Патенты автора ГИЛЛЬЯМ Густав (SE)
Изобретение относится к области биотехнологии. Описан способ производства фактора VII без содержания прионов с последовательными стадиями очистки, включающими хроматографию, отличающийся тем, что по меньшей мере одну стадию хроматографии выполняют с использованием мультимодальной смолы, обеспечивают фракцию, содержащую фактор VII в водном растворе, затем приводят ее в контакт с мультимодальной смолой при рН 6-9; мультимодальную смолу со связанным фактором VII промывают водным промывочным буфером с целью удаления примесей и задержки фактора VII перед элюированием фактора VII, проводят стадию элюирования с мультимодальной смолой при рН 6-9 буфером, содержащим аргинин, и осуществляют сбор фракций, содержащих фактор VII. В одном из вариантов реализации способа стадия мультимодальной хроматографии объединена со стадией аффинной хроматографии, где аффинность обеспечивается лигандом на основе экспрессированного в дрожжах белка, и чистота финального продукта аффинной хроматографической смолы составляет более 95%. Изобретение расширяет арсенал способов производства фактора VII без содержания прионов. 14 з.п. ф-лы, 1 ил., 8 табл., 7 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии. Описана композиция, подходящая для лечения гемофилии А, содержащая очищенный рекомбинантный FVIII, полученный способом очистки или обогащения фактора свертывания крови FVIII с использованием хроматографии. В одном из вариантов реализации фактор связывания крови FVIII получают способом хроматографии, включающим стадии: обеспечение фракции, содержащей FVIII, приведение фракции в контакт с катионной многомодальной смолой, промывание катионной многомодальной смолы водным промывочным буфером и элюирование содержащих FVIII фракций водным элюирующим буфером. Предложенное изобретение расширяет арсенал средств для лечения гемофилии А. 15 з.п. ф-лы, 7 ил., 22 табл., 10 пр.
Настоящее изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ очистки коагуляционного фактора IX (FIX). Способ включает хроматографию с использованием мультимодальной смолы, при которой осуществляется контакт фракции, содержащей FIX, с мультимодальной смолой, промывка промывочным буфером для удаления примесей и элюирование FIX с мультимодальной смолы буфером, содержащим аргинин, с последующим сбором фракций, содержащих FIX, в очищенной или обогащенной форме. Предложенный способ дает возможность дальнейшего использования стадии очистки целевого белка, связанного с мультимодальной смолой, перед элюированием, а также возможность проведения элюирования в мягких условиях. Предложенный способ может быть использован в биохимии для очистки коагуляционного фактора IX. 15 з.п. ф-лы, 1 ил., 17 табл., 7 пр.
СПОСОБ ОЧИСТКИ БЕЛКА ФАКТОРА РОСТА // 2571926
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу очистки G-CSF (гранулоцитарный колониестимулирующий фактор) в последовательности очистки, применяющей хроматографию. Способ включает осуществление по меньшей мере одной хроматографии с использованием многомодальной смолы с отрицательно заряженным лигандом в виде 2-(бензоиламино)бутановой кислоты. G-CSF связывают с многомодальной смолой при pH в интервале 4-6,2. G-CSF элюируют при pH выше 6,3 или элюирующим агентом в элюирующем буфере, где указанный агент включает аминокислоту, имеющую основную боковую цепь и/или высокую ионную силу в элюирующем буфере, выбранную из группы, состоящей из аргинина, лизина и/или гистидина. Концентрация элюирующего агента находится в интервале от примерно 0,1 М до примерно 2,0 М. Предложенное изобретение позволяет получить очищенный G-CSF с высоким выходом. 13 з.п. ф-лы, 14 ил., 10 табл., 11 пр.
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу очищения или обогащения фактора свертывания крови FVIII с использованием хроматографии. Способ включает обеспечение фракции, содержащей рекомбинантный FVIII, в водном растворе с высокой ионной силой, где водный раствор содержит рекомбинантный FVIII в растворе с большой концентрацией соли, соответствующей проводимости в диапазоне от приблизительно 25 до приблизительно 200 мС/см при 25°C, приведение фракции, содержащей рекомбинантный FVIII, в контакт с многомодальной смолой, которая представляет собой Capto Adhere или Capto ММС. Элюируют содержащие рекомбинантный FVIII фракции водным элюирующим буфером, содержащим, по крайней мере, одну аминокислоту, которая положительно заряжена при величине pH 6-8, где аминокислота, которая положительно заряжена при величине pH 6-8, выбрана из группы аминогрупп, включающей аминокислоты, такие как лизин, аргинин, гистидин и их комбинаций, в концентрации более 0,4 М. Предложенное изобретение позволяет получить очищенный или обогащенный фактор свертывания крови FVIII с высоким выходом. 13 з.п. ф-лы, 8 ил., 22 табл., 10 пр., 3 прилож.
