Патенты автора ВОРОБЬЕВ Андрей Иванович (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для рекомбинантного получения фактора свертываемости крови VIII (FVIII) человека с делецией В-домена. Конструируют плазмиду для экспрессии рекомбинантного FVIII человека с делетированным В-доменом, в клетках СНО, нокаутных по гену дигидрофолатредуктазы (DHFR), включающую область начала репликации плазмиды pUC, открытую рамку считывания бета-лактамазы (bla) и прокариотический промотер гена bla, участок терминального повтора вируса Эпштейн-Барр человека (EBVTR), функциональные элементы гена фактора элонгации 1 альфа китайского хомячка, последовательность Козак; открытую рамку считывания гена FVIII человека с делетированным В-доменом; внутренний сайт связывания рибосом (IRES) вируса EMCV; открытую рамку считывания DHFR, экспрессирующуюся в составе бицистронной мРНК вместе с геном, кодирующим FVIII человека с делетированным В-доменом (IRES DHFR). Полученной плазмидой трансформируют клетку СНО с получением клетки-продуцента указанного фактора. Изобретение позволяет существенно повысить эффективность продукции в клетках СНО и сократить затраты на получение фармацевтически значимого рекомбинантного FVIII человека с делецией В-домена. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 6 ил., 4 табл., 4 пр.
