Патенты автора Смирнова Камила Николаевна (RU)
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИОФАГА // 2613423
Изобретение относится к способу получения бактериофага. Способ включает культивирование бактериальных клеток штамма-хозяина при отсутствии посторонней микрофлоры, получение фаголизата, а также очистку фаголизата осаждением и/или фильтрацией. Через 30-120 мин после начала культивирования при оптимальной температуре для роста культуры быстро растущего штамма-хозяина каждые 30-60 мин из культуры штамма-хозяина с поверхности плотной питательной среды или из жидкой среды культивирования делают мазки. Окрашивают мазки раствором акридинового оранжевого в конечной концентрации от 0,001% до 0,02% или раствором акридинового желтого в конечной концентрации от 0,01% до 0,2%. Микроскопируют окрашенный мазок в флуоресцентном микроскопе. Устанавливают момент времени для засева маточного бактериофага по достижению в окрашенном мазке не менее 50% по отношению к общему количеству клеток штамма-хозяина доли окрашенных акридиновым оранжевым клеток, флуоресцирующих оттенками оранжевого или красного цвета, или доли окрашенных акридиновым желтым клеток, флуоресцирующих оттенками желтого или оранжевого цвета, при достижении не менее 10% по отношению к общему количеству клеток штамма-хозяина доли клеток с неравномерной флуоресценцией, а именно парных соприкасающихся полюсами клеток в форме палочек с неравномерной флуоресценцией цитоплазмы или клеток шаровидной и эллипсоидной формы со слабо флуоресцирующим центральным сечением. Затем засевают маточный бактериофаг. Изобретение обеспечивает стабильность достижения высокого титра бактериофага при получении фаголизата в условиях изменения рецептур питательных сред и увеличение размаха варьирования значений показателей культивирования штамма-хозяина и бактериофага. 11 пр.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИОФАГА // 2603730
Изобретение касается способа получения бактериофага. Представленный способ включает засев суспензии бактериальных клеток в титре 108-1012 КОЕ/мл на плотную питательную среду с толщиной слоя от 3 мм до 25 мм и культивирование при отсутствии посторонней микрофлоры, при толщине слоя воздуха над поверхностью плотной питательной среды от 5 мм до 50 мм и при оптимальной температуре для роста культуры штамма-хозяина. Через 30-120 минут после начала культивирования каждые 30-60 минут с поверхности плотной питательной среды делают мазки, окрашивают их интеркалирующим красителем и микроскопируют. Прекращают культивирование при достижении не менее 10% по отношению к общему количеству клеток штамма-хозяина доли клеток с неоднородным окрашиванием флуоресцирующей цитоплазмы. Затем на полученный газон культуры штамма-хозяина засевают маточный бактериофаг в титре 107-1010 БОЕ/мл. Культивируют в течение 13-15 часов при отсутствии посторонней микрофлоры, при толщине слоя воздуха над поверхностью плотной питательной среды от 5 мм до 50 мм и при оптимальной температуре для роста культуры штамма бактериофага. Получают фаголизат при суспендировании, отсасывают фаголизат в стерильную емкость и очищают. Изобретение обеспечивает стабильное достижение высокого титра бактериофага (1012-1014 БОЕ/мл) при получении фаголизатов в условиях изменения как рецептур питательных сред, так и увеличения размаха варьирования значений показателей культивирования штамма-хозяина и бактериофага. Изобретение может быть использовано в биотехнологии получения продукции, содержащей бактериофаги. 8 з.п. ф-лы.
