Патенты автора Перекрест София Владимировна (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению белков человека, и может быть использовано для получения орексина А человека в клетках Escherichia coli. Способ получения заключается в культивировании клеток штамма-продуцента Escherichia coli BL21(DE3)pET151/D-TOPO, полученного трансформацией плазмидной ДНК pET151/D-TOPO, содержащей кодонно оптимизированный ген орексина А человека, клеток Escherichia coli BL21(DE3) с использованием индуктора экспрессии таргетного белка. Затем лизируют клетки, отмывают тельца включения 0.2 М дезоксихолятом натрия, растворяют тельца включения в 8 М растворе мочевины, проводят рефолдинг орексина А в буфере 0.1M Tris рН 8.0, 0.2 mM ЭДТА с 0.5 М L-аргинином и проводят хроматографическую очистку полученного раствора белка на S-Sepharose колонке и S-100 колонке. Изобретение позволяет получить высокоочищенный физиологически активный рекомбинантный орексин А человека. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл., 5 пр.
