Патенты автора Поляков Дмитрий Степанович (RU)

Изобретение относится к области молекулярной генетики и медицинской биотехнологии и может быть использовано в медицине при создании технологий дифференциальной диагностики аутоиммунного сахарного диабета, синдрома мышечной скованности и других заболеваний. Разработан способ трансфекции и культивирования клеток, синтезирующих рекомбинантный белок глутаматдекарбоксилазу GAD65, основанный на трансфекции клеточной культуры HEK293 специально сконструированной плазмидой, содержащей под эукариотическим промотором ген человеческого белка GAD65. Стабильная экспрессия гена и синтез белка GAD65 в трансфицированных клетках HEK293 достигнута за счет регулярного дополнительного обогащения глутамином культуральной среды. Предложенный способ культивирования клеток-продуцентов GAD65 в среде с повышенным содержанием глутамина позволяет обеспечивать стабильный синтез глутаматдекарбоксилазы в лабораторных условиях с одновременным повышением эффективности трансфекции. 2 ил., 3 табл, 3 пр.

Изобретение относится к области биохимии, генной инженерии и биотехнологии, в частности к способу получения гетеротетрамерного рекомбинантного стрептавидина. Настоящий способ предусматривает создание двух плазмид, одна из которых кодирует стрептавидин мутантного типа, а другая – стрептавидин дикого типа, трансформацию указанными плазмидами клеток E.coli, индукцию синтеза стрептавидинов, выделение периплазматической фракции клеток и очистку гетеротетрамерного стрептавидина на аффинном сорбенте. Способ отличается тем, что в одном случае его осуществления стрептавидин дикого типа сцеплен с аффинной меткой, а стрептавидин мутантного типа – с PelB-лидерным пептидом, во втором случае – стрептавидин мутантного типа сцеплен с аффинной меткой, а стрептавидин дикого типа – с PelB-лидерным пептидом. Настоящее изобретение позволяет получать гетеротетрамерный рекомбинантный стрептавидин с высокой эффективностью. 1 н. и 9 з.п. ф-лы, 12 ил., 9 пр.

 


Наверх