Патенты автора Лящук Александр Михайлович (RU)
Рекомбинантный белок GBO-ActRIIB для увеличения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы // 2792817
Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и может использоваться для увеличения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы. Описан иммунологически активный рекомбинантный белок GBD-ActRIIB, содержащий фрагмент рецептора ActRIIB (активиновый рецептор II типа В) и глюкансвязывающий домен (GBD). Разработан способ получения рекомбинантного белка GBD-ActRIIB в составе клеточных экстрактов штамма Escherichia coli BL21, включающий связывание белка с альфа-глюкансодержащим сорбентом за счет аффинного взаимодействия, последующую отмывку от несвязавшихся бактериальных белков и выделение целевого продукта. Получен инъекционный препарат на основе рекомбинантного белка GBD-ActRIIB, суспендированного в среде из альфа-глюкансодержащего сорбента, в приемлемом для инъекционного использования жидком адъюванте. Разработан способ использования этого препарата, включающий проведение подкожных или внутримышечных инъекций двукратно с интервалом 20 дней в дозе 5-100 мкг рекомбинантного белка GBD-ActRIIB на один килограмм массы тела животного или птицы. Технический результат заключается в создании рекомбинантного белка GBD-ActRIIB, легко поддающегося очистке и обладающего достаточной иммуногенностью в отношении ActRIIB, а также создание инъекционного препарата, содержащего иммунологически активный рекомбинантный белок GBD-ActRIIB, и его способа применения. 4 н. и 2 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 пр.
Рекомбинантный белок нуклеазы бактерий Serratia marcescens для гидролиза нуклеиновых кислот // 2787186
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению ферментов в Е. coli, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка нуклеазы Serratia marcescens. Рекомбинантный белок нуклеазы S. marcescens с молекулярной массой 27 кДа и SEQ ID NO: 2 получают рекомбинантным путем в Е. coli, экспрессирующих ген нуклеазы S. marcescens без сигнальной последовательности, в неактивной, нетоксичной и нерастворимой форме - в виде телец включения внутри бактериальных клеток, с последующим разрушением созданных клеток продуцентов, выделением, отмывкой телец включения от белков Е. coli для получения конечного продукта, восстановлением полученной нуклеазы Serratia marcescens до нативной конформации и очисткой. Изобретение обеспечивает высокий уровень биосинтеза нуклеазы, пригодной для гидролиза нуклеиновых кислот, и позволяет сократить время технологического цикла очистки нуклеазы при увеличении выхода целевого белка. 6 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению ферментов в Е. coli, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка нуклеазы Serratia marcescens. Способ включает получение олигонуклеотидного дуплекса, кодирующего соответствующий ген SEQ ID NO: 2 S. marcescens, оптимизированного для экспрессии в Е. coli; создание плазмиды, содержащей последовательность гена SEQ ID NO: 2 нуклеазы S. marcescens, и получение штамма продуцента; выращивание клеток продуцентов штамма Е. coli, экспрессирующих ген нуклеазы S. marcescens без сигнальной последовательности, в неактивной, нетоксичной и нерастворимой форме - в виде телец включения внутри бактериальных клеток; разрушение созданных клеток продуцентов, выделение, отмывку телец включения от штаммовых белков для получения конечного продукта; последующее восстановление полученной нуклеазы Serratia marcescens до нативной конформации и очистку. Изобретение обеспечивает высокий уровень биосинтеза нуклеазы в Е. coli, позволяет сократить время технологического цикла очистки нуклеазы при увеличении выхода целевого белка. 6 пр.
Изобретение относится к биотехнологии. Представлена иммуногенная композиция, включающая (i) прайм-компонент, состоящий из рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц: частиц, несущих ген tul4 Francisella tularensis с последовательностью SEQ ID NO 1, частиц, несущих ген fopA Francisella tularensis с последовательностью SEQ ID NO 3, и частиц, несущих ген dnaK Francisella tularensis с последовательностью SEQ ID NO 5, при этом указанные гены оптимизированы для экспрессии в эукариотических клетках, и/или (ii) бустерный компонент, включающий рекомбинантные белки: белок DBD-Tul4 с последовательностью SEQ ID NO 16, молекулярной массой 30,0 кДа, содержащий декстрансвязывающий домен декстрансукразы из L. citreum КМ20, представленный аминокислотными остатками 1-140 SEQ ID NO 16, Gly-Ser спейсер, представленный остатками 141-150 SEQ ID NO 16, и последовательность белка Tul4 Francisella tularensis, представленную остатками 151-282 SEQ ID NO 16; белок 6-His-FopA с последовательностью SEQ ID NO 18, молекулярной массой 40,5 кДа; белок DnaK-6His с последовательностью SEQ ID NO 20, молекулярной массой 70,4 кДа, а также содержащая фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель и способ ее получения. Изобретение позволяет получить стабильный и устойчивый иммунный ответ на Francisella tularensis. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 21 ил., 1 табл., 9 пр.
