Патенты автора Лукьянова Тамара Ивановна (RU)
Изобретение относится к области белковой инженерии, биотехнологии и медицины. Описан рекомбинантный белок, имеющий последовательность SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 9, связывающийся с рецептор-связывающим доменом S-белка SARS-CoV-2, а также его применение в качестве средства, обладающего способностью связываться с рецептор-связывающим доменом S-белка SARS-CoV-2. Раскрыта рекомбинантная плазмида, обеспечивающая синтез в клетках Escherichia coli указанного рекомбинантного белка, причем указанная плазмида получена путем клонирования фрагмента ДНК с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 8 или SEQ ID NO: 1 в плазмидный вектор pET39b по сайтам рестрикции NdeI/XhoI. Представлен рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3), содержащий указанную рекомбинантную плазмиду – продуцент описанного рекомбинантного белка. Кроме того, представлен способ получения описанного рекомбинантного белка из биомассы указанного рекомбинантного штамма Escherichia coli BL21(DE3), при котором осуществляют разрушение клеток дезинтеграцией, удаляют клеточный дебрис, выделяют белок при помощи двухстадийной хроматографии, включающей стадию белковой денатурации/ренатурации на металлохелатном аффинном сорбенте, и очистку при помощи анионообменной хроматографии. Изобретение может найти применение в биотехнологии и медицине при создании лекарств против КОВИД-19. 5 н.п. ф-лы, 12 ил., 12 пр.
Группа изобретений относится к биотехнологии и касается получения рекомбинантной барназы. Предложена рекомбинантная плазмида pET-STII-Ba, обеспечивающая синтез в клетках Escherichia coli барназы, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID №3. Указанная плазмида получена путем клонирования рекомбинантного фрагмента ДНК с нуклеотидной последовательностью SEQ ID №1 в плазмидный вектор pET39b по сайтам рестрикции NdeI/HindIII. Предложен рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3)/pET-STII-Ba, содержащий рекомбинантную плазмиду pET-STII-Ba и продуцирующий барназу. Способ получения барназы, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID №3, из биомассы штамма Escherichia coli BL21(DE3)/pET-STII-Ba включает выделение белка из периплазмы клеток, выращенных при пониженной температуре 25ºС, и последующую его очистку при помощи хроматографии на фосфоцеллюлозе и катионообменнике. Группа изобретений позволяет увеличить и стабилизировать продукцию рекомбинантной барназы при накоплении последней в периплазме клеток, выращенных при пониженной температуре 25°С. 3 н.п. ф-лы, 4 ил., 6 пр.
