Патенты автора Фатхудинов Тимур Хайсамудинович (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии и регенеративной медицины, а именно к способу получения линии макрофагов с провоспалительными свойствами. Способ получения линии макрофагов с провоспалительными свойствами характеризуется тем, что производят забор крови в пробирки с ЭДТА, кровь разводится раствором фосфатного буфера, содержащего ЭДТА, разведенная кровь наслаивается на раствор фикола и центрифугируется при комнатной температуре, далее отбирается лейкоцитарная пленка, промывается дважды раствором фосфатного буфера, содержащего ЭДТА, после единожды раствором фосфатного буфера, содержащего ЭДТА и бычий сывороточный альбумин БСА (1%), полученный осадок клеток инкубируется с магнитными частицами, содержащими антитела к рецептору CD14, фракция клеток проводится через магнитную колонку и смывается раствором фосфатного буфера, содержащего ЭДТА и БСА, и получают CD14++ моноциты, которые культивируются в среде RPMI с добавлением бычьей сыворотки, L-глутамина, пенициллина, стрептомицина, макрофагального колониестимулирующего фактора, клетки дифференцируются в макрофаги в течение 7 дней, после чего проводят нокдаун генов, при этом олигонуклеотиды, использованные для нокдауна, разводятся в фосфатном буфере, пары олигонуклеотидов отжигаются, далее инкубируются при комнатной температуре, для трансфекции клеток используют липофильный агент Lipofectamine 3000, после добавления липофильных комплексов к клеткам проводят инкубацию 24 часа, далее производят смену среды на RPMI с добавлением бычьей сыворотки, L-глутамина, пенициллина, стрептомицина, через 24 часа после смены среды проводят анализ фенотипа, а также анализ экспрессии провоспалительных генов и получают культуру макрофагов с провоспалительными свойствами, при определенных условиях. Вышеописанный способ позволяет получить клеточную культуру макрофагов со стабильным провоспалительным фенотипом, пригодную для проведения исследований in vivo и in vitro. 2 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и связано с моделированием у лабораторных животных тяжелого инвалидизирующего заболевания - ювенильного эндометриоза. Для этого гомозиготным самкам мыши линии Balb/c-nude весом 18-20 г пришивают к брюшине со стороны брюшной полости фрагмент очага эндометриоза размером 2×2 мм, полученный от женщин раннего репродуктивного периода, после операции животному вводят подкожно 3 раза в неделю по 100 нг 17-бета эстрадиол, разведенного в касторовом масле, культивирование очага эндометриоза in vivo продолжают в течение двух недель, после чего модель пригодна для исследования методов лечения ювенильного эндометриоза. Изобретение обеспечивает создание адекватной модели ювенильного эндометриоза. 2 пр.
Изобретение относится к биотехнологии, клеточной биологии и медицине, в частности к способу получения трёхмерных клеточных органоидов из плоскоклеточных опухолей органов головы и шеи. Для осуществления указанного способа первичный материал транспортируют из оперативного блока в культуральную лабораторию в срок не более 4 часов при хранении материала при +4°С в транспортной среде. Далее ткань трижды промывают в растворе ЭДТА, затем аналогичным образом в растворе антибиотика-антимикотика, после чего трижды отмывают от реагентов в буферном растворе. Опухолевую ткань максимально полно очищают от окружающих ее тканей перитуморальной области. Для ферментативной диссоциации ткани в течение 60-90 минут при 37°С в условиях постоянного перемешивания на орбитальном шейкере с минимальной скоростью 50 об/мин используют рекомбинантные коллагеназы или рекомбинантный трипсин, либо их комбинацию, дополнительно используют рекомбинантную ДНКазу. Объем диссоциирующего раствора превышает объем материала в 5 раз. Суспензию изолированных из ткани клеток разбавляют буферным раствором в 10 раз и пропускают через нейлоновое сито с размером ячеек 100 мкм. В качестве культуральной среды используют DMEM/F12, либо 199 среду, необходимую для поддержания недифференцированного состояния