Изобретение относится к биотехнологии, генной инженерии, биохимии, медицине, ветеринарии. Получают синтетическую последовательность ДНК, соответствующую гену, кодирующему белковую последовательность гепаринсвязывающего домена (HBD) из Danio rerio, слитую с последовательностью эритропоэтина (Еро) человека (белок HBD-Epo), спланированную таким образом, чтобы нуклеотидный состав кодонов был оптимизирован для гетерологичной экспрессии в непатогенном лабораторном штамме Е. coli. Этот синтетический ген HBD-Epo фланкируют на 5'-конце сайтом NcoI, а на 3'-конце - сайтом Kpn2I и встраивают в плазмиду pQE6 по сайтам NcoI и Kpn2I. На его основе получают рекомбинантную плазмиду pL610, содержащую искусственный бактериальный оперон рекомбинантного белка HBD-Epo, включающий промоторную область раннего промотора бактериофага Т5, ген рекомбинантного белка HBD-Epo, терминатор транскрипции; бактериальный оперон бета-лактамазы; бактериальный участок инициации репликации типа ColE1, кодирующую рекомбинантный белок HBD-Epo и обеспечивающую его синтез в штаммах Е. coli. Изобретение также включает способ очистки белка HBD-Epo методом ионообменной хроматографии. Изобретение относится к самому рекомбинантному белку HBD-Epo, экспрессионному вектору pL610 и композиции (деминерализованному костному матриксу (ДКМ), содержащему белок HBD-Epo, а также ДКМ, содержащему белок HBD-Epo и ВМР-2), направленной на стимулирование остеогенеза. Изобретение позволяет получать устойчивый очищенный активный белок HBD-Epo, а также HBD-Epo, иммобилизированный на ДКМ, в том числе на ДКМ с костным морфогенетическим белком ВМР-2. Изобретение, кроме того, включает способ специфической индукции регенерации костной ткани, заключающийся в заполнении дефектов костной ткани композицией, состоящей из HBD-Epo, иммобилизированного на ДКМ, в том числе на ДКМ с костным морфогенетическим белком ВМР-2. 6 н. и 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 5 пр.
Изобретение относится к генной инженерии, биохимии, биотехнологии и иммунологии. Описано получение синтетических генов D3S, D3E и D3D, оптимизированных для гетерологичной экспрессии в непатогенных лабораторных штаммах Escherichia coli. Указанные гены кодируют рецептор-связывающие домены III белка Ε оболочки вируса клещевого энцефалита (ВКЭ). На основе генов D3S, D3E и D3D получают рекомбинантные плазмиды pDBD2-D3S, pDBD2-D3E и pDBD2-D3D, которые кодируют бифункциональные рекомбинантные белки, различающиеся по аминокислотному составу в позициях 166, 170, 184, 211 и определяющие принадлежность к трем основным генетическим типам вируса. Изобретение также включает штаммы-продуценты химерных белков Е. coli M15 [pREP4, pDBD2-D3S], Ε. coli M15 [pREP4, pDBD2-D3E] и Ε. coli M15 [pREP4, pDBD2-D3D], а также способ иммобилизации, концентрирования и очистки полученных белков на декстрансодержащем сорбенте. Изобретение относится к рекомбинантным белкам DBD2-D3S, DBD2-D3E и DBD2-D3D, предназначенным для использования в качестве антигенов, иммобилизованных в лунках 96-луночного планшета или стрипах, в составе набора диагностических маркеров для выявления антител к ВКЭ в сыворотке крови и ликворе человека методом ИФА, а также к иммуногенной композиции, содержащей иммобилизованные на декстране рекомбинантные белки и направленной на специфическую активацию иммунитета и формирование иммунологической памяти в отношении вируса. Изобретение позволяет получать штаммы-продуценты, обеспечивающие высокий уровень продукции рекомбинантных белковых антигенов DBD2-D3S, DBD2-D3E и DBD2-D3D, с целью последующего использования для иммунопрофилактики ВКЭ, дифференциальной диагностики флавивирусных инфекций и оценки напряженности иммунитета. 7 н. и 7 з.п. ф-лы, 7 ил.
