Патенты автора Лоншакова-Мукина Виктория Ивановна (RU)

Изобретение относится к области контроля загрязнений окружающей среды и представляет собой способ определения соединений антихолинэстеразного действия в воде и водных экстрактах, включающий измерение скорости ферментативного гидролиза бутирилтиохолина, согласно изобретению при приготовлении проб используют ферментный препарат, на основе совместно иммобилизованных бутирилхолинэстеразы и индикатора на тиоловую группу 5,5'-дитио-бис(2-нитробензойную кислоту), в качестве растворителя – дистиллированную воду, выдерживают обе пробы в течение 30-300 секунд в присутствии 18-20 единиц активности α-амилазы, запускают реакцию раствором S-бутирилтиохолина-I (S-BuCh-I), причем соотношение объемов раствора S-BuCh-I в концентрации 2 мМ и контрольного или анализируемого раствора составляет 1:10, измеряют скорость ферментативного гидролиза субстрата, при этом критерием наличия ингибиторов бутирилхолинэстеразы в анализируемой пробе является снижение на 20% и более величины скорости ферментативного гидролиза бутирилтиохолина по сравнению с данным параметром в контрольной пробе. Изобретение обеспечивает увеличение точности и сокращение времени анализа. 1 ил., 1 пр.

Изобретения относятся к биотехнологии. Предложены способ приготовления ферментного препарата на основе иммобилизованной бутирилхолинэстеразы и ферментный препарат для определения карбаматов и фосфорорганических соединений. Готовят крахмальный или желатиновый гель в фосфатном буфере pH 7,9-8,0. Охлаждают гель до 31-35ºC. Затем его смешивают с буферным раствором бутирилхолинэстеразы и буферным раствором индикатора тиоловых групп 5,5'-дитио-бис(2-нитробензойной кислотой) с концентрацией 0,56 Μ. Дозируют полученную смесь на гидрофобную подложку и высушивают при температуре 8ºC. Изобретения позволяют упростить процедуру иммобилизации фермента, увеличить время хранения ферментного препарата без потери его активности в течение более одного года. Полученный препарат обладает высокой чувствительностью к действию фосфорорганических соединений и карбаматов и может использоваться для контроля степени загрязнения объектов окружающей среды ингибиторами холинэстераз. 2. н.п. ф-лы, 7 ил., 7 пр.

 


Наверх