Патенты автора Яцентюк Светлана Петровна (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии, ветеринарной вирусологии и может применяться для выявления вируса герпеса КРС 6 типа. Способ предполагает проведение ПЦР с детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени с использованием набора олигонуклеотидов, комплементарных области гена ДНК-полимеразы (ORF9) BoHV-6, включающего: прямой праймер BHV6-pol-F (5'- ACAGACGGGCAGCAGATAAG -3'), обратный праймер BHV6-pol-R (5'- ATGGTTCGCCCCTGTAGAGT -3') и флуоресцентно-меченый зонд BHV6-pol-Z (5'- (R6G)CACGGACGGATACCAGGGCGCTACAG(BHQ-1) -3'). Способ обладает высокой специфичностью и может быть использован при тестировании сыворотки и криоконсервированной спермы КРС. 3 ил., 1 табл., 3 пр.
СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ТОКСИГЕННЫХ Pasteurella multocida МЕТОДОМ ПЦР В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ // 2785435
Изобретение относится к области биотехнологии, ветеринарной микробиологии и генетической инженерии и может применяться для детекции токсигенных Pasteurella multocida в различном биологическом материале. Способ включает подготовку образца, выделение ДНК, проведение полимеразной цепной реакции c гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени с использованием набора олигонуклеотидов для совместной амплификации генов kmt1 и toxA Pasteurella multocida, содержащего прямые - Pm_F 5'-TGCCACTTGAAATGGGAAATG-3'; toxA_F 5'-CAGTGAAAGCACGGCTGA-3' и обратные -Pm_R 5'-AATAACGTCCAATCAGTTGCG-3'; toxA_R 5'-CATAAGCAGGAAGTTCCCAGT-3' праймеры и флуоресцентно-меченые зонды Pm_Z 5'-R6G-TGTGAGTGGGCTTGTCGGTAGTCT-BHQ-3'; toxA_Z 5’-Cy5-TCAGCGCCTTTTCGCGGATATGCTG-BHQ-3’, и реакционной смеси. Результаты амплификации оценивают с помощью программного обеспечения амплификатора, при этом результаты интерпретируют на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с установленной на уровне 0,05 пороговой линией и диагностируют наличие генома бактерии Pasteurella multocida и гена токсина toxA. Способ позволяет осуществлять быстрое подтверждение присутствия токсигенных вариантов Pasteurella multocida в культурах и образцах биологического материала: респираторных смывах и внутренних органов от разного вида животных: свиней, КРС, МРС, кроликов, птицы, при высокой чувствительности и специфичности. 2 ил., 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, ветеринарной микробиологии и генетической инженерии и может применяться для выявления микроорганизма Ureaplasma diversum в различном биологическом материале. Способ включает подготовку образца, выделение ДНК, проведение полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени с использованием набора олигонуклеотидов, комплементарных области гена 16 S рибосомальной РНК Ureaplasma diversum, содержащего прямой (Udv_F5'-CATTTACTTGCATGAGTGAATG-3') и обратный (Udv_R5'-AGCTACGCGTCAATGAC-3') праймеры и флуоресцентно-меченый зонд (Udv_Z5'-(ROX)-TGGATGAGGGTGCGACGTATCATCC-(BHQ)-3'), и реакционную смеси. Амплификация проводится по следующей программе: 15 мин при 95°С; 10 с при 95°С, 20 с при 60°С, 10 с при 72°С (5 циклов без детекции флуоресцентного сигнала); 10 с при 95°С, 20 с при 55°С, 10 с при 72°С (35 циклов с детекцией флуоресцентного сигнала на канале ROX/Orange). Результаты амплификации оценивают с помощью программного обеспечения амплификатора, при этом результаты интерпретируют на основании наличия (или отсутствия) пересечения кривой флуоресценции с установленной на уровне 0,05 пороговой линией и диагностируют наличие генома бактерии Ureaplasma diversum. Изобретение позволяет выявить ДНК Ureaplasma diversum в спермопродукции, предназначенной для искусственного осеменения крупного рогатого скота, с высокой специфичностью и чувствительностью. 1 табл., 1 ил., 2 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, ветеринарной микробиологии и генетической инженерии и может применяться для диагностики гистофилеза крупного рогатого скота. Набор олигонуклеотидов для идентификации и детекции ДНК бактерии Histophilus somni методом ПЦР в режиме реального времени, содержит универсальные прямой (Hsmn_F) и обратный (HsmnR) праймеры и флуоресцентно-меченый зонд (Hsmn Z) для идентификации бактерии Histophilus somni, комплементарные области гена 16 S рибосомальной РНК микроорганизма Histophilus somni, имеющие заявленный нуклеотидный состав. Способ идентификации и детекции ДНК бактерии Histophilus somni методом ПЦР в режиме реального времени включает выделение ДНК из биологического материала, постановку полимеразной цепной реакции с использованием набора олигонуклеотидов для идентификации и детекции ДНК бактерии Histophilus somni в реакционной смеси. ПЦР в режиме реального времени проводится с использованием установленной программы амплификации. Результаты амплификации в режиме реального времени оценивают с помощью программного обеспечения, при этом результаты интерпретируют на основании наличия (или отсутствия) пересечения кривой флуоресценции с установленной на уровне 0,05 пороговой линией. 2 н.п. ф-лы, 2 пр., 1 табл., 1 ил.
Изобретение относится к области биотехнологии и предназначено для определения индекса фрагментации ДНК сперматозоидов у животных-производителей. Осуществляют подготовку мазка спермопробы к окрашиванию и приготовление красителя смешиванием раствора лимонной кислоты, гидрофосфата натрия и 1%-го акридин оранжевого. Погружают образец в краситель. Выполняют микроскопию. Подсчитывают сперматозоиды с фрагментированной ДНК и нормальных, при этом сперматозоиды с фрагментированной ДНК окрашиваются в красный, желтый или оранжевый цвета, нормальные - в зеленый цвет. При выявлении индекса фрагментации более 30% спермопроба выбраковывается и не допускается для искусственного осеменения животных. Изобретение обеспечивает простой, доступный способ определения индекса фрагментации ДНК.
