Патенты автора Кравченко Марионелла Ивановна (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ определения способности микобактерий туберкулеза к размножению в альвеолярных макрофагах пациентов после противотуберкулезной терапии. Способ предусматривает забор образцов ткани легкого из операционного материала, получение из него культур альвеолярных макрофагов ex vivo, фиксирование клеток на покровных стеклах через 12-20 часов и 5-8 дней после начала культивирования и окрашивание образцов по методу Циля-Нильсена. После этого оценивают долю альвеолярных макрофагов, содержащих колонии размножающихся микобактерий, и сравнивают данный показатель, полученный через 12-20 часов после начала культивирования, с показателем, полученным через 5-8 дней после начала культивирования. При повышении в процессе культивирования доли альвеолярных макрофагов, содержащих колонии размножающихся микобактерий, от общего числа альвеолярных макрофагов, содержащих микобактерий, на 10% и более делают заключение о высокой способности микобактерий к активации размножения в альвеолярных макрофагах пациента. При повышении данного показателя менее 10% делают заключение о средней способности микобактерий к активации размножения в альвеолярных макрофагах пациента. При отсутствии в процессе культивирования изменений данного показателя или при его снижении делают заключение о низкой способности микобактерий к активации размножения. Изобретение позволяет повысить точность диагностики туберкулеза. 6 ил., 3 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области биохимии. Заявлен способ получения ex vivo культуры альвеолярных макрофагов из операционного материала больных туберкулезом легких для оценки вирулентности М. tuberculosis. Получают клеточную взвесь путем измельчения образца ткани легкого, гомогенизации с помощью протирки через сито с диаметром пор 0.5-2.0 мм, освобождения клеточной взвеси от негомогенизированных остатков путем их пассивного осаждения. Клеточную взвесь центрифугируют 4-5 мин при 800-1200 об/мин и +20-25°С. Культивирование клеток осуществляют в течение 12-20 часов. Также заявлен способ оценки вирулентности М. tuberculosis, отличающийся тем, что в полученной ex vivo культуре альвеолярных макрофагов оценивают долю макрофагов, содержащих микобактерии, от общего числа макрофагов, наличие и долю макрофагов, содержащих колонии размножающихся микобактерий без корд-морфологии роста и с корд-морфологией роста, от общего числа макрофагов, содержащих микобактерии. Изобретение позволяет повысить жизнеспособности клеток в полученной культуре, оценить вирулентность М. tuberculosis применительно к конкретному пациенту, сократить длительность осуществления способа. 2 н.п. ф-лы, 12 ил., 3 табл., 8 пр.
