Патенты автора Иматдинов Алмаз Рамисович (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Описана минигеномная система вируса Пуумала для оценки противовирусной активности ингибиторов РНК-зависимой РНК-полимеразы, включающая рекомбинантные плазмиды nStem-IRES-PUUV_L, nStem-IRES-PUUV_N, nStem-PUUV_S_DsRed, обеспечивающие экспрессию искусственных генов за счет промотора бактериофага Т7, а также за счет внутреннего сайта посадки рибосом вируса энцефаломиелита (IRES). Изобретение позволяет воссоздать репликативную машинерию вируса Пуумала in vitro. Рекомбинантные плазмиды nStem-IRES-PUUV_L, nStem-IRES-PUUV_N предназначены для внутриклеточного синтеза вирусных белков, составляющих репликативную машинерию вируса Пуумала. Рекомбинантная плазмида nStem-PUUV_S_DsRed предназначена для оценки функциональной активности минигеномной системы. Изобретение расширяет арсенал инструментов для исследования вируса Пуумала, позволяя проводить скрининг ингибиторов РНК-зависимой РНК-полимеразы, направлено модифицировать сегменты вирусного генома для функционального изучения доменов вирусных белков, а также для прототипирования рекомбинантных вакцин с контролируемым циклом репликации. 7 ил., 3 пр.
Группа изобретений относится к генетической конструкции для экспрессии генов mNG_CD4-CXCR4, рекомбинантной плазмиде, кодирующей кДНК копию генома репликационно-дефектного вируса везикулярного стоматита, и рекомбинантному вирусу везикулярного стоматита, экспонирующему на своей поверхности рецепторы CD4 и CXCR4 человека. Предложена генетическая конструкция для экспрессии генов mNG_CD4 и CXCR4, образованная последовательностями флуоресцентного белка mNeonGreen и слитого через Р2А-пептид рецептора CD4 и корецептора CXCR4 человека и имеющего нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1. Предложена рекомбинантная плазмида rVSV_mNeonGreen [CD4-CXCR4], кодирующая рецепторы CD4 и CXCR4 человека в составе кДНК копии генома рекомбинантного вируса везикулярного стоматита (ВВС), имеющая размер 15260 п.н., и содержащая вышеуказанную генетическую конструкцию. Также предложен рекомбинантный штамм rVSV_mNG_CD4-CXCR4, содержащий вышеуказанную рекомбинантную плазмиду и обеспечивающий таргетный виролизис клеток, экспонирующих на своей поверхности белки gp120/gp41 ВИЧ-1 тропрости Х4. Штамм депонирован в Государственной коллекции возбудителей вирусных инфекций, риккетсиозов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора под номером V-1108. Группа изобретений обеспечивает расширение спектра генетических конструкций для экспрессии генов mNG_CD4-CXCR4, рекомбинантных плазмид и рекомбинантных репликационно-дефектных вирусов, обеспечивающих виролизис клеток, экспонирующих на своей поверхности gp120/gp41 ВИЧ-1 тропности Х4. 3 н.п. ф-лы, 8 ил., 4 табл., 9 пр.
Группа изобретений относится к генетической конструкции для экспрессии генов mNG_CD4-CCR5, рекомбинантной плазмиде и рекомбинантному вирусу везикулярного стоматита (ВВС), экспонирующему на своей поверхности рецепторы CD4 и CCR5 человека. Предложена генетическая конструкция для экспрессии генов mNG_CD4 и CCR5, образованная последовательностями флуоресцентного белка mNeonGreen и слитого через P2A-пептид рецептора CD4 и корецептора CCR5 человека и имеющего нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1. Предложена рекомбинантная плазмида rVSV_mNeonGreen [CD4-CCR5], кодирующая рецепторы CD4 и CCR5 человека в составе кДНК копии генома рекомбинантного вируса везикулярного стоматита (ВВС), имеющая размер 15259 п.н. и содержащая вышеуказанную генетическую конструкцию. Также предложен рекомбинантный штамм ВВС rVSV_mNeonGreen [CD4-CCR5], содержащий вышеуказанную рекомбинантную плазмиду и обеспечивающий виролизис клеток, экспонирующих на своей поверхности белки gp120/gp41 ВИЧ-1 тропности R5. Штамм депонирован в Государственной коллекции возбудителей вирусных инфекций, риккетсиозов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора под номером V-1107. Группа изобретений обеспечивает расширение спектра генетических конструкций для экспрессии генов mNG_CD4-CCR5, рекомбинантных плазмид и штаммов вирусов, обеспечивающих виролизис клеток, экспонирующих на своей поверхности белки gp120/gp41 ВИЧ-1 тропности R5. 3 н. п. ф-лы, 10 ил., 4 табл., 9 пр.
