Патенты автора Приколаб Илья Петрович (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению белков, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка TNFR1-Fc в клетках HEK293. Конструируют экспрессионный плазмидный вектор pFIG-hTNFr с физической картой, представленной на фиг.5, размером 6674 п.о., содержащий: а) последовательность, кодирующую рекомбинантный белок TNFR1-Fc с аминокислотной последовательностью, представленной на фиг. 6б; б) последовательность E/Р энхансера вируса Т-клеточной лейкемии человека и промотора фактора элонгации 1; в) последовательность SP, кодирующую сигнальный пептид CD33; е) последовательность IRES, кодирующую участок внутренней посадки рибосомы вируса энцефаломиокардита, и ж) последовательность GS, кодирующую глутаминсинтетазу. Способ получения гибридного белка TNFR1-Fc включает культивирование клеток HEK293, последовательно трансформированных введением указанного вектора pFIG-hTNFr и вектора psiRNA-h7SK-miR7 с физической картой, представленной на фиг. 7, в жидкой питательной среде с последующим выделением и очисткой белка TNFR1-Fc. Изобретение позволяет получить рекомбинантный белок TNFR1-Fc с высокой активностью ингибирования фактора некроза опухоли с высоким выходом. 3 н. и 1 з.п. ф-лы, 8 ил., 7 пр.
