Патенты автора Вологодский Андрей Николаевич (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Представлен способ пересборки (разборки и сборки) капсида бактериофага, в том числе бактериофага MS2, в том числе рекомбинантного. Способ включает два этапа: разборку капсида природного или рекомбинантного бактериофага, а затем сборку с различными токсическими ионами и их соединениями, например, таллий и другие элементы, в том числе радиоактивные изотопы и без них. Также представлен способ получения ВПЧ бактериофага, включающий: бактериофаг концентрируют до требуемого объема; к одному объему бактериофага, сконцентрированного на стадии А), добавляют два объема предварительно охлажденной 100% уксусной кислоты; смесь, полученную на этапе Б), выдерживают в холодильнике при плюс 4°С в течение 30 мин; по истечении 30 мин смесь бактериофага и уксусной кислоты осаждают путем центрифугирования при 14000 g в течение 10 мин в охлажденной до плюс 4°С центрифуге; супернатант после осаждения наносят на предварительно подготовленную колонку для обессоливания и производят центрифугирование в течение 2 мин при 1000 g; собирают проскок, содержащий разобранный бактериофаг; разобранный бактериофаг разбавляют в 3 раза 50 мМ Tris с рН 7; смесь, полученную на этапе Ж), доводят до рН 7,3 с помощью добавления 10 М NaOH; смесь, полученную на этапе Ж), концентрируют в 7,5 раз с помощью центрифужного концентратора при 3600 об/мин в охлажденной до плюс 4°С центрифуге; полученный концентрат разобранного бактериофага делят на две части; одну часть концентрата разобранного бактериофага выдерживают в течение 24 ч при плюс 4°С в присутствии 25 мМ ТМАО на 50 мМ Tris с рН 7,10 мМ тРНК дрожжей с концентрацией 1 мг/мл на 50 мМ Tris с рН 7; вторую часть концентрата разобранного бактериофага выдерживают в течение 24 ч при плюс 4°С в присутствии 25 мМ ТМАО, 10 мМ тРНК дрожжей с концентрацией 1 мг/мл и раствора таллия с концентрацией 0,16 мг/мл; по истечении 24 ч пробы с собранным бактериофагом обессоливают, таким образом, получая ВПЧ бактериофага. При этом ВПЧ бактериофага может иметь модифицированный пептидом капсид, в частности пептидом IRGD или пептидом YGRKKRRQRRR, а также может быть получена из рекомбинантных капсидных белков с дальнейшей модификацией - присоединением пептида методом конъюгации. ВПЧ также могут быть получены из рекомбинантных капсидных белков с пришитым пептидом, а таллий представлять собой радиоактивный изотоп. Изобретение позволяет использовать бактериофаги как эффективное средство доставки, в частности, солей таллия или пептидов в организм реципиента. Данный способ также не позволяет в достаточной мере контролировать упаковку таллия, уменьшить неспецифическую иммуногенность. Патентуемый способ позволяет контролировать упаковку таллия, уменьшить неспецифическую иммуногенность препарата за счет обеспечения отсутствия РНК бактериофага. Таким образом, технический результат заявленного изобретения заключается в очистке препарата вирусоподобной частицы бактериофага (ВПЧ) от РНК бактериофага с целью снижения неспецифической иммуногенности. Также технический результат заключается в контроле упаковки таллия, способ позволяет преодолеть барьер минимальной концентрации таллия при получении субстанции препарата, концентрация 0,16 мг/мл, что важно при использовании радиоактивных изотопов в вирусоподобных частицах. При этом заявленный способ позволяет получать рекомбинантные ВПЧ бактериофага. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 3 табл., 12 пр.
Изобретение относится к медицине и касается способа лечения и профилактики ВИЧ-инфекции типа 1 субтипа А (ВИЧ-1А), при котором выделяют структуру генома ВИЧ-1А у инфицированного пациента, определяют первичную структуру 14-ти N-концевых аминокислот Tat-белка в выделенном геноме ВИЧ-1А, создают персонализированный препарат в виде 6-пептидил замещенного производными аминопенициллановой кислоты (6-пептидил - АПА) пептида, имеющего аминокислотную последовательность, совпадающую с 14-ю N-концевыми аминокислотами Tat-белка в выделенном геноме ВИЧ-1А инфицированного пациента, и вводят полученный персонализированный препарат пациенту. Изобретение обеспечивает эффективное лечение и профилактику ВИЧ-1А, минимизирование побочного действия от процесса вакцинации. 2 з.п. ф-лы, 9 пр., 7 ил., 1 табл.