Группа изобретений относится к генной инженерии, биохимии, биотехнологии и иммунологии. Представлена рекомбинантная плазмида pCFP10-DBD, состоящая из искусственного бактериального оперона химерного белка, включающего промоторную область раннего промотора бактериофага Т5, ген химерного белка, состоящий из последовательности белкового антигена CFP10 из Mycobacterium tuberculosis, слитой с последовательностью декстрансвязывающего домена (DBD) декстрансукразы Leuconostoc citreum KM20, и терминатор транскрипции, бактериального оперона бета-лактамазы и бактериального участка инициации репликации типа ColE1. Также представлен штамм Escherichia coli - продуцента химерного белка CFP10-DBD. Описан способ иммобилизации, концентрирования и очистки полученного белка на целлюлозе. Описана иммуногенная композиция, содержащая рекомбинантный белок CFP10-DBD, направленная на индукцию иммунитета против туберкулезной инфекции. Изобретение расширяет арсенал средств, используемых для лечения туберкулеза. 4 н.п. ф-лы, 6 ил., 1 табл., 4 пр.
Группа изобретений относится к генной инженерии, биохимии, биотехнологии и иммунологии и представляет собой рекомбинантную плазмиду pESAT6-CFP10-DBD, рекомбинантный штамм Escherichia coli M15 [pREP4, pESAT6-CFP10-DBD], способ получения, иммобилизации, концентрирования и очистки рекомбинантного белка ESAT6-CFP10-DBD на декстране, рекомбинантный белок ESAT6-CFP10-DBD с молекулярной массой 26,4 кДа, иммуногенную композицию, содержащую белок ESAT6-CFP10-DBD, иммобилизованный на декстране, специфически активирующую Т-лимфоциты, синтезирующие ИФН-гамма при стимуляции антигенами микобактерий. Изобретение позволяет получить высокий уровень экспрессии белка, который эффективно индуцирует иммунный ответ на антиген микобактерий. 5 н.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к биохимии и биотехнологии и представляет собой рекомбинантную плазмиду pESAT6-DBD, состоящую из искусственного бактериального оперона химерного белка, включающего промоторную область раннего промотора бактериофага Т5, гена химерного белка, состоящего из последовательности белкового антигена ESAT6 из Mycobacterium tuberculosis, слитого с последовательностью декстрансвязывающего домена (DBD) декстрансукразы Leuconostoc citreum KM20 и терминатора транскрипции; бактериального оперона бета-лактамазы и бактериального участка инициации репликации типа ColEl. Изобретение также включает штамм Escherichia coli - продуцент химерного белка ESAT6-DBD, а также способ иммобилизации, концентрирования и очистки полученного белка на декстране. Кроме того, изобретение относится к самому рекомбинантному белку ESAT6-DBD и иммуногенной композиции, содержащей его, направленной на индукцию иммунитета против туберкулезной инфекции. Изобретение позволяет получать штамм-продуцент, обеспечивающий высокий уровень продукции устойчивых иммуногенных белков, которые могут быть получены, иммобилизованы и очищены в одну стадию, а также получать эффективные иммуногенные композиции против туберкулеза. 5 н.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к биохимии и биотехнологии и представляет собой штамм Escherichia coli M15 [pREP4, pAg85A-DBD] - продуцент химерного белка Ag85A-DBD, а также способ иммобилизации, концентрирования и очистки полученного белка на декстране. Изобретение относится к способу получения иммуногенной композиции на основе рекомбинантного белка Ag85A-DBD в смеси с декстраном, самому рекомбинантному белку Ag85A-DBD. Изобретение позволяет получать штамм-продуцент, обеспечивающий высокий уровень продукции устойчивых иммуногенных белков, которые могут быть получены, иммобилизованы и очищены в одну стадию, а также получать эффективные иммуногенные композиции против туберкулеза. 4 н.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой рекомбинантную плазмиду BMPRIB-CBD, штамм E.coli, трансформированный данной плазмидой. Изобретение относится также к рекомбинантному белку BMPRIB-CBD, с использованием которого получают белок BMP-7. Изобретение позволяет получить хроматографически чистые фракции биологически активной димерной формы белка BMP-7, которые могут быть использованы в качестве остеоиндуктивных компонентов костнопластических материалов нового поколения. 4 н.п. ф-лы, 2 ил., 6 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой рекомбинантную плазмиду BMPRIA-CBD, штамм E.coli, трансформированный данной плазмидой. Изобретение относится также к рекомбинантному белку BMPRIA-CBD, с использованием которого получают белок BMP-2. Изобретение позволяет получить хроматографически чистые фракции биологически активной димерной формы белка BMP-2, которые могут быть использованы в качестве остеоиндуктивных компонентов костно-пластических материалов нового поколения. 4 н.п. ф-лы, 2 ил., 6 пр.
Изобретение относится к генной инженерии, биохимии, биотехнологии и иммунологии
Изобретение относится к генной инженерии, биохимии, биотехнологии и иммунологии
Изобретение относится к генной инженерии, биохимии, биотехнологии и иммунологии
Изобретение относится к области биотехнологии, генной инженерии, микробиологии
