Патенты автора АКТАС Хусейн (US)
Изобретение касается способа определения эффективности композиции в отношении ингибирования инициации трансляции, уровень ингибиторной активности которой в отношении инициации трансляции неизвестен, где способ включает: приведение клетки линии, которая имеет номер доступа РТА-13010 в Американской коллекции типовых культур (АТСС), в контакт с указанной композицией в течение периода времени и при температуре, достаточных для ингибирования пролиферации указанной клетки, приведение клетки линии, которая имеет номер доступа РТА-13011 в АТСС, в контакт с указанной композицией в течение периода времени и при температуре, достаточных для ингибирования пролиферации указанной клетки, измерение индуцированного указанной композицией уровня ингибирования пролиферации указанной клетки линии, которая имеет номер доступа РТА-13010 в АТСС, и уровня ингибирования пролиферации указанной клетки линии, которая имеет номер доступа РТА-13011 в АТСС, причем величина указанной ингибиторной активности указанной композиции в отношении процесса инициации трансляции пропорциональна уровню ингибирования пролиферации в клетке линии, которая имеет номер доступа РТА-13010 в АТСС, и сравнение уровня ингибирования пролиферации, индуцированного указанной композицией, с уровнем ингибирования пролиферации, индуцированного стандартом, имеющим известную величину указанной активности, и определение композиции как не имеющей ингибиторной активности в отношении инициации трансляции, если указанная композиция ингибирует пролиферацию указанной клетки линии, которая имеет номер доступа РТА-13011 в АТСС; при этом указанная композиция представляет собой пищевой, нутрицевтический или лекарственный продукт, при этом указанная клетка линии, которая имеет номер доступа РТА-13010 и/или РТА-13011 в АТСС, характеризуется тем, что содержит лентивирусный экспрессионный вектор, который содержит: (а) гетерологичный ген eIF2α, у которого полностью отсутствуют 3' и 5' НТО; (б) направленную на нуклеотид №1098, тимидиновый нуклеотид в 3'-НТО области эндогенного гена eIF2, миРНК №1098, которая ингибирует более 85% эндогенной экспрессии eIF2; и (в) оптимальную консенсусную последовательность Козака (GCCACCATGG). Изобретение также касается: линии клеток рака предстательной железы человека РС-3, экспрессирующих eIF2α-WT, которая имеет номер доступа РТА-13010 в АТСС, в которой экспрессия эндогенного eIF2α ингибируется более чем на 85%, и линии клеток рака предстательной железы человека РС-3, экспрессирующих eIF2α-S51A, которая имеет номер доступа РТА- 13011 в АТСС, в которых экспрессия эндогенного eIF2α ингибируется более чем на 85%, для определения ингибирования инициации трансляции. 4 н. и 15 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 пр.
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ in vitro определения наличия в образце рыбьего жира активности n-3 полиненасыщенной жирной кислоты (PUFA). Обеспечивают первую тестовую систему, включающую первую последовательность мРНК, кодируемую первым геном биомаркера, которая имеет кодирующую область первого репортерного белка, функционально связанную с промотором первого маркера. Приводят первую тестовую систему в контакт со стандартным веществом или контрольным веществом. Обеспечивают вторую тестовую систему, включающую вторую последовательность мРНК, кодируемую вторым геном биомаркера, которая имеет кодирующую область второго репортерного белка, функционально связанную со вторым промотором маркера. Приводят вторую тестовую систему в контакт с образцом рыбьего жира. Первый и второй гены маркеров выбраны из группы, состоящей из последовательностей нуклеиновых кислот, которые кодируют проапоптотический белок, гомологичный С/ЕВР (CHOP), ER белок, связывающий шапероны (BiP), фактор активации транскрипции 4 (ATF-4), и белок I, связывающий X-box (Xbp-1). Определяют уровни транскрипции первой и второй последовательностей мРНК. Определяют образец рыбьего жира как имеющий PUFA активность в случае, если образец опосредует положительную регуляцию транскрипции гена маркера и при этом уровень транскрипции второй последовательности мРНК является более высоким, чем уровень транскрипции первой последовательности мРНК. Изобретение позволяет исследовать продукты питания, нутрицевтики и лекарственные средства на наличие активности n-3 PUFA. 12 з.п. ф-лы, 1 ил., 4 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии. Способ обнаружения вещества, которое опосредует положительную регуляцию транскрипции гена биологического маркера, или определения, опосредует ли вещество положительную регуляцию транскрипции гена биологического маркера, состоит из следующих этапов: обеспечение первой системы анализа, включающей последовательность мРНК, которая содержит область, кодирующую первый репортерный белок, функционально связанную с промотором первого биологического маркера; обеспечение второй системы анализа, включающей вторую последовательность мРНК, которая содержит область, кодирующую второй репортерный белок, функционально связанную с промотором второго биологического маркера; осуществление контакта указанной второй системы анализа с веществом; осуществления контакта указанной первой системы анализа со стандартным веществом или контрольным веществом и определение уровней транскрипции указанных первой и второй последовательностей мРНК. При этом уровень транскрипции второй последовательности мРНК выше, чем уровень транскрипции первой последовательности мРНК, если указанное вещество опосредует положительную регуляцию транскрипции гена биологического маркера. Гены первого биологического маркера и второго биологического маркера выбраны из группы, состоящей из проапоптотического белка, гомологичного С/ЕВР (CHOP), связывающего шаперонного белка эндоплазматического ретикулума (BiP), фактора активации транскрипции 4 (ATF-4), белка 1, связывающего X-box (Xbp-1) и синтетазы аминокислот. 13 з.п. ф-лы, 1 ил., 4 пр.
