Патенты автора Чухчин Дмитрий Германович (RU)
СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ КОЛЛАГЕНОВЫХ ВОЛОКОН ДЕРМЫ // 2764514
Изобретение относится к гистологии, дерматологии, а именно к способу выделения коллагеновых волокон дермы. Способ выделения коллагеновых волокон дермы, заключающийся в обработке фиксированных в формалине при температуре 18-20°С нарезанных микротомным ножом кусочков кожи 50% раствором гидроксида калия в течение 15 часов, материал гомогенизируют струёй дистиллированной воды из пипетки Пастера, с последующим суспендированием, с проведением не менее пяти циклов гомогенизации и центрифугирования материала при 1500 оборотов в минуту в течение 5 минут циклы гомогенизации и центрифугирования проводят до достижения уровня рН надосадочной жидкости 6,0, весь материал переносят в градуированные пробирки, замораживают при -80°С, лиофильно высушивают и переносят на двухсторонний скотч для дальнейшего электронно-сканирующего исследования. Вышеописанный способ заявитель усматривает в уменьшение материальных и временных затрат в процессе выделения коллагеновых волокон дермы, а также в расширение лабораторных возможностей определения коллагена в дерме.
Изобретение относится к биотехнологии, гистологии и может быть использовано для количественного определения коллагена в ткани. Способ определения количества коллагена в ткани заключается в многократной гомогенизации материала, полученного путем замораживания, лиофильного высушивания, измельчения предварительно взвешенного кусочка ткани, с последующим ресуспендированием материала с помощью дозатора и центрифугированием, далее подготовленный материал замораживают при -80°С и лиофильно высушивают, полученный безводный материал взвешивают, определяют массу материала m1, разводят материал в 900 мкл буферного раствора с рН 7,0 и добавляют 100 мкл раствора коллализина, который заранее приготовляют путем растворения содержимого одной ампулы коллализина, содержащей коллагеназу в виде лиофилизата в количестве 1000 КЕ, в 2 мл буферного раствора с рН 7,0, пробирку с содержимым перемешивают в течение 2 часов, три раза проводят цикл гомогенизации, центрифугирования при 13400 оборотов в минуту и ресуспендирования материала, материал замораживают при -80°С, лиофильно высушивают и взвешивают, определяют массу материала m2, по разнице масс m1-m2 определяют массу коллагена.
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для оценки дегидрогеназной активности активного ила
