Патенты автора Львова Мария Николаевна (RU)

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой рекомбинантную плазмидную ДНК pMALTEV-legumain, молекулярной массой 4,78 мегадальтон и размером 7839 п.н., кодирующую полипептид, обладающий антигенными свойствами белка легумаин Opisthorchis felineus, и содержащую фрагмент векторной плазмиды pMALTEV, включающий Ptac промотор; lac-операторную последовательность; последовательность гена malE, кодирующего мальтоза-связывающий белок; сочетание терминаторов транскрипции rrnB Т1Т2 E.coli; ген β-лактамазы и участок ori (pBR322) инициации репликации; кДНК гена легумаин O.felineus без сигнального пептида, фланкированную сайтами рестрикции BamHI и HindIII; промотор гибридный Ptac; lac-операторную последовательность для усиления связывания lac-репрессора; терминаторы транскрипции гена rrnB E.coli (t1 и t2); в качестве генетического маркера ген β-лактамазы (ampR), детерминирующий устойчивость трансформированных плазмидой pMALTEV-legumain клеток E.coli к ампициллиновым антибиотикам; нуклеотидную последовательность, кодирующую MBP (мальтоза-связывающий белок), являющийся частью гибридной последовательности рекомбинантного белка MBP-legumain и позволяющий выделять рекомбинантный полипептид методами аффинной хроматографии; уникальные сайты эндонуклеаз рестрикции, имеющие следующие координаты: BamHI (2668), EcoRI (2675), StuI (2685), SalI (2691), SpeI (2704), NotI (2711), XbaI (2725), PstI (2737), XhoI (2740), SphI (2750), KpnI (2756), HindIII (2758). Изобретение относится также к штамму E.coli BL21(DE3)pLysS-pMALTEV-legumain, полученному с помощью рекомбинантной плазмидной ДНК pMALTEV-legumain, депонированному в коллекции культур микроорганизмов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора под номером В-1253. Изобретение позволяет получить рекомбинантный гибридный полипептид с антигенными свойствами белка легумаина O.felineus, обеспечивающий высокую специфичность к антителам паразитарной инфекции O.felineus, что позволяет создавать высокочувствительные тест-системы с использованием указанного полипептида. 2 н.п. ф-лы, 6 ил., 5 пр.

 


Наверх