опухолевых стволовых клеток и предотвращения эпителиально-мезенхимального перехода. В культуральную среду вносят 2% v/v аутогенной плазмы, полученной от донора опухолевой ткани. После культивирования в течение нескольких суток сформировавшиеся органоиды могут быть извлечены для исследования либо перенесены в более вязкий матрикс на основе культуральной среды, содержащей 25% v/v аутогенной плазмы. Настоящее изобретение позволяет получить органоиды из опухолевой ткани органов головы и шеи. 3 ил., 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения ноотропной композиции на основе полипептидных комплексов, выделенных из нейрональных прогениторных клеток в условиях теплового шока. Указанная композиция характеризуется тем, что в ее состав входят белки и полипептиды с молекулярной массой от 3 кДа до 250 кДа, из которых 60% имеют молекулярную массу в диапазоне от 10 до 50 кДа, мозговой нейротрофический фактор (BDNF) не менее 120 пг/мл и глиального нейротрофического фактора (GDNF) не менее 40 пг/мл, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) не менее 60 пг/мл, суммарная масса белка не менее 1 мг/мл препарата. При этом клеточная культура нейрональных прогениторных клеток, из которой получают композицию, демонстрирует экспрессию нейронального маркера β3-тубулина, молекулы адгезии нервных клеток (PSA-NCAM) и состоит из 99,5±2,45% TUBB3+-клеток. Изобретение позволяет эффективно получать белково-пептидную композицию, в которую будут включены не только небольшие пептиды, но и полноразмерные белковые нейрональные ростовые и дифференцировочные факторы, эффективность действия которых факторов заведомо выше, чем у коротких пептидов, а иммуногенность отсутствует. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 4 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и предназначено для лечения маточных форм бесплодия. Для лечения «тонкого» эндометрия женщинам репродуктивного возраста с «тонким» эндометрием в пролиферативную фазу менструального цикла (до 10 дня) проводят инъекционное введение аутологичной плазмы, обогащенной тромбоцитами (Platelet-rich plasma (PRP)), под контролем офисной гистероскопии в условиях малой операционной под внутривенной анестезией. При этом введение аутологичной PRP производится в объеме 35-40 мл иглой «МИТ» непосредственно в толщу эндометрия на глубину 2-3 мм. Использование изобретения позволяет восстановить нормальную структуру и функциональную активность эндометрия путем локального воздействия на слизистую оболочку матки без необходимости проведения процедуры внутриматочной инфузии несколько раз в каждом цикле, а также обеспечивает локальное и точное воздействие факторов роста, содержащихся в аутологичной PRP, на слизистую оболочку матки и контролируемую глубину введения. 3 пр.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения ноотропной композиции на основе полипептидных комплексов, выделенных из нейрональных прогениторных клеток в условиях гипоксии, а также к ноотропной композиции на основе полипептидных комплексов, выделенных из нейрональных прогениторных клеток в условиях гипоксии. Указанная композиция характеризуется тем, что в ее состав входят белки и полипептиды с молекулярной массой от 5 кДа до 250 кДа, мозговой нейротрофический фактор (BDNF) не менее 130 пг/мл и глиального нейротрофического фактора (GDNF) не менее 30 пг/мл, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) не менее 90 пг/мл, суммарная масса белка не менее 1 мг/мл препарата. При этом клеточная культура нейрональных прогениторных клеток, из которой получают композицию, демонстрирует экспрессию нейронального β - тубулина III, молекулы адгезии нервных клеток (PSA-NCAM) и состоит из 95±5% TUBB3+ - клеток. Изобретение позволяет эффективно получать белково-пептидную композицию, в которую включены не только небольшие пептиды, но и полноразмерные белковые нейрональные ростовые и дифференцировочные факторы, эффективность действия которых заведомо выше, чем у коротких пептидов, а иммуногенность отсутствует. 2 н.п. ф-лы, 4 пр., 2 ил.
