Патенты автора Муртазина Гульнара Харисовна (RU)
Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для получения эритроцитарного сибиреязвенного антигена для набора определения антител в сыворотке крови животных, вакцинированных против сибирской язвы. Для этого способ включает предварительное получение фильтрата, помещение его в диализный мешочек, хранение в висячем положении в холодильнике при температуре +4°С до концентрации от первоначального объема, подготовку 2,5%-ной суспензии фомалинизированных эритроцитов. Предварительно проводят отбор крови интактных баранов во флаконы со стеклянными шарами, перемешивание в течение 15 минут, разведение 1:1 фосфатно-буферным раствором рН 6,4, добавление смеси из расчета 100 мл разведенной крови на 20 мл нейтрального формалина и 20 мл фосфатно-буферного раствора рН 7,2, помещение в термостат на 2 часа при температуре +37°С с постоянным перемешиванием. Последующее центрифугирование со скоростью 1500 об/мин в течение 10 минут, 4-кратное отмывание осевших эритроцитов и суспендирование в 400-500 мл фосфатно-буферном растворе рН 7,2, помещение эритроцитарной взвеси в холодильник при температуре +4°С. Проводят удаление через 48 часов надосадочной жидкости, 4-кратное отмывание осадка фосфатно-буферным раствором рН 7,2, разведение полученного осадка фосфатно-буферным раствором рН 6,4, приготовление 2,5% суспензии, консервирование формалином до его 1%-ной концентрации. Далее 3-кратное отмывание 2,5%-ной полученной суспензии фосфатно-буферным раствором рН 7,2 на центрифуге со скоростью 1500 об/мин по 10 минут на каждое с последующим смешиванием в равных объемах с танином, 20-минутной выдержкой в водяной бане при температуре +37°С и 3-кратным отмыванием на центрифуге со скоростью 1500 об/мин по 10 минут каждый. Дальнейшее удаление надосадочной жидкости и залив осадка фосфатно-буферным раствором рН 7,2, а после окончания отмывания разбавление осевших эритроцитов фосфатно-буферным раствором рН 6,4 из расчета получения 2,5%-ной взвеси эритроцитов, консервирование формалином до его 1%-ной концентрации и дальнейшего 3-кратного отмывания на центрифуге со скоростью 1500 об/мин по 10 минут каждое фосфатно-буферным раствором рН 7,2. Добавляют к полученным из расчета 100 мл отмытым формалинизированным эритроцитам 5 мл фильтрата, проводят сенсибилизацию в течение 2 часов на водяной бане при температуре +37°С в присутствии 0,2%-ного глютарового альдегида с дальнейшим отмыванием и добавлением 0,5%-ной инактивированной нормальной лошадиной сыворотки и приготовлением из осадка 2,5% взвеси эритроцитов. После чего полученный эритроцитарный сибиреязвенный антиген консервируют 1% формалином, расфасовывают по флаконам и хранят в холодильнике при температуре +4°С. Группа изобретений относится также к набору определения антител в сыворотке крови животных, вакцинированных против сибирской язвы. Использование данной группы изобретений позволяет получить чувствительный и достоверный метод определения антител в сыворотке крови животных, вакцинированных против сибирской язвы, в РНГА для контроля напряженности поствакцинального иммунитета, выявить животных с низким титром антител и толерантных, своевременно принять меры по профилактике заболевания. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 5 пр., 1 табл.
