Патенты автора Грядунов Дмитрий Александрович (RU)
Настоящее изобретение относится к биотехнологии, микробиологии и медицине и представляет собой сконструированный плазмидный вектор, содержащий ген, кодирующий β-лактамазу расширенного спектра действия, способную гидролизовать пенициллины и цефалоспорины, и предназначенный для репликации в клетках Escherichia coli и Neisseria gonorrhoeae. Плазмида содержит плазмидную ДНК pblaTEM-135 N. gonorrhoeae, из которой вырезан фрагмент гена bla и заменен на аналогичный фрагмент гена bla с мутацией GGT→AGT, приводящей к замене глицина на серии в кодоне 238 (Gly238Ser), что позволяет экспрессировать β-лактамазу расширенного спектра действия ТЕМ-20, способную гидролизовать пенициллины и цефалоспорины. Изобретение также раскрывает способ конструирования плазмидного вектора. Настоящее изобретение позволяет получить плазмидный вектор для оценки устойчивости N. gonorrhoeae к β-лактамным антибиотикам, включая препараты выбора для лечения гонококковой инфекции - цефалоспорины III поколения. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ выявления аутоантител в сыворотке крови, характерных для аутоиммунного полигландулярного синдрома 1 типа (АПС-1). Способ предназначен для мультиплексного обнаружения специфичных для АПС-1 аутоантител. Способ включает обеспечение гидрогелевого биочипа с иммобилизованными аутоантигенами, взаимодействие образца сыворотки крови человека с элементами биочипа с образованием специфичных бинарных иммунных комплексов аутоантигенов, иммобилизованных в элементах биочипа, с аутоантителами, находящимися в образце сыворотки крови, детекцию образовавшихся комплексов с использованием флуоресцентно-меченных антивидовых антител против иммуноглобулинов человека класса G, регистрацию и интерпретацию результатов анализа на биочипе. 6 з.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл., 4 пр.
Изобретение относится к способу получения рекомбинантной CAS13A-нуклеазы, свободной от бактериальных эндотоксинов, пригодной для использования в системе CRISPR/Cas. Технический результат заключается в получении очищенного рекомбинантного белка Cas13a-нуклеазы с функциональной коллатеральной РНКазной активностью, технологически простым способом. 13 з.п. ф-лы, 5 ил.
Изобретение относится к области вирусологии и иммунологии. Предложен способ для мультиплексного обнаружения антител класса G против антигенов коронавируса SARS-CoV-2 и других вирусов семейства бета-коронавирусов, вирусов гриппа А и В, вирусов парагриппа II и III типов при одновременном выявлении прогностических аутоантител класса G против интерферонов I типа, ассоциированных с тяжелым течением коронавирусной инфекции COVID-19. Способ включает обеспечение биочипа с иммобилизованными вирусными белками и маркерами тяжести протекания коронавирусной инфекции, взаимодействие образца сыворотки крови с биочипом с образованием специфичных бинарных иммунных комплексов белков с находящимися в образце сыворотки крови антителами, детекцию образовавшихся иммунных комплексов, регистрацию и интерпретацию результатов анализа на биочипе. Изобретение обеспечивает одновременное дифференцирование коронавирусной инфекции от гриппа и других ОРВИ и выявление среди инфицированных COVID-19 пациентов носителей аутоантител к маркерам тяжести протекания коронавирусной инфекции. 6 з.п. ф-лы, 1 табл., 5 ил., 3 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ идентификации мутаций в гене пенициллинсвязывающего белка 2 penA возбудителя гонореи Neisseria gonorrhoeae, приводящих к устойчивости к бета-лактамным антибиотикам (пенициллины, цефалоспорины). Способ включает обеспечение биологического микрочипа с иммобилизованными олигонуклеотидными зондами, мультиплексную амплификацию фрагментов гена penА, гибридизацию амплифицированных флуоресцентно-меченных продуктов на биочипе, регистрацию и интерпретацию результатов гибридизации. 4 з.п. ф-лы, 2 пр., 3 табл., 6 ил.
