Патенты автора Киреев Федор Дмитриевич (RU)
Изобретение относится к медицине, а именно к молекулярной иммунологии и аллергологии, и может быть использовано для диагностики аллергической бронхиальной астмы. В пробы крови добавляют моноклональные антитела к TNFRI, TNFR2, CD19, CD5, CD4, CD8, CD45RA. Производят анализ мононуклеарных клеток периферической крови методом проточной цитометрии. Выделяют гейтированием CD19+CD5+ В-лимфоциты, наивные цитотоксические клетки CD8+CD45RA+, Т-хелперные клетки CD4+. Определяют показатели экспрессии рецепторов TNFR1 и TNFR2 путем подсчета количества рецепторов на клетках изучаемых субпопуляций. Определяют процент клеток, несущих рецепторы TNFRI и TNFR2 в каждой выделенной субпопуляции. Рассчитывают на основе параметрической логистической регрессионной модели вероятность наличия аллергической бронхиальной астмы по формуле:
гдее=2,7182818 - математическая константа - основание натурального логарифма, α0 = 12,455816360508 - коэффициент, α1 = -0,427698308974449 - коэффициент, α2 = -0,006454484262661- коэффициент, α3 = -0,005092094923 - коэффициент, х1 = процент клеток, несущих одновременно рецепторы TNFR1 и TNFR2 среди CD19+CD5+ В-лимфоцитов, х2 = среднее количество рецепторов 1-го типа на TNFR1-позитивных CD8+CD45RA+ цитотоксических наивных Т-лимфоцитах, х3 = среднее количество рецепторов 1-го типа на TNFR1-позитивных CD4+ Т-хелперных клетках. Если Р более или равно 0,5, то диагностируют наличие аллергической бронхиальной астмы. Способ обеспечивает возможность диагностики аллергической бронхиальной астмы за счет оценки среднего количества рецепторов и процента клеток, экспрессирующих рецепторы 1-го и 2-го типа к TNF-α на субпопуляциях мононуклеарных клеток у пациентов с подозрением на бронхиальную астму. 3 ил., 4 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к ревматологии, и может быть использовано для ранней диагностики ревматоидного артрита. Способ заключается в том, что в пробы крови добавляют моноклональные антитела к TNFRI, TNFR2, CD4, CD45R0, CD45RA, CD3, производят анализ мононуклеарных клеток периферической крови методом проточной цитометрии. Выделяют гейтированием CD3+--Т-лимфоциты, наивные Т-хелперные клетки (CD4+CD45RA+), Т-хелперные клетки памяти (CD4+CD45R0+). Далее определяют показатели экспрессии рецепторов TNFR1 и TNFR2 путем подсчета количества рецепторов на клетках изучаемых субпопуляций, определяют процент клеток, несущих рецепторы TNFRI и TNFR2 в каждой выделенной субпопуляции, после чего рассчитывают на основе параметрической логистической регрессионной модели вероятность наличия РА по формуле
где е=2,7182818 - математическая константа - основание натурального логарифма, α0=2.386696717005736 - коэффициент, α1=-0.00276285111326 - коэффициент, α2=0,00189985337763 - коэффициент, α3=-0.28206543500757 - коэффициент, x1 - количество рецепторов TNFR2 на CD3+ Т-лимфоцитах, х2 - количество TNFR1 на Т-хелперных клетках памяти CD4+CD45R0+, x3 - процент TNFR1 положительных клеток среди наивных Т-хелперных клеток CD4+CD45RA+. При значении Р≥0,5 имеется вероятность наличия ревматоидного артрита. Использование данного способа оценки субпопуляций мононуклеарных: клеток TNFR1+TNFR2 - клеток среди наивных Т-хелперных клеток и количества рецепторов 1 типа на Т-хелперных клетках памяти, а также рецепторов 2 типа на CD3+ Т-клетках позволяет различать показатели здоровых доноров и больных РА на ранней стадии. 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 5 пр., 1 ил.
Изобретение относится к медицине и касается способа выделения подклассов иммуноглобулина G (IgG) аутоантител к иммунорегуляторному цитокину фактору некроза опухоли (TNF), заключающегося в получении общей фракции IgG аффинной хроматографией с использованием сорбента Protein G Sepharose с последующей нейтрализацией, объединением и диализом IgG, очистке полученной фракции IgG от примеси TNF. При этом выделение подклассов IgG производят из фармацевтического препарата иммуноглобулина для внутривенного введения, после получения фракции IgG осуществляют ее очистку от примеси TNF ультрафильтрацией с использованием центрифужных фильтров, затем проводят этап выделения антител IgG3 и получения смеси IgG1, IgG2, IgG4 аффинной хроматографией; затем выделяют антитела IgG1 многократной негативной аффинной хроматографией с последующим объединением и диализом, затем выделяют антитела IgG2 многократной негативной аффинной хроматографией с последующим объединением и диализом, затем проводят очистку антител IgG1 и IgG2 от примеси IgG4 негативной аффинной хроматографией, после чего проводят выделение специфических аутоантител к TNF подклассов IgG1, IgG2, IgG3 аффинной хроматографией с последующей нейтрализацией, объединением и диализом. Изобретение обеспечивает получение чистых фракций аутоантител к TNF подклассов IgG1, IgG2 и IgG3. 1 пр., 1 табл.
Изобретение относится к медицине и касается способа выделения фракций аутоантител класса IgG к иммунорегуляторному цитокину TNF из сыворотки крови человека с использованием комплекса процедур аффинной хроматографии и процедуры магнитной сепарации, проводимой с использованием магнитных частиц, покрытых стрептавидином, и поликлональных антител к TNF, меченых биотином. Изобретение обеспечивает получение чистых фракций аутоантител к TNF класса IgG. 1 табл.