Изобретение относится к получению ноотропной композиции на основе полипептидных комплексов, выделенных из глиальных прогениторных клеток в условиях теплового шока. Способ включает забор биоптата кожи, получение культуры фибробластов, криоконсервацию культуры фибробластов, размораживание культуры фибробластов, адаптирование культуры фибробластов к xeno free условиям культивирования, репрограммирование фибробластов для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК), культивирование ИПСК, криоконсервацию ИПСК, размораживание ИПСК, дифференцировку ИПСК в глиальные прогениторные клетки, культивирование глиальных прогениторных клеток в условиях теплового шока, сбор кондиционированной среды и получение белково-пептидного комплекса. Для моделирования теплового шока глиальные предшественники культивируют в течение часа при 40°С в ростовой среде, содержащей DMEM/F12, 2% добавки В27, 20 нг/мл FGF-2, 1 мкМ пурморфамин, после чего производят замену среды на DMEM/F12 и культивируют в течение 6 часов, после чего кондиционированную среду собирают и центрифугируют при 300 об/мин в течение 5 минут, супернатант отбирают и концентрируют в 24 раза с помощью 3 кДа мембран Amicon Ultra, затем полученный концентрат подвергают стерилизующей фильтрации и получают ноотропную композицию. В состав композиции входят белки и полипептиды с молекулярной массой от 3 до 250 кДа, из которых 65% имеют молекулярную массу в диапазоне от 10 до 60 кДа, содержание белков теплового шока не менее 40% от общей массы белков, мозговой нейротрофический фактор (BDNF) не менее 140 пг/мл и глиального нейротрофического фактора (GDNF) не менее 60 пг/мл, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) не менее 80 пг/мл, суммарная масса белка не менее 1 мг/мл препарата, при этом клеточная культура глиальных прогениторных клеток, из которой получают композицию, демонстрирует экспрессию астроглиальных маркеров S100b и GFAP и состоит из 98±2% S100b+ - клеток. Изобретение позволяет расширить арсенал технических средств. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 4 пр.
Изобретение представляет собой ноотропную белково-пептидную композицию на основе полипептидных комплексов, выделенных из нейронов и глиальных клеток, полученных методом направленной дифференцировки индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека, характеризующуюся тем, что в ее состав входят белки и полипептиды с молекулярной массой от 0,5 до 100 кДа, из которых 75% имеют молекулярную массу в диапазоне от 10 до 90 кДа, содержание мозгового нейротрофического фактора (BDNF) не менее 50 пг/мл и глиального нейротрофического фактора (GDNF) не менее 40 пг/мл, суммарная масса белка не менее 20 мг/мл препарата, при этом клеточная культура индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, из которой получают композицию, демонстрирует экспрессию генов, специфичных для ИПСК ОСТ4, SOX2, NANOG, FOXD3, HESX1, SALL4, а также для нейральных клеток DARPP-32, РАХ6, FOXP2, NCAM1, ENO2, Nestin, TUBB3, НТТ и синаптического транспортера ГАМК GAT1. Использование клеточных культур человека позволяет получить белково-пептидную композицию, в которую будут включены не только небольшие пептиды, но и полноразмерные белковые нейрональные ростовые и дифференцировочные факторы. Эффективность действия таких факторов заведомо выше, чем у коротких пептидов, а иммуногенность отсутствует. Использование ИПСК в качестве источника получения белково-пептидной композиции позволяет решить проблему дефицита донорского материала и этические вопросы, возникающие при применении для аналогичных целей эмбрионального материала и культур эмбриональных стволовых клеток человека. 4 пр., 3 ил.
