Патенты автора ФИНК ЧАРБОННЮ Памела (US)
УСКОРЕННЫЙ СПОСОБ ОЧИСТКИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КАПСУЛЬНЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE // 2516340
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены варианты способа получения раствора, содержащего очищенные капсульные полисахариды, из лизата клеток выбранного серотипа Streptococcus pneumoniae. Проводят лизис клеток выбранного серотипа S. pneumoniae. Осветляют полученный лизат центрифугированием или фильтрованием. Затем проводят ультрафильтрацию и диафильтрацию осветленного лизата в бессолевой среде с получением ретентата. Понижают pH ретентата до значения менее чем 4,5. Выдерживают подкисленный раствор ретентата для осаждения преципитата. Далее фильтруют или центрифугируют раствор ретентата с получением осветленного раствора капсульного полисахарида. Далее осветленный раствор полисахарида фильтруют через фильтр с активированным углем. Полученный фильтрованный раствор ультрафильтруют и диафильтруют. Полученный концентрированный очищенный раствор капсульного полисахарида фильтруют через стерильный фильтр. При этом серотипы S. pneumoniae выбирают из группы, состоящей из серотипов 1, 4, 5, 6А, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F и 23F. Также предложена модификация этого способа для серотипа 19А. Эта модификация включает проведение ультрафильтрации и диафильтрации перед подкислением при 4ºС при рН 6 в натриево-фосфатном буфере, выдерживание подкисленного раствора ретентата в течение по меньшей мере 2 часов при 4ºС и подведение рН осветленного раствора полисахарида до значения 6 перед этапом фильтрации активированным углем. Также предложены растворы, содержащие очищенные капсульные полисахариды выбранного серотипа S. pneumoniae, полученные указанными способами, и их применение в производстве пневмококковой вакцины. Также предложены выделенные из указанных растворов очищенные капсульные полисахариды S. pneumoniae серотипа 6А с мол. весом 640000-670000 Да и 19А с мол. весом 488000-525000 Да. Ускоренный способ позволяет на этапах подкисления и адсорбции активированным углем преципитировать более чем 98% и 90% белка соответственно, сильно не влияя на выход полисахарида. 10 н. и 37 з.п. ф-лы, 14 ил., 19 табл., 4 пр.
