Патенты автора ГОКЛЕН Кент И. (US)
Способы очистки антител // 2651483
Изобретение относится к биохимии. Описан способ очистки белка из раствора, содержащего по меньшей мере одну загрязняющую примесь, посредством аффинной хроматографии с суперантигеном, включающий: а) адсорбирование белка на суперантигене, иммобилизованном на твердом носителе; б) удаление по меньшей мере одной загрязняющей примеси посредством приведения в контакт иммобилизованного суперантигена, содержащего адсорбированный белок, с первым промывочным буфером, содержащим алифатический карбоксилат, где указанный алифатический карбоксилат содержит остов из 6-11 атомов углерода; и в) элюирование белка из суперантигена, иммобилизованного на твердом носителе; где белок выбран из группы, состоящей из растворимого рецептора, антитела, фрагмента антитела, одиночного вариабельного домена иммуноглобулина, Fab, F(ab')2, Fv, связанных через дисульфид Fv, scFv, мультиспецифического антитела с закрытой конформацией, связанных через дисульфид scFv или диатела. Также описан способ очистки белка из его содержащего загрязняющие примеси раствора посредством хроматографии с белком А, включающий: а) уравновешивание белка А, иммобилизованного на твердой фазе, уравновешивающим буфером для белка А; б) адсорбирование белка из содержащего загрязняющие примеси раствора на белке А, иммобилизованном на твердой фазе; в) удаление по меньшей мере одной загрязняющей примеси путем промывания твердой фазы первым промывочным буфером для белка А, содержащим 50 мМ или 55 мМ трис-основания, 45 мМ уксусной кислоты, по меньшей мере один алифатический карбоксилат, при рН 7,2, 7,5 или 8,0, где алифатический карбоксилат выбран из группы, состоящей из 100 мМ каприлата натрия и 20 мМ деканоата натрия; и (г) извлечение белка из твердой фазы элюирующим буфером для белка А, где все буферы приготовлены без добавления NaCl. Кроме того, описан способ очистки белка из его содержащего загрязняющие примеси раствора посредством хроматографии с белком L, включающий: а) уравновешивание белка L, иммобилизованного на твердой фазе, уравновешивающим буфером для белка L; б) адсорбирование белка из содержащего загрязняющие примеси раствора на белке L, иммобилизованном на твердой фазе; в) удаление по меньшей мере одной загрязняющей примеси путем промывания твердой фазы первым промывочным буфером для белка L, содержащим 52 мМ трис-основания, 48 мМ уксусной кислоты, по меньшей мере один алифатический карбоксилат, при рН 7,0, где алифатический карбоксилат выбран из группы, состоящей из 100 мМ каприлата натрия и 20 мМ деканоата натрия; и (г) извлечение белка из твердой фазы элюирующим буфером для белка L, где все буферы приготовлены без добавления NaCl. 3 н. и 35 з.п. ф-лы, 3 ил., 8 табл., 7 пр.