Изобретение относится к способу получения белково-пептидной композиции с ноотропными свойствами и включает в себя: забор биоптата кожи, получение культуры фибробластов, криоконсервацию культуры фибробластов, размораживание культуры фибробластов, репрограммирование фибробластов для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК), культивирование ИПСК, криоконсервацию ИПСК, размораживание ИПСК, нейрональную дифференцировку ИПСК, получение белково-пептидного комплекса. Получение белково-пептидного комплекса таким способом позволяет избежать иммунологических конфликтов, развитие которых возможно при использовании пептидных композиций ксеногенного происхождения, полученных из тканей мозга свиней, овец и других животных. Кроме того, использование клеточных культур человека позволит получить белково-пептидную композицию, содержащую белки и пептиды с молекулярной массой до 100 кДа, в которую будут включены не только небольшие пептиды, но и полноразмерные белковые нейрональные ростовые и дифференцировочные факторы. Эффективность действия таких факторов заведомо выше, чем у коротких пептидов, а иммуногенность отсутствует. Использование ИПСК в качестве источника получения белково-пептидной композиции позволяет решить проблему дефицита донорского материала и этические вопросы, возникающие при применении для аналогичных целей эмбрионального материала и культур эмбриональных стволовых клеток человека. 3 ил., 4 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к способу получения инъекционного резорбируемого имплантата для лечения легких форм стрессового недержания мочи и недостаточности собственно соединительной ткани на основе поликапролактона и мультипотентных стромальных клеток пупочного канатика. Способ получения характеризуется тем, что поликапролактон подвергают монолитизации с помощью сверхкритичной флюидной технологии, проводят измельчение монолита поликапролактона и отбирают фракции 100-150 мкм, получают клеточную культуру мультипотентных стромальных клеток человека, соединяют клеточный и матричный компоненты конструкции, переносят поликапролактоновые частицы с адгезированными на них клетками, переносят поликапролактоновые частицы в среду введения и получают имплантат из частиц поликапролактона размером 100-150 мкм в среде введения, состоящей из гипромеллозы, либо карбоксиметилцеллюлозы, либо гиалуроната натрия, либо поливинилпирролидона, либо глицерола, либо их комбинации. Осуществление изобретения позволяет получить биорезорбируемый имплантат для восстановления объема и плотности соединительной ткани стенки органа, обладающего высокой биосовместимостью. 2 н.п. ф-лы, 2 пр., 13 ил.
Изобретение относится к регенеративной медицине и тканевой инженерии. Описан биорезорбируемый сетчатый имплантат на основе алифатических полимерных эфиров и мультипотентных стромальных клеток для пластики стенок малого таза и брюшной полости, состоящий из а) высокопористого матрикса-носителя на основе монофиламентных нитей полидиоксанона, б) клеточной культуры мультипотентных стромальных клеток человека, в) импрегнированного в объем резорбируемой полимерной сетки фибринового геля. Описан способ его получения. На экспериментальной модели подкожной трансплантации биорезорбируемого сетчатого имплантата достигается высокая эффективность замещения собственной соединительной тканью, достаточное время резорбции, минимальное количество побочных эффектов. 2 н.п. ф-лы, 9 ил., 4 пр.
Изобретение относится к криобиологии и медицине. Для получения мультипотентных стромальных клеток (МСК) из криозамороженных тканей фетоплацентарного комплекса (пуповины, плодной части плаценты, амниона) пуповину и плаценту, полученные в ходе операции кесарева сечения, в течение не более 24 часов транспортируют в культуральную лабораторию, где их нарезают на фрагменты толщиной не более 10 мм и выдерживают в течение 20-25 минут в криопротекторной среде на основе аутоплазмы, полученной из пуповинной крови, либо фосфатно-солевого буфера рН=7,4, дополненного тестированным человеческим альбумином до 15 г/л, содержащей 1,5 моль/л пропандиола и 0,1 моль/л сахарозы. Далее фрагменты ткани подвергают постепенному охлаждению: понижение стартовой комнатной температуры до +4°C со скоростью 10°C/мин, охлаждение до -6°C со скоростью 2°C/мин, инициацию кристаллизации при -6°C, выполнение пошагового охлаждения до температуры -30°C со скоростью 0,3°C/мин, погружение в жидкую фазу азота с температурой -196°C для длительного криохранения. Для размораживания пробирки помещают на водяную баню, нагретую до +37°C, после чего отмывают от криопротектора нагретой до +37°C полной культуральной средой, не содержащей ксеногенных компонентов. Затем из фрагментов пупочного канатика удаляют эпителий и кровеносные сосуды, из фрагментов плаценты удаляют ворсины хориона и хорионический трофобласт, из фрагментов амниона удаляют амниотический эпителий, а оставшуюся ткань (вартонов студень пупочного канатика, строму плодной части плаценты и строму амниона) измельчают с помощью хирургических инструментов в небольшом объеме культуральной среды до получения эксплантов объемом 1-2 мм3, которые переносят в культуральную посуду и получают первичную культуру клеток. Дальнейшее наращивание и характеристику МСК проводят с использованием стандартных культуральных методик. Изобретение позволяет получить культуры МСК из криозамороженных тканей фетоплацентарного комплекса за счет сохранения жизнеспособности клеточного компонента стромы при криоконсервировании ткани без использования ксеногенных и токсичных компонентов сред. 