Патенты автора Голотин Василий Александрович (RU)
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена плазмида pET40CmAP/OmpF размером 8767 пар оснований (п.о.), определяющая синтез рекомбинантного гибридного бифункционального полипептида CmAP/OmpF. Указанная плазмида характеризуется наличием следующих фрагментов: NcoI/SalI-фрагмента плазмиды pET-40b(+) (Novagen) и фрагмента ДНК размером 2577 п.о., содержащего химерный ген, кодирующий полноразмерную щелочную фосфатазу CmAP и полноразмерный порин Yersinia pseudotuberculosis OmpF, соединенные между собой последовательностью, кодирующей гибкий линкер (G4S)3 (SEQ ID NO: 1). Предложен рекомбинантный штамм Е. coli Rosetta (DE3)/pET40CmAP/OmpF, являющийся продуцентом гибридного бифункционального полипептида CmAP/OmpF и полученный путем модификации штамма Е. coli Rosetta (DE3) указанной плазмидой pET40CmAP/OmpF. Группа изобретений обеспечивает высокий выход гибридного белка CmAP/OmpF со свойствами рекомбинантной высокоактивной щелочной фосфатазы CmAP и порообразующего белка OmpF. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
Изобретение относится к пищевой промышленности, а именно к обработке готовой мясной продукции: сосисок, колбас, мясной деликатесной продукции. Средство для антимикробной обработки готовой мясной продукции содержит, мас. %: лактат натрия в виде 60% сиропа - 2,7-3,2; сорбат калия - 2,8-3,1; хлорид магния - 0,3-0,5 и воду – остальное, а также выделенный из гепатопанкреаса краба промысловых видов полиферментный препарат, в состав которого входят ДНКаза и коллагеназа, из расчета 20-25 мл на 1 л готового средства. Обеспечивается расширение спектра антимикробного действия при одновременном повышении эффективности антимикробной обработки готовой мясной продукции, препятствующей развитию патогенных микроорганизмов, и увеличение срока ее хранения без ухудшения качества. 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области генной инженерии и биотехнологии и представляет собой рекомбинантную плазмиду pET40CmAP/CGL, определяющую синтез гибридного бифункционального полипептида CmAP/CGL со свойствами высокоактивной щелочной фосфатазы морской бактерии Cobetia marina (СmАР) и галактозоспецифичного лектина мидии Crenomytilus grayanus (CGL). Плазмида включает NcoI/SalI - фрагмент плазмиды pET-40b(+) (Novagen) и фрагмент ДНК размером 2028 пар оснований, который является химерным геном, кодирующим структурные гены щелочной фосфатазы CmAP и галактозоспецифичного лектина CGL, соединенных между собой полинуклеотидом, кодирующим аминокислотную последовательность линкера (G4S)3EL и сайта энтерокиназы D4K. Предложен также рекомбинантный штамм E. coli Rosetta(DE3)/pET40CmAP/CGL, трансформированный указанной плазмидой, - продуцент гибридного бифункционального белка CmAP/CGL, включающего аминокислотные последовательности рекомбинантной щелочной фосфатазы CmAP и галактозоспецифичного лектина CGL. Предложен способ получения гибридного бифункционального белка CmAP/CGL. Изобретение позволяет получать высокоочищенный препарат гибридного белка CmAP/CGL со свойствами рекомбинантной высокоактивной щелочной фосфатазы CmAP и галактозоспецифичного лектина CGL и может быть использован для выявления различий в гликозилировании онкофетальных антигенов. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой плазмиду pET40CmAP/MBL-T, определяющую синтез гибридного бифункционального полипептида CmAP/MBL-T со свойствами высокоактивной щелочной фосфатазы морской бактерии Cobetia marina (CmAP) и маннан-связывающего лектина С-типа дальневосточного трепанга Apostichopus japonicus (MBL-T). Плазмида включает NcoI/SalI - фрагмент плазмиды рЕТ-40b(+) (Novagen) и фрагмент ДНК размером 2034 пар оснований, который является химерным геном, кодирующим структурные гены щелочной фосфатазы CmAP и маннан-связывающего лектина С-типа MBL-T, соединенных между собой полинуклеотидом, кодирующим аминокислотную последовательность линкера (G)4S(G)4S(G)4SEL. Описан рекомбинантный штамм E.coli Rosetta(DE3)/pET40CmAP/MBL-T, трансформированный указанной плазмидой, - продуцент гибридного бифункционального белка CmAP/MBL-T. Предложен также способ получения гибридного бифункционального белка CmAP/MBL-T c использованием заявленного штамма. Изобретение позволяет получать высокоочищенный препарат гибридного белка CmAP/MBL-T со свойствами рекомбинантной высокоактивной щелочной фосфатазы CmAP и высокоспецифичного маннан-связывающего лектина С-типа MBL-T по отношению к углеводным компонентам гликопротеинов раковых клеток шейки матки и может быть использован для высокочувствительного лектин-иммунноферментного метода ранней дифференциальной диагностики рака шейки матки.3 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
Изобретение относится к области биохимии и представляет собой плазмиду 40NaGal, определяющую синтез α-N-ацетилгалактозаминидазы α-AlNaGal, включающую NcoI/SalI-фрагмент плазмиды pET-40b(+) (Novagen) и фрагмент ДНК размером 1299 пар оснований, содержащий химерный ген, состоящий из структурной части гена α-AlNaGal, адаптированной по N-концу для экспрессии в клетках E.coli, и нуклеотиды, кодирующие специфическую последовательность для протеазы TEV. Изобретение относится также к штамму E.coli Rosetta(DE3), трансформированному указанной плазмидой, - продуценту химерного белка, включающего аминокислотную последовательность рекомбинантной α-N-ацетилгалактозаминидазы α-AlNaGal. Предложен также способ получения рекомбинантной α-N-ацетилгалактозаминидазы α-AlNaGal с использованием штамма согласно изобретению. Изобретение позволяет получать α-N-ацетилгалактозаминидазу с высокой степенью эффективности. 3 н.п. ф-лы, 1 ил., 3 пр.
Изобретение относится к области биохимии и представляет собой плазмиду, определяющую синтез α-галактозидазы α-PsGal, включающую NcoI/SalI - фрагмент плазмиды pET-40b(+) (Novagen) и фрагмент ДНК, размером 2142 пар оснований, содержащий химерный ген, состоящий из структурной части гена α-PsGal, адаптированной по N-концу для экспрессии в клетках E. coli, и нуклеотид, кодирующий специфическую последовательность для энтеропептидазы. Изобретение относится также к штамму E. coli Rosetta (DE3), трансформированному указанной плазмидой, - продуценту химерного белка, содержащего аминокислотную последовательность рекомбинантной α-галактозидазы α-PsGal и последовательность, специфичную для энтеропептидазы. Предложен также способ получения рекомбинантной α-галактозидазы α-PsGal, включающий стадии: инкубирования указанного штамма-продуцента в жидкой питательной среде LB в течение 12 ч при 16°С, осаждения бактериальных клеток центрифугированием, дезинтеграции суспензии клеток в буфере, центрифугирования экстракта, хроматографии надосадочной жидкости на колонке с металлоафинной смолой, элюции белка, концентрирования активных фракций с помощью ионообменной смолы, инкубирования с энтеропептидазой и выделения целевого продукта гель-фильтрацией. Изобретение позволяет получать более активную и стабильную рекомбинантную альфа-галактозидазу с высокой степенью эффективности. 3 н.п. ф-лы, 1 ил., 3 пр.
