Патенты автора Головина Анна Янковна (RU)
Изобретение относится к биотехнологии, конкретно к методам поиска антибактериальных веществ природного и синтетического происхождения с одновременным анализом механизма их действия, и может быть использовано для идентификации соединений, ингибирующих биосинтез белка и/или вызывающих SOS-ответ у бактерий. Генетическая конструкция содержит гены двух флюоресцентных белков с различимыми спектрами флюоресценции. Экспрессия одного из генов флюоресцентных белков активируется при остановке трансляции предшествующего ему генетически модифицированного аттенюатора триптофанового оперона Escherichia coli. Экспрессия второго гена активируется при дерепрессии предшествующего ему промотора гена sulA Escherichia coli. Генетическая конструкция представляет собой плазмиду, которой трансформируют клетки бактерий Е. coli для получения штамма-репортера Е. coli ΔtolC. Полученный штамм Е. coli ΔtolC позволяет проводить высокопроизводительный анализ (скрининг) большого количества веществ или смесей для поиска среди них антибактериальных веществ, с одновременным выявлением тех из них, которые ингибируют биосинтез белка и/или вызывают SOS-ответ на повреждения ДНК. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицины и предназначено для обнаружения модифицированных нуклеотидов в составе РНК. Осуществляют подбор подходящей для исследуемой области РНК пары олигонуклеотидных зондов, подбор пары донора и тушителя флуоресценции с подходящими оптическими свойствами. Проводят прямой химический синтез модифицированных зондов, оценивают их эффективность в ходе плавления с РНК, содержащей известные модификации. Оценивают полученные параметры плавления для каждой конкретной системы. Анализируют контрольную и исследуемую РНК, подвергая смесь зондов и РНК сильному нагреванию, медленному охлаждению, а затем контролируемому нагреванию с одновременной детекцией интенсивности флуоресценции, причем параметры исследования выбирают с учетом конкретной системы. Результаты плавления анализируют, оценивая характер кривых плавления, и делают вывод о наличии или отсутствии модификации в исследуемой РНК при наличии или отсутствии модификаций в контрольной РНК. Предлагаемый способ эффективен для обнаружения различных типов модификаций РНК и позволяет детектировать наличие модификаций, которые не препятствуют образованию Уотсон-Криковских пар между нуклеотидами. 16 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 пр.