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине и представляет собой биотрансплантат на основе высокопористого керамического материала системы оксид циркония - оксид алюминия и мультипотентных стромальных клеток костного мозга человека для восстановления протяженных дефектов костной ткани, характеризующийся тем, что содержит аутологичные или донорские мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК) из костного мозга и носитель, созданный на основе высокопористого керамического материала системы оксид циркония - оксид алюминия по технологии дублирования пенополиуретановой основы, при этом носитель плотно засевают ММСК, культивированными от 1 до 3-х пассажей, при этом на одном носителе иммобилизовано от 200 до 500 тысяч клеток, витальность которых составляет не менее 90%, а функциональная направленность подтверждается способностью к направленной дифференцировке в мезодермальные линии и демонстрируется экспрессия стромальных маркеров CD90 и CD 105 у 60-90% клеток и отсутствие экспрессии маркера CD34
Изобретение относится к медицине, в частности к приготовлению генетически немодифицированных клеточных культур фибробластов, мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток, мононуклеаров костного мозга и получению комбинированного трансплантата с матрицей-носителем
Изобретение относится к области медицины, биологии, а именно к экспериментальной биологии, и может быть использовано для изучения механизмов дегенерации и регенерации межпозвонковых дисков
Изобретение относится к области биофармакологии и касается приготовления биотранспланта, содержащего пластик неадгезивные клетки костного мозга, варианты их преддифференцировки в эндотелиальном и кардиомиоцитарном направлении, и способа лечения хронической сердечной недостаточности
Изобретение относится к медицине, биофармакологии и касается получения биотрансплантата на основе комбинации малодифференцированных (мультипотетных, камбиальных, стволовых) клеток человека и матрицы-носителя для повышения регенераторных и репаративных свойств хрящевой и соединительной ткани при травматических и дегенеративных заболеваниях суставного хряща
Изобретение относится к биофармакологии и медицине и касается биотрансплантата для лечения хронической сердечной недостаточности, который характеризуется тем, что он содержит мезенхимальные стволовые клетки, миобласты, клетки - предшественники эндотелия
Изобретение относится к биофармакологии и медицине и касается получения культуры генетически немодифицированных мезенхимальных стволовых клеток и способа лечения аутоиммунных и ревматических заболеваний
Изобретение относится к биофармакологии, в частности, касается получения культуры генетически немодифицированных мезенхимальных стволовых клеток, миобластов и фибробластов и способа лечения хронической ишемии нижних конечностей и осложнений данного заболевания
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и биотехнологии
Изобретение относится к медицине и биофармакологии
БИОТРАНСПЛАНТАТ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ КОСМЕТИЧЕСКИХ ДЕФЕКТОВ КОЖИ (ВАРИАНТЫ) // 2271818
Изобретение относится к медицине и биофармакологии
Изобретение относится к медицине и биофармакологии
БИОТРАНСПЛАНТАТ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ (ВАРИАНТЫ) И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ДИЛЯТАЦИОННОЙ КАРДИОМИОПАТИИ // 2268062
Изобретение относится к области биофармакологии и касается биотрансплантата для лечения дилятационной кардиомиопатии, содержащий мезенхимальные стволовые клетки (МСК), полученные из фетального или донорского материала, при этом ткань дезагрегируют, далее культивируют в виде прикрепленных колоний в ростовой среде, содержащей эмбриональную телячью сыворотку и глутамин, затем неоднократно пассируют в низкой плотности с изменением состава среды, а культивирование ведут избегая накопления в культуре клеток зрелой стромы, в качестве фетального материала используют ткани на сроках гестации: печень 5-8 недель, тимус 18-20 недель, костный мозг 17-20 недель, подкожная жировая ткань 17-19 недель, в качестве донорского материала используют костный мозг, подкожную жировую ткань, тимус (у детей 6 лет), которые забирают у пациента для последующей аутотрансплантации и аллотрансплантации, а также способ его получения
БИОТРАНСПЛАНТАТ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ (ВАРИАНТЫ) И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА // 2268061
Изобретение относится к области биофармакологии и медицины и касается биотрансплантатов и способов лечения ишемической болезни сердца, содержащий мезенхимальные стволовые клетки (МСК), полученные из фетального или донорского материала или из ткани скелетных мышц фетусов человека 1-2 триместра беременности
