Патенты автора Калошин Алексей Алексеевич (RU)
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой рекомбинантную плазмидную ДНК pSp-raPLY, содержащую ген для экспрессии рекомбинантного атоксичного пневмолизина S. pneumoniae, экспрессия которого находится под контролем промотора фага Т5, двух лактозных оперонов, лямбда t0 региона остановки транскрипции, терминатора транскрипции rrnBT1. Плазмида pSp-raPLY содержит ген устойчивости к ампициллину, участок инициации репликации плазмиды ColE1. Данной плазмидой трансформируют клетки реципиентного штамма Escherichia coli M15. Реципиентный штамм Е. coli M15 содержит плазмиду pREP4, которая включает ген lac белка, способного связываться с lac-оперонами, и ген устойчивости к канамицину. В своем геноме штамм Е. coli M15 содержит высокоэкспрессируемый ген РНК-полимеразы бактериофага Т5. В результате получен штамм Е. coli M15/pSp-raPLY с продуктивностью не менее 5 мг рекомбинантной атоксичной формы пневмолизина S. pneumoniae на 1 л культуральной среды или 5-10 г влажной биомассы клеток штамма. 3 н.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 4 пр.
ИММУНОАДЪЮВАНТНАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ВАКЦИН ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННЫХ АГЕНТОВ ВИРУСНОЙ И БАКТЕРИАЛЬНОЙ ПРИРОДЫ // 2697527
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для получения адъювантной композиции, состоящей из хитозана и олигодезоксинуклеотида. Адъювантная композиция, содержит хитозан с молекулярной массой в диапазоне от 200 до 1000 кДа, степенью деацетилирования от 75 до 98%, индексом полидисперсности не более 2,0, уровнем эндотоксинов и постороннего белка менее 100 EU/мл и 0,05%, соответственно, А олигодезоксинуклеотид представляет собой синтетический олигодезоксинуклеотид, который состоит из 5 повторяющихся сегментов нуклеотидов CG с тиофосфорильными связями у межнуклеотидных фосфатов; при соотношении (масс.) компонентов хитозан : синтетический олигодезоксинуклеотид (20-50):1. Использование данного изобретения обеспечивает высокую иммуногенность и защитный эффект при добавлении адъювантной композиции к вакцинам против инфекционных агентов бактериальной и вирусной природы. 2 з.п. ф-лы, 5 пр., 3 табл.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой рекомбинантную плазмидную ДНК pPA-OPRF-ATOX-OPRI, которая содержит слитые гены, кодирующие белки F и I наружной мембраны Pseudomonas aeruginosa, а также атоксический вариант экзотоксина A Pseudomonas aeruginosa. Их экспрессия находится под контролем промотора фага Т7, двух лактозных оперонов, лямбда t0 региона остановки транскрипции, терминатора транскрипции rrnBT1. Плазмида pPA-OPRF-ATOX-OPRI содержит ген устойчивости к канамицину, участок инициации репликации плазмиды ColE1. Данной плазмидой трансформируют клетки реципиентного штамма Escherichia coli BL21(DE3), содержащего в геноме высокоэкспрессируемый ген РНК-полимеразы бактериофага Т7. Изобретение относится также к способу получения рекомбинантного белка. Данное изобретение позволяет получать гибридный рекомбинантный белок, включающий аминокислотные последовательности белков F и I наружной мембраны и атоксического варианта экзотоксина A Pseudomonas aeruginosa, для разработки вакцины с целью профилактики инфекций, вызываемых синегнойной палочкой, а также для получения донорских иммуноглобулинов, предназначенных для терапии синегнойной инфекции. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантной плазмидной ДНК pPA-OPRFI, кодирующей гибридный рекомбинантный белок F-I наружной мембраны Pseudomonas aeruginosa, штамма бактерий E.coli PA-OPRFI, продуцента такого гибридного белка и способа получения указанного рекомбинантного белка. Представленная плазмидная ДНК содержит фрагмент ДНК, содержащий последовательность модифицированного промотора бактериофага Т5 и двух лактозных оперонов; фрагмент ДНК, содержащий сайт посадки рибосомы, стартовый ATG-кодон и последовательность, кодирующую шесть гистидинов; фрагмент ДНК, содержащий полноразмерные последовательности генов oprF и opri P.aeruginosa; фрагмент ДНК, содержащий сайт посадки рибосомы, и фрагмент ДНК, содержащий лямбда t0 регион остановки транскрипции. Представленные изобретения позволяют получать гибридный рекомбинантный белок F-I наружной мембраны P.aeruginosa для его иммунобиологического тестирования при разработке вакцины против синегнойной палочки, а также для получения донорских иммуноглобулинов, предназначенных для терапии активных форм синегнойной инфекции. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 4 пр.
Группа изобретений относится к биотехнологии. Рекомбинантная плазмидная ДНК pPA-OPRF-ETA размером 8007 пар оснований кодирует синтез рекомбинантного белка OprF-ETA Pseudomonas aeruginosa. Плазмида содержит следующие фрагменты: Xba I-Hind III фрагмент ДНК размером 177 пар оснований; Hind III-Hind III фрагмент ДНК размером 1059 пар оснований; Hind III-Xho I фрагмент ДНК размером 1598 пар оснований; Sph I-Hind III фрагмент ДНК размером 425 пар оснований; EcoR I - BamH I фрагмент ДНК размером 57 пар оснований. Предложены также штамм бактерий Еscherichia coli PA-OPRF-ETA, продуцирующий белок OprF-ETA и полученный путем трансформации родительского штамма бактерий Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК рРА-OPRF-ETA и способ получения указанного белка OprF-ETA. Группа изобретений позволяет получить целевой продукт с массой около 100 кДа. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 4 пр.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АДЪЮВАНТА // 2493257
Изобретение относится к области микробиологии. Способ предусматривает культивирование гриба вида Fusarium sambucinum на питательной среде, содержащей источник углерода 3-4%, азота 0,2-0,3%, фосфора 0,2-0,3% и микроэлементы 0,07-0,08%, в стерильных условиях при температуре 26-30°С с перемешиванием и аэрацией в течение 36-72 ч с последующим отделением культуральной жидкости от биомассы гриба. Причем культуральную жидкость центрифугируют при комнатной температуре в течение 15-20 мин при 800-1500 об/мин, а целевой продукт получают из супернатанта отделением пептидов с молекулярной массой от 3000-60000 Д. Также предварительно перед центрифугированием культуральную жидкость нагревают до температуры 110-115°С и с давленикм 1,3-1,5 атм по 1,5-2 град/мин с последующей экспозицией в течение 1,5-2,5 часа. Адъювант, приготовленный согласно изобретению, обладает большей стимулирующей иммунитет потенцией, безвреден в составе вакцин и других продуктов иммунологического назначения, ареактогенен, может применяться как самостоятельно, так и в сочетании с масляными адъювантами или адъювантами-сорбентами на основе геля гидроокиси алюминия и других веществ. 1 з.п. ф-лы, 3 табл., 9 пр.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И ЭКСПРЕССИИ КОДИРУЮЩЕЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ИЗОФОРМЫ 2 ГЕНА РЕНАЛАЗЫ ЧЕЛОВЕКА // 2482185
Изобретение относится к области генной инженерии и может быть использовано в биотехнологии для получения представляющих практический интерес белков, являющихся продуктами молчащих генов или генов с низким уровнем экспрессии
