Патенты автора ШО, Эндрю (US)
СПОСОБЫ УЛУЧШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ БЕЛКОВ // 2569106
Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ получения по меньшей мере одного варианта протеазы с улучшенной моющей эффективностью в порошкообразной или жидкой детергентной композиции, имеющей pH между 5 и 12,0, в сравнении с исходной протеазой. Указанный способ предусматривает: a) определение оптимальных суммарных зарядов поверхности протеазы для моющей активности в порошкообразной или жидкой детергентной композиции, имеющей pH между 5 и 12,0, тестированием в указанной среде множества вариантов замещенных протеаз, имеющих изменение суммарного заряда поверхности молекулы, при этом оптимальные суммарные заряды поверхности протеаз представляют собой заряды -2, или -1, или +1, или +2 относительно исходной протеазы; b) модификацию по меньшей мере одного аминокислотного остатка в одном или нескольких положениях, имеющих доступную для растворителя поверхность, большую чем 50%, на поверхности указанной исходной протеазы для получения по меньшей мере одного варианта протеазы, имеющего более положительный или более отрицательный заряд поверхности в сравнении с исходной протеазой для того, чтобы варианты протеазы имели оптимальный суммарный заряд поверхности, как определено на стадии а); и c) оценку моющей эффективности по меньшей мере одного варианта белка со стадии b) для идентификации варианта белка, который проявляет улучшенную моющую эффективность в указанном представляющем интерес тесте по сравнению с исходным белком. Изобретение позволяет получать протеазы с улучшенной моющей эффективностью в порошкообразной или жидкой детергентной композиции, имеющей pH между 5 и 12,0, в сравнении с исходной протеазой. 18 з.п. ф-лы, 13 ил., 20 табл., 13 пр.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к выделенному варианту сериновой протеазы, содержащему, по меньшей мере, от пяти до восьми аминокислотных замен в положениях, выбранных из группы, состоящей из положений 12, 14, 15, 16, 24, 35, 36, 39, 49, 54, 61, 63, 64, 65, 67, 69, 75, 76, 78, 79, 81, 86, 92, 93, 99, 109, 112, 121, 123, 125, 127, 143, 159, 179, 181, 184, 189, где заменяющая аминокислота в указанном положении выбрана из группы, состоящей из F, G, L, V, I, S, A, Y, K, W, M, P, N, Q, T, E, H, R, C, N и D, где указанные замены сделаны в положениях, эквивалентных положениям в протеазе Cellulomonas 69 В4, а также к молекуле нуклеиновой кислоты, ее кодирующей. Раскрыты экспрессионный вектор, содержащий вышеуказанную молекулу нуклеиновой кислоты, а также клетка-хозяин, его содержащая. Также раскрыты чистящая композиция, корм для животных, композиция для обработки ткани или кожи, содержащие вышеуказанный вариант сериновой протеазы, а также способ очистки с использованием вышеуказанной чистящей композиции. Заявленное изобретение имеет улучшенную казеинолитическую активность и/или термостабильность, и/или стабильность в LAS, и/или улучшенный гидролиз казеина по сравнению с протеазой, не имеющей указанное число замен. 14 н. и 49 з.п. ф-лы, 7 ил., 21 табл., 21 пр.
