Патенты автора Каримова Оксана Геннадьевна (RU)
Изобретение относится к области медицинской диагностики. Изобретение представляет собой способ культивирования клеток амниотической жидкости, включающий добавление к клеткам амниотической жидкости питательной среды и инкубирование во флаконах, несколько смен питательной среды с последующей обработкой клеток колхицином, открепление клеток от дна флакона, гипотоническую обработку и обработку фиксатором, где в качестве питательной среды используют «Амниомакс» или питательную среду «Амниокар» в соотношении исходная проба : среда, равном 1,4:1, первую смену среды проводят через 5 дней от начала культивирования с предварительной обработкой клеток раствором Хенкса в соотношении 2,3:1, последующие смены среды осуществляют через каждые 2 дня, далее через 6-8 дней от начала культивирования проводят трипсинизацию с помощью 0,05% раствора трипсин-ЭДТА в течение 2-3 минут при 37°С, при этом первую трипсинизацию проводят в одном из флаконов на культуре клеток с самым активным ростом, на следующий день проводят трипсинизацию во втором флаконе со средним ростом, еще через сутки - в третьем флаконе с минимальным ростом, проводят обработку клеток колхицином с концентрацией 1 мкг/мл в течение 2,5 часов при 37°С в присутствии 5% СО2, открепление клеток от дна флакона осуществляют 0,05% раствором трипсин-ЭДТА в течение 2-3 минут при 37°С, гипотоническую обработку клеток проводят водным раствором эмбриональной телячьей сыворотки (2:1) в течение 20 минут при 37°С, а фиксацию клеток осуществляют раствором, содержащим этанол и ледяную уксусную кислоту в соотношении 3:1. Изобретение позволяет ускорить способ и повысить выход культивируемых клеток. 1 ил., 1 табл., 2 пр.
