Патенты автора КОПЕЦКИ Эрхард (DE)
Изобретение относится к способу получения конъюгата Fc области антитела. Способ предусматривает одновременное инкубирование i) первого полипептида, содержащего аминокислотную последовательность LPXTG (SEQ ID NO: 20, где Х может быть любым аминокислотным остатком), ii) второго полипептида, содержащего аминокислотную последовательность LPXTА (SEQ ID NO: 31, где Х может быть любым аминокислотным остатком), iii) третьего полипептида, который имеет два N-конца, при этом данный полипептид имеет олигоглициновую Gm (m равен 2 (SEQ ID NO: 22), или 3 (SEQ ID NO: 23), или 4 (SEQ ID NO: 24), или 5 (SEQ ID NO: 25)) аминокислотную последовательность на его первом N-конце и олигоаланиновую Am (m равен 2 (SEQ ID NO: 26), или 3 (SEQ ID NO: 27), или 4 (SEQ ID NO: 28), или 5 (SEQ ID NO:29)) аминокислотную последовательность на его втором N-конце, iv) четвертого полипептида с сортазной активностью, полученного из сортазы А Staphylococcus aureus и имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, и v) пятого полипептида с сортазной активностью, полученного из сортазы А Streptococcus pyogenes и имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34. После одновременного инкубирования указанных полипептидов осуществляют выделение конъюгата из реакционной смеси. Изобретение позволяет осуществить реакции ферментативного конъюгирования полипептидов в одну стадию с использованием двух сортаз, имеющих независимые специфичности. 3 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 6 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способам получения рекомбинантного полипептида нейротрофина посредством расщепления прополипептида нейротрофина IgA-протеазой, где эндогенный сайт ферментативного расщепления между просегментом и полипептидом нейротрофина заменен сайтом расщепления IgA-протеазой. Изобретение позволяет высокоэффективно получать активные полипептиды фактора роста нервов (NGF), нейротрофического фактора головного мозга (BDNF), нейротрофина 3 (NT-3) и нейротрофина 4 (NT-4). 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 22 табл., 8 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способам определения комбинации антигенсвязывающих сайтов и получения биспецифического антитела, что может быть использовано в медицине. Заявленные способы включают следующий этап: определение специфичности связывания и/или аффинности множества биспецифических антител, полученных путем объединения каждого элемента первого множества Fab-фрагментов антитела или scFv-фрагментов антитела с каждым элементом второго множества Fab-фрагментов антитела или scFv-фрагментов антитела и с линкером, содержащим на одном его конце второй элемент первой связывающей пары и на соответствующем другом конце второй элемент второй связывающей пары. Изобретение позволяет эффективно получать мультиспецифические терапевтические молекулы, такие как биспецифические антитела, с заданными свойствами в отношении клеточных поверхностных молекул, присутствующих на клетке у пациента, нуждающегося в лечении, или в отношении лигандов, взаимодействующих с такой клеточной поверхностной молекулой. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 28 ил., 8 табл., 13 пр.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения биспецифичного антитела. Также раскрыт способ определения комбинации антигенсвязывающих сайтов. Изобретение позволяет получать биспецифичные антитела. 2 н.п. ф-лы, 2 табл., 4 пр.
БЫСТРЫЙ СПОСОБ КЛОНИРОВАНИЯ И ЭКСПРЕССИИ СЕГМЕНТОВ ГЕНА РОДСТВЕННОЙ ВАРИАБЕЛЬНОЙ ОБЛАСТИ АНТИТЕЛА // 2612910
Изобретение относится к биохимии. Описан способ получения антитела, включающий выделение антитела из среды культивирования эукариотической клетки, содержащей нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, причем нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, получают путем амплификации нуклеиновых кислот, кодирующих родственный вариабельный домен, используя в качестве матрицы в полимеразной цепной реакции (ПЦР) одноцепочечные кДНК, полученные из РНК антитело-секретирующей В-клетки, и вставки нуклеиновых кислот, кодирующих вариабельный домен, в эукариотическую экспрессионную плазмиду путем безлигазного клонирования, в котором для вставки используют пул нуклеиновых кислот, кодирующих вариабельный домен соответственно легкой и тяжелой цепей антитела, где В-клетка является отдельной единичной В-клеткой, и где В-клетка и ее потомство за 7 дней их совместного культивирования с питающими клетками, начиная с одной клетки, производят более 20 нг/мл антител выделения сегментов нуклеиновых кислот, кодирующих вариабельные домены антител, и введение выделенных сегментов нуклеиновых кислот в эукариотические экспрессионные плазмиды осуществляется без промежуточного выделения и анализа клональных промежуточных плазмид. Таким образом, в способе согласно изобретению не требуется промежуточное клонирование, выделение и анализ промежуточных плазмид. 7 з.п. ф-лы, 3 табл., 4 пр.
БИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА // 2573588
Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии и представляет собой способ изготовления биспецифического антитела, которое содержит: а) тяжелую цепь и легкую цепь первого антитела полной длины, которое специфически связывается с первым антигеном; и б) тяжелую цепь и легкую цепь второго антитела полной длины, которое специфически связывается со вторым антигеном, где N-конец тяжелой цепи связан с С-концом легкой цепи через пептидный линкер, причем каждый из СН3-домена тяжелой цепи антитела полной длины а) и СН3-домена тяжелой цепи антитела полной длины б) встречается на контактной поверхности, которая включает изменения в исходной контактной поверхности СН3-доменов антитела; где изменения в СН3-доменах тяжелых цепей представляют собой изменения типа «ключ-замок»; где указанный способ включает этапы: а) трансформации клетки-хозяина векторами, содержащими нуклеиновокислотные молекулы, кодирующие указанную молекулу биспецифического антитела, б) культивирования клетки-хозяина в условиях, обеспечивающих синтез указанной молекулы биспецифического антитела; и в) извлечения указанной молекулы биспецифического антитела из указанной культуры. Изобретение позволяет получать биспецифические антитела с указанной выше структурой с высоким выходом и чистотой. 16 з.п. ф-лы, 10 ил., 6 табл., 11 пр.
