Патенты автора ХВАН, Ин Таэк (KR)

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу детекции нуклеиновокислотной последовательности-мишени из ДНК или смеси нуклеиновых кислот с использованием праймера, генерирующего сигнал от мишени (TSG-праймера). Способ включает гибридизацию нуклеиновокислотной последовательности-мишени с TSG-праймером, который содержит гибридизующуюся нуклеотидную последовательность, комплементарную нуклеиновокислотной последовательности-мишени, и репортерную молекулу и молекулу-гаситель. TSG-праймер не является структурой петля-шпилька. В случае если TSG-праймер не гибридизуется с нуклеиновокислотной последовательностью-мишенью, то репортерная молекула и молекула-гаситель пространственно располагаются близко друг к другу без образования структур петля-шпилька, что позволяет молекуле-гасителю гасить сигнал от репортерной молекулы. В случае если TSG-праймер гибридизуется с нуклеиновокислотной последовательностью-мишенью, то репортерная молекула и молекула-гаситель пространственно разделяются, что не позволяет молекуле-гасителю гасить сигнал от репортерной молекулы, в результате чего генерируется и выявляется сигнал, указывающий на присутствие нуклеиновокислотной последовательности-мишени. Приведение в контакт продукта с матричной полимеразой нуклеиновых кислот в условиях удлинения праймера так, что реакция 3′-удлинения индуцируется по 3′-концу TSG-праймера. Детекция сигнала, указывающего на присутствие нуклеиновокислотной последовательности-мишени. Предложенное изобретение позволяет с высокой чувствительностью и специфичностью детектировать нуклеиновокислотную последовательность-мишень. 3 н. и 18 з.п. ф-лы, 21 ил., 7 пр.

Группа изобретений касается дискриминирующего мишень зонда (TD-зонду), способа его конструирования и способов детекции нуклеиновокислотной последовательности-мишени с его использованием. TD-зонд гибридизуется с нуклеиновокислотной последовательностью-мишенью как через 5'-концевой второй участок гибридизации, так и 3'-концевой первый участок гибридизации. Когда TD-зонд гибридизуется с нуклеиновокислотной последовательностью, не являющейся мишенью, тогда и 5'-концевой второй участок гибридизации, и разделительный участок оба не гибридизуются с нуклеиновокислотной последовательностью, не являющейся мишенью, так что оба участка образуют одиночную цепь вследствие низкой величины своей Тпл. Представленные изобретения позволяют повысить специфичность гибридизации и могут быть использованы в области клинической диагностики и генетических исследований. 7 н. и 32 з.п. ф-лы, 14 ил., 9 пр.

 


Наверх