белков. Изобретение относится к композициям и способам для получения связывающих антиген белков, которые содержат λ-вариабельные последовательности человека, в том числе для получения антител человека. 6 н. и 11 з.п. ф-лы, 24 ил., 8 табл., 7 пр.
МЫШИ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИЕ ЛЕГКУЮ ЦЕПЬ С ВАРИАБЕЛЬНОЙ ОБЛАСТЬЮ АЛЬФА ЧЕЛОВЕКА И КОНСТАНТНОЙ ОБЛАСТЬЮ МЫШИ // 2590594
Изобретение относится к генетически модифицированным мышам, которые экспрессируют вариабельные последовательности λ человека (hVλ), в том числе к мышам, которые экспрессируют последовательности hVλ из эндогенного локуса легкой цепи λ мыши, мышам, которые экспрессируют последовательности hVλ из эндогенного локуса легкой цепи κ мыши, и к мышам, которые экспрессируют последовательности hVλ из трансгена или эписомы, где последовательность hVλ связана с константной последовательностью мыши. Изобретение относится к мышам, которые являются источником соматически видоизмененных вариабельных последовательностей λ человека, подходящих для получения антигенсвязывающих белков. Изобретение относится к композициям и способам получения антигенсвязывающих белков, которые содержат вариабельные последовательности λ человека, в том числе, антител человека. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 24 ил., 8 табл., 7 пр.
МЫШЬ С ОБЩЕЙ ЛЕГКОЙ ЦЕПЬЮ // 2571205
Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии. Описана генетически модифицированная мышь, где мышь не способна к перегруппировке и экспрессии эндогенной последовательности вариабельной области легкой цепи иммуноглобулина мыши. Мышь экспрессирует только один или два вариабельных домена легких цепей человека, кодируемых последовательностями иммуноглобулинов человека, функционально связанных с геном константной области каппа (Κ) мыши в эндогенном локусе Κ мыши. Также, мышь экспрессирует обратное химерное антитело с вариабельным доменом легкой цепи, получаемым только из одного из двух генных сегментов вариабельных областей легких цепей человека, и константным доменом Κ мыши и с вариабельным доменом тяжелой цепи человека и константным доменом тяжелой цепи мыши из эндогенного локуса тяжелой цепи мыши. Предложенное изобретение может быть использовано для отбора вариабельных областей человека при получении биспецифических антител. 2 н. и 19 з.п. ф-лы, 3 ил., 12 табл., 10 пр.