Настоящее изобретение относится к средствам диагностики вирусных инфекций. Многопараметрическая диагностическая тест-система, предназначенная для одновременного дифференциального обнаружения путём иммунофлуоресцентного анализа вирусов следующих типов: вирусов гриппа А и В, циркулирующих преимущественно в человеческой популяции, аденовируса, респираторно-синцитиального вируса, вирусов парагриппа 2 и 3 типа, включает белковый чип для одновременного определения указанных вирусов в образце, содержащая антитела к вирусам гриппа А и В, аденовирусу, респираторно-синцитиальному вирусу, вирусам парагриппа 2 и 3 типа, в концентрации 250 мкг/мл каждого из указанных типов антител, лизирующий буферный раствор для пробоподготовки образцов, растворы для двухэтапной блокировки чипа, включающие раствор для первого этапа, представляющий собой 0,4% NaHB4, 20% этанол в ФСБ, и раствор для второго этапа, включающий 1% БСА в 20 мМ Na2HPO4, pH 8,5, используемый непосредственно перед анализом образца, при этом белковый чип представляет собой подложку с альдегидными группами или аминосилановую подложку, а антитела к вирусам гриппа А и В, аденовирусу, респираторно-синцитиальному вирусу, вирусам парагриппа 2 и 3 типа получали следующим образом: получение антитело-продуцирующих спленоцитов; накопление клеток мышиной миеломы; слияние антитело-продуцирующих спленоцитов с миеломными клетками; отбор гибридом; инокуляцию клеток гибридомы в брюшную полость праймированных пристаном мышей; накопление моноклональных антител в асцитах; очистку полученных моноклональных антител. Изобретение обеспечивает быстрое и точное определение типа вирусов. 3 з.п. ф-лы, 8 ил., 1 табл., 6 пр.
Изобретение относится к области биохимии, иммунологии и медицины, в частности к средствам диагностики острых респираторных вирусных инфекций. Раскрыт способ дифференциальной диагностики возбудителей респираторных вирусных инфекций, включающий: обработку лизирующим буферным раствором образца перед внесением в тест-систему; приготовление аналитической пробы — предварительное смешивание биологического образца и детектирующих моноклональных антител в конечной концентрации последних по 1 мкг/мл каждого; блокировку активных групп на подложке биочипа, представляющего собой белковый чип для одновременного определения в образце вируса гриппа А, вируса гриппа В Викторианской и Ямагатской линий, аденовируса, респираторно-синцитиального вируса, вирусов парагриппа 2 и 3 типов, содержащий моноклональные антитела к указанным вирусам, при этом белковый чип представляет собой подложку с активированными альдегидными группами или аминосилановую подложку, при этом блокировка проводится в два этапа; внесение и одностадийную инкубацию приготовленной аналитической пробы в биочипе; определение наличия вирусов в образце путём иммунофлуоресцентного анализа с установлением уровня флуоресценции. Изобретение обеспечивает упрощение процедуры анализа, сокращение времени постановки анализа, повышение чувствительности и специфичности метода одновременной детекции нескольких вирусов. 3 з.п. ф-лы, 12 ил., 1 табл., 7 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, биохимии, молекулярной биологии, микробиологии и медицине. Предложен ДНК-чип и набор для идентификации генетических детерминант резистентности микроорганизмов - возбудителей инфекций, приводящих к нарушению репродуктивных функций человека: Treponema pallidum, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealiticum, Atopobium vaginae, Enterococcus faecalis, Trichomonas vaginalis, Escherichia coli, Mobiluncus mulieris, Streptococcus anginosus, Fusobacterium nucleatum, Staphylococcus epidermidis, Bacteroides fragilis, к антимикробным препаратам, включающим антибиотики пенициллинового ряда, цефалоспорины, тетрациклины, фторхинолоны, макролиды, нитроимидазолы, спектиномицин. Изобретение может быть использовано в медицине для эффективной персонифицированной терапии заболеваний, клинической лабораторной диагностике, эпидемиологии. 2 н.п. ф-лы, 22 ил., 4 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области медицины, молекулярной биологии и микробиологии. Предложен способ определения генетических детерминант резистентности возбудителя туберкулеза к бедаквилину и линезолиду, включающий мультиплексную амплификацию генов Rv0678, atpE, 23S рРНК, rplC, обеспечение олигонуклеотидного микрочипа для установления наличия/отсутствия точечных мутаций, инсерций, делеций в указанных генах, гибридизацию амплифицированных флуоресцентно-меченных продуктов на олигонуклеотидном микрочипе и регистрацию результатов гибридизации. Изобретение позволяет установить наличие/отсутствие детерминант неизвестной заранее локализации в последовательности гена Rv0678, а также идентифицировать мутации в генах atpE, 23S рРНК, rplC, ассоциированных с устойчивостью к бедаквилину и линезолиду. 5 з.п. ф-лы, 9 ил., 3 табл., 8 пр.