Изобретение относится к биотехнологии. Описан ген, кодирующий структурные гликопротеины вируса Крым-Конго геморрагической лихорадки. А также описана рекомбинантная плазмида, обеспечивающая экспрессию указанного гена за счет цитомегаловирусного (CMV) промотора, а также его интеграцию в геном клеток млекопитающих. Изобретение может быть использовано в биотехнологии, молекулярной биологии, генетической инженерии и медицине. Техническим результатом заявленного изобретения является создание рекомбинантной плазмиды, обеспечивающей интеграцию и экспрессию структурных гликопротеинов вируса Крым-Конго геморрагической лихорадки. Указанный технический результат достигается путем создания гена, кодирующего открытую рамку считывания М-сегмента вируса ККГЛ, который представлен последовательностью SEQ ID NO: 1 длиной 5052 п.н. Создана плазмида pSB3delta-GPC, которая имеет размер 11495 п.н. и содержит в соответствии с физической и генетической картой, представленной на фиг. 4, целевой ген, кодирующий открытую рамку считывания М-сегмента вируса ККГЛ, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2 длиной 1683 а.к.о. 2 н.п. ф-лы, 7 ил., 4 табл.
Изобретение относится к биотехнологии. Описан ген, кодирующий РНК-зависимую РНК-полимеразу вируса ККГЛ, имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1 длиной 11838 п.н. Также описана рекомбинантная плазмида pSB3delta-RdRp, предназначенная для интеграции и экспрессии гена РНК-зависимой РНК-полимеразы вируса ККГЛ, имеет размер 18270 п.н. и содержит в соответствии с физической и генетической картой целевой ген, кодирующий РНК-зависимую РНК-полимеразу вируса ККГЛ, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2 длиной 3945 а.к.о., и состоит из следующих элементов: ген β-лактамазы (координаты с 17218 по 18078 п.н.) под контролем промотора (координаты с 18079 по 18183 п.н.), в качестве генетического маркера, определяющего устойчивость к ампициллину клеток бактерии E.coli; точка начала репликации ori плазмидного вектора pUC (координаты с 16459 по 17047 п.н.); 5'-ITR и 3'-ITR инвертированные повторы, имеющие координаты с 17 по 288 п.н. и с 15990 по 16214 п.н. соответственно, обеспечивают интеграцию участка плазмиды, заключенного между ними, в геном клеток млекопитающих при помощи транспозазы Sleeping Beauty (SB); промотор и энхансер CMV - обеспечивает экспрессию гена по п. 1 в клетках млекопитающих (координаты с 855 по 1438 п.н.); chimeric intron - химерный интрон, обеспечивающий эффективную транскрипцию, стабильность и транспорт транскрипта из ядра клетки (координаты с 1574 по 1706 п.н.); Т7 promoter - нуклеотидная последовательность промотора бактериофага Т7, необходимая для in vitro транскрипции (координаты с 1751 по 1769 п.н.); L protein (RdRp) - открытая рамка считывания гена РНК-зависимой РНК-полимеразы вируса ККГЛ по п. 1 (координаты с 1783 по 13620 п.н.); IRES2 - внутренний сайт посадки рибосом вируса энцефаломиелита, обеспечивающий экспрессию гена устойчивости к пуромицину (координаты с 13854 по 14240 п.н.); PuroR - ген устойчивости к пуромицину, кодирующий N-ацетил трансферазу (координаты с 14241 по 14843 п.н.); bGH poly(A) signal - сигнал полиаденелирования (координаты с 14874 по 15098 п.н.). Изобретение расширяет арсенал средств для борьбы с ККГЛ. 2 н.п. ф-лы, 8 ил., 4 табл., 3 пр.
Настоящее изобретение относится к вирусологии и ветеринарии. Предложен штамм клеток Escherichia coli KRX pET32b/ASFV/p30, полученный путем трансформации стабильного штамма E.coli KRX pET32b/ASFV/p30 плазмидным вектором pET32b(+)ASFV/p30e2 и депонированный в Государственной коллекции штаммов микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии под №734-МБШ. Предложенный штамм стабильно экспрессирует химерный рекомбинантный белок р30 вируса африканской чумы свиней, состоящий из антигенно активного фрагмента р30, лидирующей последовательности тиоредоксина (Trx-Tag) и двух полигистидиновых участков (6xHis). Предложенный штамм позволяет получать электрофоретически и иммунохимически чистый антигенно активный химерный рекомбинантный белок р30, который может быть использован в тест-системах, предназначенных для серодиагностики африканской чумы свиней, в частности, методом иммуноблоттинга. 2 ил., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарной вирусологии. Предложен экспрессирующий плазмидный вектор, обеспечивающий синтез в клетках Е. coli рекомбинантного белка, состоящего из фрагмента р30 вируса африканской чумы свиней (АЧС), тиоредоксина и двух полигистидиновых участков. Изобретение может быть использовано для изготовления вирусспецифических антигенов в интересах исследования сывороток свиней методом иммуноблоттинга. 3 ил., 1 табл., 4 пр.
