Патенты автора Красников Борис Федорович (RU)
Изобретение относится к штамму Escherichia coli BL21(DE3), предназначенному для получения ω-амидазы человека. Предложен штамм Escherichia coli BL21(DE3), трансформированный экспрессионной плазмидной конструкцией pQE-Nit22, представленной на фиг. 1. При этом в составе экспрессионной плазмидной конструкции pQE-Nit22 81 нуклеотид кодирующей области гена Nit2, ограниченный сайтами рестриктаз BamHI и SphI, соответствует SEQ ID#1. Изобретение позволяет повысить выход продукта при культивировании на питательных средах на основе пептона, дрожжевого экстракта и глюкозы. 4 ил., 4 табл.
СПОСОБ СИНТЕЗА АЛЬФА-КЕТОМЕТИЛСЕЛЕНОБУТИРАТА // 2776282
Изобретение относится к способу синтеза альфа-кетометилселенобутирата - продукта превращения L-селенометионина. Предложенный способ характеризуется тем, что создают водный раствор аминокислоты L-селенометионина в концентрации от 10 до 200 мМ, доводят рН до 6-9 и проводят превращение под действием биокатализатора - оксидазы L-аминокислот из Crotalus adamanteus, выдерживая реакционную смесь при 10-30°С при перемешивании до достижения максимального выхода альфа-кетометилселенобутирата, депротеинизируют раствор методом ультрафильтрации, пропускают раствор через катионообменную колонку в Н-форме, объединяют фракции, содержащие альфа-кетометилселеномасляную кислоту, экстрагируют целевой продукт органическим растворителем и после удаления органического растворителя получают препарат альфа-кетометилселенобутирата. Технический результат заключается в разработке препаративного синтеза альфа-кетометилселенобутирата в результате превращения L-селенометионина под действием оксидазы L-аминокислот с выходом не менее 40%. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.
Настоящее изобретение относится к биохимии и генетической инженерии, в частности к рекомбинантному штамму Escherichia coli BL21(DE3; pQE-Nit2). Указанный штамм получен путём трансформации штамма Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной конструкцией pQE-Nit2, которая находится под контролем промотора фага Т5, и предназначен для получения ω-амидазы человека (Nit2) при культивировании на питательных средах на основе пептона, дрожжевого экстракта и глюкозы. Особенностью гена Nit2 в составе конструкции pQE-Nit2 является оптимизированный кодоновый состав, а также наличие искусственно введенной аффинной метки 6His-таг непосредственно после инициаторного кодона ATG (Met), обеспечивающего возможность одностадийной очистки продукта методом металлоаффинной хроматографии на Ni-NTA-агарозе. Настоящее изобретение позволяет получить ω-амидазу человека с повышенным выходом. 2 ил., 1 табл., 6 пр.