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены олигонуклеотидный биочип для идентификации генетических детерминант резистентности N. gonorrhoeae к антимикробным препаратам, включающим фторхинолоны, антибиотики пенициллинового ряда, цефалоспорины, тетрациклины, макролиды, спектиномицин, а также набор олигонуклеотидов для иммобилизации на биочипе. Биочип представляет собой подложку с объединенными в группы элементами, содержащими 2 ячейки, не содержащие зондов, для вычисления фонового сигнала, 3 ячейки с иммобилизированным маркером для правильного позиционирования биочипа, а также ячейки с иммобилизованными олигонуклеотидами, устанавливающими принадлежность анализируемой ДНК к виду N. Gonorrhoeae, и олигонуклеотидами, обеспечивающими идентификацию генетических детерминант, ассоциированных с резистентностью возбудителя к антимикробным препаратам, причем олигонуклеотиды имеют последовательности SEQ ID NO: 1-43. Изобретения позволяют за короткое время точно определять генетические детерминанты резистентности N. gonorrhoeae к антибактериальным препаратам в клиническом материале. 2 н.п. ф-лы, 16 ил., 2 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области молекулярной биологии, микробиологии и медицины. Описан способ одновременной таргетной амплификации фрагментов геномов возбудителей инфекций органов репродукции человека, включающих Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealyticum, Atopobium vaginae, Enterococcus faecalis, Trichomonas vaginalis, Escherichia coli, Mobiluncus mulieris, Streptococcus anginosus, Fusobacterium nucleatum, Staphylococcus epidermidis, Bacteroides fragilis, Treponema pallidum, с целью одновременной идентификации возбудителей. Мультиплексная ПЦР проводится в едином реакционном объеме в два этапа с использованием по меньшей мере двух пар праймеров, последовательности которых комплементарны последовательностям сегментов гена 16S рРНК возбудителей. ПЦР включает два последовательных профиля амплификации, различающихся температурами отжига пар праймеров. Способ обладает устойчивостью к контаминации ПЦР-продуктами, высокой аналитической чувствительностью и существенно уменьшает время и трудоемкость анализа. Изобретение включает также набор праймеров для осуществления способа. 2 н.п. ф-лы, 16 ил., 1 табл., 1 пр.
Изобретение относится к области молекулярной биологии. Предложен способ автоматизированного выделения с одновременной очисткой нуклеиновых кислот из двух и более биологических образцов. Способ выделения с одновременной очисткой нуклеиновых кислот осуществляют в отдельном для каждого образца одноразовом модуле на вращающейся платформе. Причём выделение с одновременной очисткой нуклеиновых кислот включает стадию лизиса с использованием сухой реакционной смеси лизирующего буфера, содержащего лизоцим, стадию лизиса клеток, микроорганизмов и вирусных частиц с использованием сухой реакционной смеси лизирующего буфера, содержащего хаотропный агент, протеолитический фермент и детергент, добавление спирта к полученному лизату, связывание нуклеиновых кислот на твердофазном сорбенте, растворение сухой реакционной смеси промывочного буфера, отмывку нуклеиновых кислот от примесей, элюцию нуклеиновых кислот. Изобретение обеспечивает быстрое проведение с высоким выходом процедуры одновременного выделения и очистки нуклеиновых кислот двух или более биологических образцов, а также исключение контакта персонала с инфекционным образцом в процессе выделения нуклеиновых кислот. 8 з.п. ф-лы, 6 ил., 1 табл., 4 пр.
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу обнаружения ДНК возбудителя туберкулеза - микобактерий туберкулезного комплекса с одновременным установлением генотипа возбудителя и определением генетических детерминант устойчивости к широкому спектру противотуберкулезных препаратов, включая рифампицин, изониазид, фторхинолоны, канамицин, капреомицин, амикацин, этамбутол, в клиническом образце на дифференцирующем олигонуклеотидном микрочипе. Метод основан на мультиплексной ПЦР с одновременным флуоресцентным маркированием ПЦР-продуктов с последующей гибридизацией полученных продуктов на олигонуклеотидном микрочипе, содержащем набор специфичных дискриминирующих
олигонуклеотидов. Изобретение также касается олигонуклеотидного микрочипа, набора праймеров и набора олигонуклеотидных зондов, используемых при осуществлении способа. Изобретение позволяет проводить анализ ДНК, выделенной непосредственно из клинического образца, выявлять генотипы возбудителя туберкулеза, ассоциированные с повышенной вирулентностью и трансмиссивностью, обеспечивать персонифицированный выбор эффективных противотуберкулезных препаратов для каждого конкретного пациента, проводить эпидемиологическое генотипирование. 4 н. и 5 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл., 8 пр.
Изобретение относится к медицинской технике для создания аппаратов, реализующих оптимальную программу реверсивных тепловых воздействий на участке тела человека
Изобретение относится к молекулярной биологии, вирусологии и медицине
Изобретение относится к области молекулярной диагностики, молекулярной биологии, вирусологии и биоорганической химии
Изобретение относится к молекулярной биологии и медицине
Изобретение относится к области холодильной техники, в частности к способам и устройствам для тепловой обработки и для быстрого охлаждения партии полимерных контейнеров с донорской кровью, последовательно заполняемых при актах взятия у доноров (при донации), с целью осуществления ее последующей переработки и получения биологически высокополноценных компонентов, например свежезамороженной плазмы крови
Изобретение относится к молекулярной биологии и генной инженерии и предназначено для выявления типичных маркерных чужеродных последовательностей ДНК, используемых при модификации растений, в трансгенном растительном материале и продуктах на его основе
