Патенты автора Сиволобова Галина Филипповна (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Представлен набор рекомбинантных плазмидных ДНК для получения рекомбинантных вирусов Сендай штамма Москва. Изобретение относится к рекомбинантным плазмидным ДНК, содержащим полноразмерную ДНК-копию генома вируса Сендай штамма Москва и гены структурных белков нуклеокапсида N, фосфопротеина Р и вирусной полимеразы L, и может быть использовано в биотехнологии, в частности в генетической инженерии для конструирования рекомбинантных вариантов вируса Сендай штамма Москва, содержащих встройки трансгенов противоопухолевых белков или протективно-значимых антигенов патогенных агентов, с целью разработки на их основе противоопухолевых лекарственных средств и векторных вакцин против инфекционных заболеваний. Структурный элемент включает полилинкер из пяти уникальных сайтов для крупнощепящих эндонуклеаз рестрикции BsiWI, NruI, ClaI, AscI, BssHII, за которым следует сигнал терминации транскрипции трансгена и сигнал реинициации транскрипции последующего гена для РНК-полимеразы вируса Сендай. Экспрессия генов N, Р и L вируса Сендай штамма Москва так же, как и синтез геномных РНК рекомбинантных штаммов вируса Сендай, осуществляется с соответствующих плазмидных ДНК под контролем полимеразы фага Т7. Точность размера геномных РНК контролируется рибозимами, встроенными по ее 3' и 5' концам. Техническим результатом изобретения является получение 3-х рекомбинантных плазмидных ДНК, экспрессирующих гены N, Р и L вируса Сендай штамма Москва (вспомогательные плазмиды pET15b-N, pET15b-P, pET15b-L), а также двух плазмид с полноразмерными копиями ДНК геномной РНК вируса Сендай штамм Москва (GenBank Асc. КР717417.1), содержащих структурный элемент для встройки и экспрессии трансгенов в 3'-нетранслируемой области вирусного генома (плазмида pSen2-MSC(N)) и между генами Р и М (pSen2-MCS(M)). Набор из трех вспомогательных плазмид и геномной плазмиды pSen2-MSC(N) обеспечивает создание рекомбинантных вариантов вируса Сендай штамма Москва с высоким уровнем экспрессии трансгенов. А набор из тех же вспомогательных плазмид и геномной плазмиды pSen2-MSC(M) обеспечивает создание рекомбинантных вариантов вируса Сендай штамма Москва со средним уровнем экспрессии трансгенов. Верификация заявляемого набора рекомбинантных плазмидных ДНК была проведена на примере модельного трансгена зеленого флюоресцентного белка EGFP. 2 н.п. ф-лы, 9 ил., 3 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Противоопухолевое средство на основе рекомбинантного штамма вируса осповакцины содержит рекомбинантный штамм VV-GMCSF-Lact вируса осповакцины в количестве (1-2)×107 БОЕ, способный подавлять рост солидной злокачественной опухоли, депонированный в ФБУН ГНЦ ВБ “Вектор” под номером V-688, и фармацевтически приемлемый растворитель до 1 мл. Исходные компоненты указаны при содержании на 1 мл. Также предусмотрен способ получения противоопухолевого средства. Изобретение обеспечивает повышение противоопухолевой эффективности средства и расширение диапазона его функциональной активности в отношении глиобластомы, лимфосаркомы и карциномы молочной железы (солидных опухолей человека и животных). 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 3 ил., 5 пр.
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к рекомбинантному штамму вируса осповакцины (ВОВ), продуцирующему апоптоз-индуцирующий онкотоксический белок NS1 парвовируса крыс Н-1 и обладающему онколитической активностью в отношении глиобластомы человека. Штамм VV-NS1-dGF депонирован в Государственной коллекции возбудителей вирусных инфекций и риккетсиозов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора под номером V-803. рекомбинантный штамм VV-NS1-dGF получен на основе штамма Л-ИВП вируса осповакцины, содержащего делецию фрагмента гена вирусного ростового фактора, в район которой встроен синтетический ген NS1 парвовируса крыс Н-1. Ген NS1 экспрессируется под контролем ранне-позднего синтетического промотора PE/L ВОВ с образованием белка с молекулярной массой 100 кДа. Изобретение позволяет расширить арсенал средств для разработки лекарственных средств нового поколения для борьбы с онкологическими заболеваниями. 6 ил., 5 пр.
