Патенты автора Тарасова Маргарита Владимировна (RU)
Изобретение относится к области молекулярной биологии, конкретно к рекомбинантной экспрессии апоптина, и может быть использовано в качестве противоопухолевого терапевтического трансгена. Сконструированная плазмидная ДНК pcDNA4-Apo-2NLS2 имеет молекулярную массу 5,13 мДа, размер 7896 п.н. и содержит в соответствии с физической и генетической картой, приведенной на фиг. 5, оперон размером 1071 п.н., состоящий из ранне-позднего промотора CMV, лидерного фрагмента, последовательности пенетрирующего пептида белка ТАТ ВИЧ, гена апоптина вируса анемии цыплят и последовательности эпитопа Flag; промотор CMV 232-819 п.н.; Т7 промотор 863-882 п.н.; Xpres праймер 1112-1130 п.н.; ТОРО сайт клонирования 1184 п.н.; генетические маркеры: ген устойчивости Zeocin; ген b-лактамазы, определяющий устойчивость к ампициллину; и уникальные сайты рестрикции: ClaI (1918); XbaI (2619); BamHI (2993); SalI (3001); BstWI (3425). Полученная плазмидная ДНК pcDNA4-Apo-2NLS2 предназначена для экспрессии белка апоптина с удвоенным сайтом NLS2, избирательно индуцирующего р53 независимый апоптоз неопластических опухолевых клеток человека. Синтетический ген апоптина в составе указанной ДНК характеризуется нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO1 и размером 393 п.н. Изобретение позволяет повысить активность экспрессируемого модифицированного гена белка апоптина в отношении индуцирования избирательного апоптоза опухолевых клеток. 9 ил., 1 табл., 2 пр.
