Патенты автора Ильичев Александр Алексеевич (RU)
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к рекомбинантному плазмидному вектору, обеспечивающему экспрессию и секрецию моноклональных антител, и химерному моноклональному антителу M12B9ch. Описан рекомбинантный плазмидный вектор pVEAL-M12B9ch. Он обеспечивает стабильную экспрессию и секрецию химерного моноклонального антитела M12B9ch против ортопоксвирусов в клетках млекопитающих, имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2 размером 10399 п.н. Описано рекомбинантное химерное моноклональное scFv-Fc антитело M12B9ch против ортопоксвирусов в клетках млекопитающих, полученное с использованием рекомбинантного плазмидного вектора pVEAL-M12B9ch. Техническим результатом изобретения является получение химерного моноклонального scFv-Fc антитела, нейтрализующего вирус осповакцины с более высокой активностью. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и генетической инженерии. Создана плазмидная ДНК-матрица pVAX-RBD, имеющая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1 размером 3710 п.н., молекулярную массу 2.6×103 кДа, содержащая целевой ген, кодирующий химерный белок 176-RBD, перед которым находится промотор РНК-полимеразы фага Т7, обеспечивающий синтез in vitro мРНК-RBD с помощью РНК-полимеразы Т7. Молекула мРНК-RBD, имеющая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2, получена с использованием ДНК-матрицы pVAX-RBD, содержит открытую рамку считывания, кодирующую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, обеспечивающую синтез и секрецию белка-иммуногена RBD SARS-CoV 2 в организме млекопитающих, и содержащую гибридную сигнальную последовательность 176, консенсусную последовательность Козак, 7-метилгуанозиновый кэп на 5'-конце мРНК, полиаденозиновый (поли А) хвост на 3'-конце мРНК, длиной 150-200 нуклеотидов, и 5'- и 3'-нетранслируемые области (UTR) перед и после открытой рамки считывания. Комплекс в виде наночастиц, индуцирующих SARS-CoV-специфические антитела, обладающие вируснейтрализующей активностью, состоящих из молекул конъюгата полиглюкинхпермидин и молекул мРНК-RBD, взятых в разных зарядовых соотношениях от 1:1 до 1:30, соответствующих весовому соотношению от 1:3 до 1:90, имеющих размер в диапазоне 50-900 нанометров, причем каждая наночастица содержит ядро, состоящее из молекул мРНК-RBD и покрытое слоем конъюгата полиглюкинхпермидин, удерживаемого за счет ионного взаимодействия между отрицательно заряженным ядром и положительно заряженным спермидином. Техническим результатом является создание более эффективного средства доставки мРНК-RBD в клетки организма для синтеза в них белка RBD SARS-Cov-2 и повышение уровня секреции указанного белка из клеток для обеспечения презентации белка RBD иммунной системе организма. 3 н.п. ф-лы, 7 ил., 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к генной инженерии, биотехнологии и медицине. Описан интегративный плазмидный вектор pVEAL2-S-RBD, обеспечивающий экспрессию и секрецию белка RBD коронавируса SARS-CoV-2 в клетках млекопитающих, имеющий размер 9910 п.н., нуклеотидную последовательность SEQ ID No. 2 и содержащий элементы в соответствии с физической и генетической картой, представленной на Фиг. 1. Также создан рекомбинантный штамм клеточной линии яичника китайского хомячка СНО-K1-RBD - продуцент рекомбинантного белка RBD вируса SARS-CoV-2, содержащего интегративный плазмидный вектор pVEAL2-S-RBD по п. 1, имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2, обеспечивающий экспрессию и секрецию белка RBD коронавируса SARS-CoV-2 и депонированный под номером 322 в коллекции культур клеток ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора (справка о депонировании прилагается). Также получен рекомбинантный белок RBD коронавируса SARS-CoV-2, продуцируемый рекомбинантным штаммом клеток яичника китайского хомячка СНО-K1-RBD по п. 2 и имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3. Техническим результатом является повышение выхода целевого рекомбинантного белка RBD SARS-CoV-2. Изобретение может быть использовано для создания вакцин. 3 н.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и молекулярной биологии. Предложены искусственные гены, используемые для создания вакцины против вируса Эбола, кодирующие искусственный Т-клеточный белок-иммуноген EV.CTL и Т-клеточный белок-иммуноген EV.Th соответственно, со свойствами антигенов вируса Эбола, и имеющие последовательность SEQ ID NO: 3 длиной 1881 п.н. и SEQ ID NO: 4 длиной 1146 п.н., соответственно, содержащие на 5'-конце последовательность Козак (CCGCCACC) и сайт эндонуклеазы рестрикции XbaI и EcoRI соответственно, а на 3'-конце - три стоп-кодона (TGATGATAG) и сайт эндонуклеазы рестрикции ApaI, а также соответствующие рекомбинантные плазмиды и полиэпитопные белки-иммуногены. Изобретение может быть использовано в медицине. 6 н.п. ф-лы, 10 ил., 2 табл., 3 пр.
