Патенты автора ТИФЕНТАЛЕР Георг (DE)
Изобретение относится к способу получения конъюгата Fc области антитела. Способ предусматривает одновременное инкубирование i) первого полипептида, содержащего аминокислотную последовательность LPXTG (SEQ ID NO: 20, где Х может быть любым аминокислотным остатком), ii) второго полипептида, содержащего аминокислотную последовательность LPXTА (SEQ ID NO: 31, где Х может быть любым аминокислотным остатком), iii) третьего полипептида, который имеет два N-конца, при этом данный полипептид имеет олигоглициновую Gm (m равен 2 (SEQ ID NO: 22), или 3 (SEQ ID NO: 23), или 4 (SEQ ID NO: 24), или 5 (SEQ ID NO: 25)) аминокислотную последовательность на его первом N-конце и олигоаланиновую Am (m равен 2 (SEQ ID NO: 26), или 3 (SEQ ID NO: 27), или 4 (SEQ ID NO: 28), или 5 (SEQ ID NO:29)) аминокислотную последовательность на его втором N-конце, iv) четвертого полипептида с сортазной активностью, полученного из сортазы А Staphylococcus aureus и имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, и v) пятого полипептида с сортазной активностью, полученного из сортазы А Streptococcus pyogenes и имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34. После одновременного инкубирования указанных полипептидов осуществляют выделение конъюгата из реакционной смеси. Изобретение позволяет осуществить реакции ферментативного конъюгирования полипептидов в одну стадию с использованием двух сортаз, имеющих независимые специфичности. 3 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 6 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способу получения конъюгатов терапевтического соединения с пролонгированным периодом полувыведения, и может быть использовано в медицине. Полученный конъюгат, состоящий из терапевтического полипептида, содержащего 12-мерный спиральный пептид, и специфичного к нему антитела, связанных дисульфидной связью, применяется для создания фармацевтических композиций с пролонгированным периодом полувыведения in vivo активного начала. 6 н. и 5 з.п. ф-лы, 15 ил., 4 табл., 16 пр.
Предложен модуль-переносчик через гематоэнцефалический барьер, содержащий молекулу, подлежащую транспортировке в мозг через гематоэнцефалический барьер, возможно линкер и ровно одно (одновалентное) антитело против рецептора трансферрина или его фрагмент, связывающий рецептор трансферрина, где линкер, если он присутствует, соединяет молекулу, подлежащую транспортировке в мозг через гематоэнцефалический барьер, с одновалентным антителом против рецептора трансферрина или его фрагментом, связывающим рецептор трансферрина, а также фармацевтическая композиция и применение модуля-переносчика. Изобретение может быть использовано в медицине для увеличения эффективности переноса веществ через гематоэнцефалический барьер. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 1 ил., 5 табл., 12 пр.
Изобретение относится к биохимии. Предложен способ получения мультиспецифической связывающей молекулы, содержащей по меньшей мере две связывающих группировки, такой как антитело, где способ включает культивирование клетки, содержащей нуклеиновую кислоту, кодирующую растворимую сортазу А из S. aureus с С-концевым сигналом удерживания в эндоплазматическом ретикулуме, нуклеиновую кислоту, кодирующую первую связывающую группировку, содержащую на ее С-конце сортазный мотив, за которым следует сигнал удерживания в эндоплазматическом ретикулуме, и нуклеиновую кислоту, кодирующую вторую связывающую группировку, содержащую на ее N-конце по меньшей мере диглицин. Указанная клетка секретирует опосредованный сортазой А конъюгат первой связывающей группировки и второй связывающей группировки. Данное изобретение обеспечивает фермент-катализируемое получение мультиспецифической связывающей молекулы и может найти дальнейшее применение, в частности, для быстрого создания библиотек таких связывающих молекул. 6 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способам определения комбинации антигенсвязывающих сайтов и получения биспецифического антитела, что может быть использовано в медицине. Заявленные способы включают следующий этап: определение специфичности связывания и/или аффинности множества биспецифических антител, полученных путем объединения каждого элемента первого множества Fab-фрагментов антитела или scFv-фрагментов антитела с каждым элементом второго множества Fab-фрагментов антитела или scFv-фрагментов антитела и с линкером, содержащим на одном его конце второй элемент первой связывающей пары и на соответствующем другом конце второй элемент второй связывающей пары. Изобретение позволяет эффективно получать мультиспецифические терапевтические молекулы, такие как биспецифические антитела, с заданными свойствами в отношении клеточных поверхностных молекул, присутствующих на клетке у пациента, нуждающегося в лечении, или в отношении лигандов, взаимодействующих с такой клеточной поверхностной молекулой. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 28 ил., 8 табл., 13 пр.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения биспецифичного антитела. Также раскрыт способ определения комбинации антигенсвязывающих сайтов. Изобретение позволяет получать биспецифичные антитела. 2 н.п. ф-лы, 2 табл., 4 пр.
БЫСТРЫЙ СПОСОБ КЛОНИРОВАНИЯ И ЭКСПРЕССИИ СЕГМЕНТОВ ГЕНА РОДСТВЕННОЙ ВАРИАБЕЛЬНОЙ ОБЛАСТИ АНТИТЕЛА // 2612910
Изобретение относится к биохимии. Описан способ получения антитела, включающий выделение антитела из среды культивирования эукариотической клетки, содержащей нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, причем нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, получают путем амплификации нуклеиновых кислот, кодирующих родственный вариабельный домен, используя в качестве матрицы в полимеразной цепной реакции (ПЦР) одноцепочечные кДНК, полученные из РНК антитело-секретирующей В-клетки, и вставки нуклеиновых кислот, кодирующих вариабельный домен, в эукариотическую экспрессионную плазмиду путем безлигазного клонирования, в котором для вставки используют пул нуклеиновых кислот, кодирующих вариабельный домен соответственно легкой и тяжелой цепей антитела, где В-клетка является отдельной единичной В-клеткой, и где В-клетка и ее потомство за 7 дней их совместного культивирования с питающими клетками, начиная с одной клетки, производят более 20 нг/мл антител выделения сегментов нуклеиновых кислот, кодирующих вариабельные домены антител, и введение выделенных сегментов нуклеиновых кислот в эукариотические экспрессионные плазмиды осуществляется без промежуточного выделения и анализа клональных промежуточных плазмид. Таким образом, в способе согласно изобретению не требуется промежуточное клонирование, выделение и анализ промежуточных плазмид. 7 з.п. ф-лы, 3 табл., 4 пр.
