Патенты автора Лысенко Андрей (RU)

Изобретения относятся к области биотехнологии и медицины и касаются вакцины широкого спектра действия против вируса гриппа А и способа ее получения. Предложенная вакцина содержит рекомбинантные псевдоаденовирусные частицы на основе аденовируса человека пятого серотипа, несущие под контролем индуцибельного промотора ген полноразмерного белка М2 и ген полноразмерного белка NP, модифицированного мотивом PEST и удалением сигнала ядерной локализации, соединенных между собой нуклеотидной последовательностью пептида 2А вируса ящура. Получают вакцину путем создания консенсусных аминокислотных последовательностей белков М2 и NP, модификации последовательности белка NP мотивом PEST и удалением сигнала ядерной локализации с получением генетической конструкции M2-2A-NP-PEST, экспрессирующей гены этих белков под контролем индуцибельного промотора Tet-off. Получение плазмиды pShuttle-tet-M2NP-PEST клонированием генетической конструкции М2-2A-NP-PEST в челночную плазмиду, несущую регуляторные элементы промотора Tet-off с получением плазмиды pAd5-tet-M2NP-PEST при помощи гомологичной рекомбинации плазмиды pShuttle-tet-M2NP-PEST с плазмидой, содержащей геном рекомбинантного аденовируса человека пятого серотипа, трансфекцию плазмиды pAd5-tet-M2NP-PEST в клетки 293НЕК, размножение, накопление рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц Ad5-tet-M2NP-PEST в присутствии доксициклина, концентрирование и очистку этих рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц с помощью ультрафильтрации и высокоэффективной жидкостной хроматографии. Доведение фармацевтически приемлемым буфером до концентрации 106-109 БОЕ/мл. Полученный препарат обладает иммуногенностью и протективной активностью в отношении вирусов гриппа А подтипов H1N1, H2N3, H3N2, H5N2, H9N2. Изобретения могут быть использованы в качестве кандидатной универсальной вакцины против вирусов гриппа А человека и птиц. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 27 ил., 2 табл., 8 пр.

 


Наверх