Представленный рекомбинантный штамм обладает адресной онколитической активностью и продуцирует секретируемый химерный белок, состоящий из ГМ-КСФ человека и лактаптина (GMCSF/lact). Штамм VV-GMCSF/lact-dGF сконструирован на основе штамма Л-ИВП вируса осповакцины, содержащего делеции фрагментов генов вирусной тимидинкиназы и ростового фактора. В район делеции гена тимидинкиназы встроен трансген химерного белка GMCSF/lact, в состав которого входит генный адьювант ГМ-КСФ, соединенный через гибкий линкер GlyGlyGlySer с онкотоксическим пептидом лактаптином. Заявленный штамм имеет сниженную более чем в 100 раз вирулентность по сравнению с исходным штаммом Л-ИВП, а также высокую адресную онколитическую активность в отношении клеток опухолей человека различного генеза. Штамм депонирован в Государственную коллекцию возбудителей вирусных инфекций и риккетсиозов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» под регистрационным номером V-711 (18.04.2016). Изобретение обеспечивает дополнительную аттенуацию вируса VACV в отношении нормальных клеток и усиливает его литическую активность в отношении раковых клеток, а также может быть использовано в биотехнологии. 8 ил., 3 табл., 6 пр.
Изобретение относится к рекомбинантному штамму вируса осповакцины (VACV). Охарактеризованный рекомбинантный штамм VV-GMCSF-S-Lact сконструирован на основе штамма Л-ИВП вируса осповакцины, содержащего делеции фрагментов генов вирусной тимидинкиназы и ростового фактора, в районы которых встроены: ген гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) человека, структура которого соответствует кДНК матричной РНК ГМ-КСФ человека, в центральной части гена вирусной тимидинкиназы; и ген секретируемого лактаптина S-Lact, кодирующий фрагмент каппа-казеина человека 23-134 а.о. с «пришивкой» к его N-концу сигнального пептида ГМ-КСФ (MWLQSLLLLGTVACSIS), в левом концевом районе вирусного генома. Ген ГМ-КСФ человека экспрессируется под контролем природного промотора P7.5k вируса осповакцины и продуцирует секретируемую форму биологически активного ГМ-КСФ человека в клетках млекопитающих. Ген S-Lact экспрессируется под контролем синтетического промотора VACV Р7.5synth и продуцирует секретируемый онкотоксический белок лактаптин. Представленный штамм обладает адресной онколитической активностью в отношении клеток рака молочной железы человека in vitro и in vivo и депонирован в ГКВ возбудителей вирусных инфекций и риккетсиозов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» под номером V-690. 6 ил., 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к рекомбинантному штамму вируса осповакцины (ВОВ). Представленный рекомбинантный штамм VV-GMCSF-Lact сконструирован на основе штамма Л-ИВП вируса осповакцины, содержащего делеции фрагментов генов вирусной тимидинкиназы и ростового фактора, в районы которых встроены: ген гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) человека, структура которого соответствует к ДНК матричной РНК ГМ-КСФ человека, в центральной части гена вирусной тимидинкиназы; и ген лактаптина, кодирующий фрагмент каппа-казеина человека 23-134 а.о., в левом концевом районе вирусного генома. Ген ГМ-КСФ человека экспрессируется под контролем природного промотора Р7.5k вируса осповакцины и продуцирует секретируемую форму биологически активного ГМ-КСФ человека в клетках млекопитающих. Ген лактаптина экспрессируется под контролем синтетического промотора вируса осповакцины P7.5synth и продуцирует онкотоксический рекомбинантный белок лактаптин. Представленный штамм депонирован в Государственной коллекции возбудителей вирусных инфекций и риккетсиозов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» под номером V-688. Охарактеризованный штамм обладает высокой онколитической активностью в отношении клеток рака молочной железы человека и может быть использован в биотехнологии. 5 ил., 4 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантного штамма вируса осповакцины. Охарактеризованный штамм сконструирован на основе штамма Л-ИВП вируса осповакцины и содержит встройку гена гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) человека, структура которого соответствует кДНК матричной РНК ГМ-КСФ человека, представленной в GenBank под номером Ml 1220.1. Ген ГМ-КСФ человека экспрессируется под контролем природного промотора р7.5К вируса осповакцины и продуцирует секретируемую форму биологически активного ГМ-КСФ человека в клетках млекопитающих на уровне 40 мкг на мл культуральной среды. Штамм VV-GMCSF-S1/3 депонирован в Государственной коллекции Роспотребнадзора возбудителей вирусных инфекций, риккетсиозов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» под номером V-631 и может быть использован для разработки лекарственных средств для борьбы с онкологическими и инфекционными заболеваниями. 3 пр., 5 ил.
Изобретение относится к области молекулярной биологии, генной инженерии и микробиологии
