Патенты автора Рудометов Андрей Павлович (RU)
Изобретение относится к биотехнологии и генетической инженерии. Создана плазмидная ДНК-матрица pVAX-RBD, имеющая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1 размером 3710 п.н., молекулярную массу 2.6×103 кДа, содержащая целевой ген, кодирующий химерный белок 176-RBD, перед которым находится промотор РНК-полимеразы фага Т7, обеспечивающий синтез in vitro мРНК-RBD с помощью РНК-полимеразы Т7. Молекула мРНК-RBD, имеющая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2, получена с использованием ДНК-матрицы pVAX-RBD, содержит открытую рамку считывания, кодирующую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, обеспечивающую синтез и секрецию белка-иммуногена RBD SARS-CoV 2 в организме млекопитающих, и содержащую гибридную сигнальную последовательность 176, консенсусную последовательность Козак, 7-метилгуанозиновый кэп на 5'-конце мРНК, полиаденозиновый (поли А) хвост на 3'-конце мРНК, длиной 150-200 нуклеотидов, и 5'- и 3'-нетранслируемые области (UTR) перед и после открытой рамки считывания. Комплекс в виде наночастиц, индуцирующих SARS-CoV-специфические антитела, обладающие вируснейтрализующей активностью, состоящих из молекул конъюгата полиглюкинхпермидин и молекул мРНК-RBD, взятых в разных зарядовых соотношениях от 1:1 до 1:30, соответствующих весовому соотношению от 1:3 до 1:90, имеющих размер в диапазоне 50-900 нанометров, причем каждая наночастица содержит ядро, состоящее из молекул мРНК-RBD и покрытое слоем конъюгата полиглюкинхпермидин, удерживаемого за счет ионного взаимодействия между отрицательно заряженным ядром и положительно заряженным спермидином. Техническим результатом является создание более эффективного средства доставки мРНК-RBD в клетки организма для синтеза в них белка RBD SARS-Cov-2 и повышение уровня секреции указанного белка из клеток для обеспечения презентации белка RBD иммунной системе организма. 3 н.п. ф-лы, 7 ил., 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к биотехнологии. Заявлена плазмида pUSB2-AmQ. Размер плазмиды pUSB2-AmQ 7495 пар оснований. Плазмида pUSB2-AmQ содержит ряд структурных элементов. Синтетический промотор обеспечивает эффективную транскрипцию контролируемой мРНК. Рекомбинантный ген α-амилазы В. amyloliquefaciens кодирует целевой рекомбинантный белок. Последовательность bla кодирует белок бета-лактамазу. Последовательность bla является селективным маркером для трансформации штаммов Е. coli. Участок repB обеспечивает инициацию репликации в штаммах В. subtilis. Хлорамфениколацетилаза является селективным маркером для трансформации штаммов В. subtilis. Рекомбинантный штамм Bacillus subtilis WB800N/pUSB2-AmQ получен трансформацией исходного штамма плазмидой pUSB2-AmQ. Штамм обеспечивает продукцию α-амилазы. При культивировании штамм Bacillus subtilis WB800N/pUSB2-AmQ обеспечивает синтез рекомбинантной альфа-амилазы 90% от общего секретируемого белка Bacillus subtilis. 2 н.п. ф-лы, 7 ил., 5 табл., 4 пр.
Группа изобретений относится к области биотехнологии, генной инженерии и медицины. Предложен искусственный ген YkuJ-MPER, кодирующий белок-иммуноген YkuJ-MPER против ВИЧ-1, имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO:1 длиной 360 п.н. Предложена также рекомбинантная плазмидная ДНК pET21a-YkuJ-MPER, предназначенная для получения белка-иммуногена, обеспечивающего индукцию ВИЧ-специфического В-клеточного ответа, имеющая размер 5700 п.н., молекулярную массу 3,8·103 кДа, содержащая ген YkuJ-MPER, кодирующий белок-иммуноген YkuJ-MPER против ВИЧ-1, находящийся под контролем промотора РНК-полимеразы фага Т7, обеспечивающего его экспрессию в клетках Е. coli. Предложен также искусственный белок-иммуноген YkuJ-MPER, состоящий из участка белка В. subtilis YkuJ и двух участков MPER ВИЧ-1, имеющий молекулярную массу 14,2 кДа и аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2. Группа изобретений обеспечивает эффективную индукцию широконейтрализующих анти-ВИЧ-1 антител при подборе оптимальной стратегии иммунизации. 3 н.п. ф-лы, 12 ил., 1 табл., 6 пр.
Группа изобретений относится к рекомбинантной плазмиде, обеспечивающей синтез химерного белка прохимозина В Bos Taurus, и рекомбинантному штамму Е. coli - продуценту химерного белка прохимозина В Bos taurus в клетках E. coli. Рекомбинантная плазмида рЕТ21а-ProChym размером 6504 пар оснований (п.о.) содержит следующие существенные для ее функционирования и экспрессии целевого белка структурные элементы: промотер бактериофага Т7, обеспечивающий эффективную транскрипцию контролируемой мРНК; рекомбинантный ген прохимозина В Bos taurus, кодирующий целевой химерный белок; Т7 терминатор, являющийся нетранслируемой областью терминации транскрипции бактериального оперона, обеспечивающей эффективное окончание транскрипции; последовательность экспрессионного тага Т7, добавленную в состав нуклеотидной последовательности гена прохимозина В Bos taurus на N-конец, для увеличения выхода целевого белка; последовательность blа, кодирующий белок бета-лактамазу, являющуюся селективным маркером для трансформации штаммов Е. coli; последовательность ColE1, обеспечивающий репликацию плазмиды в штаммах Е. coli. Рекомбинантный ген белка прохимозина В Bos taurus имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1 от нуклеотида в положении 5205 п.о. до нуклеотида в положении 6347 п.о., кодирующий целевой химерный белок прохимозин В Bos taurus с полной аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 2, встроенный по сайтам рестрикции FauND I и Sfr274 I в область полилинкера вектора рЕТ21а, содержащего промотор и терминатор РНК-полимеразы фага Т7. Предложенный рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3)pLysE рЕТ21а-ProChym получен трансформацией рекомбинантной плазмидой рЕT21a-ProChym и депонирован в Коллекции бактерий, бактериофагов и грибов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора под регистрационным номером В-1362. Группа изобретений обеспечивает высокую продукцию прохимозина. 2 н.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл., 6 пр.
Изобретение относится к области медицины, биотехнологии и генной инженерии. Предложен рекомбинантный химерный полипептид-иммуноген, включающий консервативные Т- и В-клеточные эпитопы вируса ВИЧ-1 и последовательно расположенные пептидные фрагменты белков р24, gp41, gp120, узнаваемые широконейтрализующими антителами 10e8, 2F5, VRC01. Изобретение обеспечивает повышение ВИЧ-специфического иммунного ответа за счет включения в состав полипептида-иммуногена nTBI уникальных линейных имитаторов конформационных эпитопов, узнаваемых широконейтрализующими антителами. 6 ил., 5 пр.
