Патенты автора Томас ЙОСТОК (CH)
Изобретение относится к области биотехнологии и генетической инженерии. Предложен способ получения по меньшей мере одной трансфицированной эукариотической клетки-хозяина, экспрессирующей целевой продукт, включающий введение в клетку полинуклеотида, кодирующего целевой продукт, и полинуклеотида, кодирующего мутантный фермент дигидрофолатредуктазу по крайней мере одним вектором экспрессии, получение множества эукариотических клеток-хозяев, жизнеспособность которых зависит от потребления фолата, причем указанные эукариотические клетки-хозяева включают по меньшей мере чужеродный полинуклеотид, кодирующий целевой продукт, и чужеродный полинуклеотид, кодирующий фермент дигидрофолатредуктазу (ДГФР), культивирование указанного множества эукариотических клеток-хозяев в селективной культуральной среде, включающей метотрексат в концентрации 2,3-500 нМ и фолиевую кислоту в концентрации 12,5-50 нМ, и отбор по меньшей мере одной эукариотической клетки-хозяина, экспрессирующей целевой продукт. Также описан способ получения целевого продукта и клеточной культуральной среды. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой вектор экспрессии целевого продукта и комбинацию двух векторов экспрессии для экспрессии целевого продукта. Вектор экспрессии целевого продукта включает полинуклеотид, кодирующий целевой продукт, полинуклеотид, кодирующий первый селективный маркер (sm I), полинуклеотид, кодирующий второй селективный маркер (sm II), отличающийся от первого селективного маркера (sm I). На действие селективного маркера (sm I) или (sm II) по меньшей мере частично влияет действие другого селективного маркера. Селективные маркеры (sm I) и (sm II) участвуют в метаболизме фолата. Первый селективный маркер (sm I) является рецептором фолата альфа человека (huFolR). Второй селективный маркер (sm II) является ДГФР или его функциональным вариантом или производным. Предложенное изобретение позволяет получить эффективную систему отбора клеток-хозяев, вырабатывающих на высоком уровне целевой продукт. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 14 табл., 4 пр.
