Патенты автора Криворучко Александр Юрьевич (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу одновременной детекции множества последовательностей нуклеотидов при проведении одной полимеразной цепной реакции. Предложенное решение позволяет в ходе одной реакции выполнять амплификацию множества последовательностей нуклеотидов в одном образце, кодируя их с помощью соотношения количества прямых праймеров определенной структуры. 4 з.п. ф-лы, 3 пр., 8 ил.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для иммуногистохимического выявления антигенов в препаратах органов продуктивных и непродуктивных животных длительного хранения в фиксаторах. Для этого проводят обработку поверхности предметного стекла для наклеивания срезов адгезивом на основе яичного белка и глицерина в соотношении 2:1. Затем проводят депарафинирование и регидратацию срезов. При этом после депарафинизации и регидратации срезы опускают на 5 мин в чистую емкость с дистиллированной водой. После чего срезы помещают в Н2О2 на 10-12 мин, после работы пароварки, содержащей цитратный буфер в течение 40-45 мин. При этом стекла из пароварки не вынимают в течение 20 мин после прекращения ее работы. Промывают срезы дистиллированной водой, затем помещают в буфер Твин 20х. Для образования сухого поля срезы промакивают одноразовыми бумажными полотенцами и делают вокруг срезов гидрофобный слой маркером. Далее наносят блокировочный раствор, в качестве которого используют 5% бычий сывороточный альбумин, на 10-12 мин. Наносят первичные антитела и ставят в термостат при 27°С на 24-26 ч во «влажной камере», через 14-15 ч смывают первичные антитела буфером Твин 20х в течение 5-7 мин. При этом срезы промакивают и наносят на них вторичные антитела. Ставят в термостат на 1-2 ч во «влажной камере» при температуре 27°С. Смывают вторичные антитела, при этом используют хромоген на безбиотиновой системе детекции. Окрашивают в течение 3 мин, смывают хромоген в трех порциях дистиллированной воды по 5-7 мин. Докрашивают срезы гематоксилином Майера 5-7 мин. Затем ополаскивают стекла в дистиллированной воде и опускают в щелочную воду на 10-15 с. Изобретение позволяет выявлять антигены в гистологических препаратах, после их длительного хранения в фиксаторах. 8 ил., 4 пр.
Изобретение относится к ветеринарной медицине. Проводят разрез боковой брюшной стенки из точки пересечения двух линий - линии, соответствующей проекции последнего ребра на кожу, и линии, соединяющей поперечно-реберные отростки поясничных позвонков. При доступе слева разрез проводят в кранио-вентро-каудальном направлении, под углом 40 градусов к последнему ребру. При доступе справа проводят разрез в дорсо-вентральном направлении, параллельно реберной дуге. Мышцы разъединяют тупым способом по ходу мышечных волокон. Брюшину захватывают гемостатическим пинцетом и подтягивают в рану, складку брюшины рассекают. Способ обеспечивает создание оптимальных условий для выполнения операции на почке у собак и кошек и улучшения ее результатов, сокращения времени проведения вмешательства и уменьшения его травматичности 5 пр.
Изобретение относится к ветеринарии и медицине, в частности к способу окраски мазков крови для микроскопического определения структурной организации и фаз активности клеток, и может быть использовано в цитофизиологии, цитопатологии и цитогенетике, а также рекомендовано к применению при проведении гематологических исследований при определении функционального состояния клеток крови. Способ включает приготовление мазка из периферической крови с предварительной фиксацией метиловым спиртом, высушивание, промывание дистиллированной водой. Затем мазки помещают в раствор хлорида калия в соотношении 0,57 г хлорида калия на 100 мл дистиллированной воды в течение 20 мин и промывают дистиллированной водой. Дополнительно готовят смесь растворов, приготовленных ex tempore, содержащую раствор «А» и «В». Раствор «А» включает 50% раствор азотнокислого серебра в количестве 5 г нитрата серебра + 5мл дистиллированной воды. Раствор «В» включает 2% раствор желатины на 1% растворе муравьиной кислоты в количестве 15,8 мл дистиллированной воды + 0,2 мл 100% муравьиной кислоты + 4,0 мл 10% желатины. Смешивают растворы «А» и «В» в количестве по 5мл каждый в темноте, и в полученную смесь погружают мазки крови на 20 мин в темноте в термостате при температуре 37°С с последующим погружением мазков на 2-3 секунды в дистиллированную воду. Затем выдерживают дважды по 8 мин в 5% растворе тиосульфата натрия в темноте в термостате при температуре 37°С. После промывают последовательно водопроводной водой и дистиллированной водой, проводят доокраску в краске Романовского в течение 30 мин. Затем вновь промывают водопроводной водой, высушивают мазки на воздухе, заключают в канадский бальзам и покрывают покровным стеклом. Технический результат, достигаемый при осуществлении способа, заключается в повышении качества окрашивания мазков и обеспечении возможности выявления и последующей оценки параметров зон ядрышковых организаторов. 4 табл., 6 пр.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭМБРИОНОВ ОВЕЦ in vitro // 2525714
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к клеточной инженерии. Способ предусматривает извлечение ооцит-кумулюсных комплексов из яичников, культивирование их до стадии метафазы II, совместное культивирование ооцитов и сперматозоидов, культивирование оплодотворенных яйцеклеток. Причем дополнительно вводят фолликулостимулирующий и лютеинизирующий гормон в виде комбинированного препарата Менопур, эстрадиол, гепарин, кофеин и антибиотик. Культивирование проводят на базовой среде. Извлечение ооцит-кумулюсных комплексов из яичников, получают от живых овец под наркозом путем пунктирования фолликулов яичников при проведении лапаротомии, причем предварительно производят стимуляцию суперовуляции. В среду созревания добавляют препарат Менопур, концентрация обоих компонентов, входящих в состав препарата, составляет 0,075 МЕ/мл, а эстрадиол добавляют в среду созревания в концентрации 10 мкг/мл. Для оплодотворения используют свежеполученную сперму баранов. Для капацитации спермиев барана и в состав среды оплодотворения добавляют комбинацию гепарина в количестве 5 ЕД/мл и кофеина в количестве 0,2 мг/мл. Культивирование и оплодотворение осуществляют в четырехлуночных чашках Петри в 500 мкл питательной среды под 200 мкл парафинового масла. Использование способа позволит повысить доли выхода ооцитов, достигших метафазы II, оплодотворенных ооцитов, достигших эмбрионального развития до стадии морулы/бластоцисты in vitro. 2 з.п. ф-лы, 11 ил., 3 пр.
