Патенты автора Лисов Александр Викторович (RU)
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к получению сфероидов, посредством обработки клеток полимерами 2,5-ДГБК из прикрепленных культур клеток млекопитающих. Способ включает культивирование клеток в стандартной для них ростовой среде до стадии субмонослоя с последующим откреплением от подложки, ресуспендированием и переносом клеток в ростовую среду, содержащую полимеры 2,5-ДГБК (здесь и в дальнейшем молекулярная масса полимеров 40 кДа) в концентрации от 50 мкг/мл до 400 мкг/мл, и инкубированием клеток до образования сфероидов. Может быть осуществлено культивирование клеток в стандартной для них ростовой среде до достижения клетками высокой плотности с последующей заменой ростовой среды на ростовую среду с добавлением полимеров 2,5-ДГБК в концентрации от 50 мкг/мл до 400 мкг/мл и отделением клеток от подложки при помощи механического воздействия и инкубированием полученных клеточных агрегатов без разделения на отдельные клетки в ростовой среде с добавлением полимеров 2,5-ДГБК в концентрации от 50 мкг/мл до 400 мкг/мл до формирования сфероидов. Может быть осуществлено культивирование единичных клеток на многолуночных планшетах с низкоадгезивным покрытием до формирования клонов с последующей заменой ростовой среды на среду, содержащую полимеры 2,5-ДГБК в концентрации от 50 мкг/мл до 400 мкг/мл, и отделением клеток от подложки механическими методами и инкубированнием клонов в суспензии в присутствии полимеров в концентрации от 50 мкг/мл до 400 мкг/мл до образования сфероидов, состоящих из клеток, являющихся потомками единичной клетки и, следовательно, представляющих клон генетически идентичных клеток. Изобретение позволяет получать трехмерные структуры (сфероиды) как из группы клеток, так и посредством клонирования единичной клетки. 9 пр., 4 ил.
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения ферментного препарата путем культивирования в биореакторах каждого из рекомбинантных продуцентов P. pastoris К для ксиланазы из бактерии Nocardiopsis halotolerans ВКМ Ас-2519, P. pastoris Б для бета-глюканазы из бактерии Cellulomonas flavigena ВКМ Ас-1137, P. pastoris Ц для целлюлазы из бактерии Streptomyces bottropensis ВКМ Ас-1755, концентрирования культуральной жидкости продуцентов, сушки полученного концентрата и смешивания высушенных препаратов ксиланазы, бета-глюканазы и целлюлазы в соотношении 1:1:1. Получаемый препарат имеет активность ксиланазы не менее 10000 Ед./г; целлюлазы не менее 5000 Ед./г; бета-глюканазы не менее 8000 Ед./г; максимальную активность проявляет в диапазоне рН 5,0-8,0. 4 ил., 2 пр.
Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложена плазмидная ДНК pQE30-A2.1, обеспечивающая экспрессию щелочной сериновой протеиназы, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую рекомбинантную щелочную сериновую протеиназу семейства S1 из Streptomyces avermitilis VKM Ac-1301. Предложен штамм E. coli M15 (pRep4, pQE30-A2.1) - продуцент щелочной сериновой протеиназы семейства S1, полученный путем трансформации штамма E. coli М15 (pRep4) указанной плазмидой. Группа изобретений позволяет получать ранее неохарактеризованную протеиназу из Streptomyces avermitilis VKM Ac-1301 с молекулярной массой 44,92 кДа, которая в дальнейшем может быть использована в составе моющих средств. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 1 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способам получения ферментных препаратов. Изобретение касается термостабильной двухдоменной лакказы бактерии Streptomyces griseoflavus Ac-993 со щелочным оптимумом активности, последовательности ДНК, кодирующей данный фермент, и способа получения фермента, включающий клонирование в клетках бактерии Escherichia coli гена фермента, продукцию фермента в клетках Escherichia coli, внесение ионов меди в среду для культивирования рекомбинантного штамма для образования активного фермента, получение ферментного препарата методами металлхелатной хроматографии и гельфильтрации. Изобретение позволяет расширить ассортимент ферментов, таких как лакказа. 3 н.п. ф-лы,3 ил.
Изобретение относится к химической технологии и технологиям получения ветеринарных, медицинских и фармацевтических препаратов. Способ получения нового противовирусного вещества на основе 2,5-дигидроксибензойной кислоты и желатина включает в себя окисление 2,5-дигидроксибензойной кислоты ферментом лакказой до промежуточных феноксирадикалов и семихинонов, которые далее сополимеризуются с желатином, и отделение полученного сополимера от низкомолекулярных компонентов с помощью диализа; оптимальными концентрациями компонентов реакционной смеси являются для 2,5-дигидроксибензойной кислоты - 15-80 мМ, для желатина - 1-13 мг/мл реакционной смеси, для лакказы - 0,5-10 Ед активности/мл реакционной смеси. Полученный сополимер обладает противовирусной активностью в отношении герпесвирусов, в частности в отношении вируса болезни Ауески. 2 табл., 1 ил., 3 пр.
