Патенты автора Александров Григорий Николаевич (RU)

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к молекулярно-генетическим способам диагностики точечных мутаций в нативной ДНК. Сущность способа заключается в том, что для диагностики точечной мутации (замены, инсерции, делеции) в нативной ДНК проводится аллель-специфичная ПЦР с двумя флуоресцентно меченными прямыми праймерами, комплементарными последовательностям ДНК разных аллелей в области сайта мутации, и обратным общим праймером с последующим добавлением суспензии оксида графена (в качестве селективного наноструктурного тушителя флуоресценции) к продуктам ПЦР и измерением интенсивностей флуоресценции конечного раствора по двум каналам флуоресценции, соответствующим флуоресцентным меткам прямых праймеров. Для сравнения и получения результатов диагностики используются отрицательные контрольные образцы, не содержащие ДНК на стадии ПЦР. Сравнение интенсивностей флуоресценции в конечном растворе анализируемого образца ДНК по двум каналам флуоресценции с аналогичными интенсивностями для отрицательного контроля позволяет определить генотип анализируемого образца ДНК. При этом для диагностики мутации 4582insT в 25 экзоне гена CUL7, вызывающей 3М-синдром у якутов, прямыми праймерами являются олигонуклеотиды: 5'-FAM-CAGGGGTCCTCAAGATTTCG-3'; 5'-ROX-CAGGGGTCCTCAAGATTCG-3'; обратным праймером является олигонуклеотид: 5'-GATGAGGCAGTTCAGAAGATTCC-3'. Преимущество изобретения заключается в разработке достоверного способа диагностики точечных мутаций (замен, инсерций, делеций) в нативной ДНК с применением оксида графена в качестве селективного тушителя флуоресценции, перспективного для разработки методов ДНК-диагностики наследственных и наследственно предрасположенных заболеваний, фармакогенетических тестов. 2 н.п. ф-лы, 4 ил., 3 табл.

 


Наверх