Группа изобретений относится к рекомбинантной плазмиде, обеспечивающей синтез химерного белка прохимозина В Bos Taurus, и рекомбинантному штамму Е. coli - продуценту химерного белка прохимозина В Bos taurus в клетках E. coli. Рекомбинантная плазмида рЕТ21а-ProChym размером 6504 пар оснований (п.о.) содержит следующие существенные для ее функционирования и экспрессии целевого белка структурные элементы: промотер бактериофага Т7, обеспечивающий эффективную транскрипцию контролируемой мРНК; рекомбинантный ген прохимозина В Bos taurus, кодирующий целевой химерный белок; Т7 терминатор, являющийся нетранслируемой областью терминации транскрипции бактериального оперона, обеспечивающей эффективное окончание транскрипции; последовательность экспрессионного тага Т7, добавленную в состав нуклеотидной последовательности гена прохимозина В Bos taurus на N-конец, для увеличения выхода целевого белка; последовательность blа, кодирующий белок бета-лактамазу, являющуюся селективным маркером для трансформации штаммов Е. coli; последовательность ColE1, обеспечивающий репликацию плазмиды в штаммах Е. coli. Рекомбинантный ген белка прохимозина В Bos taurus имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1 от нуклеотида в положении 5205 п.о. до нуклеотида в положении 6347 п.о., кодирующий целевой химерный белок прохимозин В Bos taurus с полной аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 2, встроенный по сайтам рестрикции FauND I и Sfr274 I в область полилинкера вектора рЕТ21а, содержащего промотор и терминатор РНК-полимеразы фага Т7. Предложенный рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3)pLysE рЕТ21а-ProChym получен трансформацией рекомбинантной плазмидой рЕT21a-ProChym и депонирован в Коллекции бактерий, бактериофагов и грибов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора под регистрационным номером В-1362. Группа изобретений обеспечивает высокую продукцию прохимозина. 2 н.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл., 6 пр.
Группа изобретений относится к области биотехнологии. Заявлен искусственный ген, кодирующий полиэпитопный белок-иммуноген MEL-TCI со свойствами антигенов меланомы, длиной 3428 п.н. Заявлена рекомбинантная плазмидная ДНК pMEL-TCI, обеспечивающая экспрессию указанного гена, имеющая размер 8845 п.н. и молекулярную массу 5.8×103 кДа. Заявлен искусственный белок-иммуноген MEL-TCI, содержащий CTL-эпитопы, рестриктированные множественными аллельными вариантами молекул HLA I класса (HLA-A*0101, A*0201, A*0301, A*1101, A*2402, A*6801, B*0702, B*0801, B*3501, B*1801, B*4402, B*2705), и Т-хелперные эпитопы антигенов меланомы (NY-ESO-1, MART1, MAGE-A1, MAGE-A3, MAGE-A11, MAGE-C1), рестриктированные множественными аллельными вариантами молекул HLA II класса. Группа изобретений позволяет получать искусственный полиэпитопный Т-клеточный белок-иммуноген, который за счет более оптимального подбора и размещения эпитопов обеспечивает индукцию CD8+ Т-лимфоцитов, обладающих улучшенной цитотоксической активностью в отношении клеток меланомы. 3 н.п. ф-лы, 9 ил., 2 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области медицины, биотехнологии и генной инженерии. Предложен рекомбинантный химерный полипептид-иммуноген, включающий консервативные Т- и В-клеточные эпитопы вируса ВИЧ-1 и последовательно расположенные пептидные фрагменты белков р24, gp41, gp120, узнаваемые широконейтрализующими антителами 10e8, 2F5, VRC01. Изобретение обеспечивает повышение ВИЧ-специфического иммунного ответа за счет включения в состав полипептида-иммуногена nTBI уникальных линейных имитаторов конформационных эпитопов, узнаваемых широконейтрализующими антителами. 6 ил., 5 пр.
Способ очистки нитчатого бактериофага М13 // 2610178
Изобретение касается способа очистки нитчатого бактериофага М13. Способ включает удаление бактериальной массы после наработки бактериофага путем первого и второго последовательного центрифугирования с последующей первой очисткой супернатанта бактериофага изоэлектрическим осаждением реагентом при pH 4,2, последующих третьего центрифугирования и ресуспендирования осадка с бактериофагом, а также повторной очисткой суспензии бактериофага изоэлектрическим осаждением реагентом при pH 4,2 и четвертого центрифугирования осадка с бактериофагом с получением готового продукта. Для изоэлектрического осаждения в качестве реагента используют натрий-ацетатный буфер со значением рН=4,2 в соотношении с супернатантом бактериофагов не менее 3:1 при первом изоэлектрическом осаждении, осадок с бактериофагами после третьего центрифугирования ресуспендировали в TBS-буфере, а при повторной очистке ресуспендированного бактериофага изоэлектрическим осаждением используют натрий-ацетатный буфер со значением рН=4,2 в соотношении с ресуспендированным бактериофагом не менее 1:1. Причем первое и второе центрифугирование проводят соответственно при 5000 об/мин и 12000 об/мин в течение 10 минут при 20°С, а третье и четвертое центрифугирование осуществляют при 10000 об/мин в течение 10 минут при 4°С. Изобретение обеспечивает более высокий уровень стерильности и чистоты бактериофага, особенно малых его количеств при более простой методике. 1 з.п. ф-лы, 7 табл., 9 пр.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к искусственным белкам-иммуногенам, имеющим свойства антигенов меланомы. Заявлен искусственный ген, кодирующий полиэпитопный белок-иммуноген MEL-TCI-A0201, содержащий множественные цитотоксические рестриктированные HLA-A*0201 и Т-хелперные эпитопы антигенов меланомы NY-ESO-1, MART1, MAGE-A1, MAGE-A3, MAGE-A11, MAGE-C1, имеющий последовательность длиной 1535 п.н., представленную на Фиг. 3. Также заявлены рекомбинантная плазмидная ДНК, содержащая указанный искусственный ген, и белок-иммуноген MEL-TCI-A0201 со свойствами антигенов меланомы. Изобретение позволяет повысить иммуногенность искусственного полиэпитопного Т-клеточного иммуногена, индуцирующего более высокий уровень ответа цитотоксических Т-лимфоцитов. 3 н.п. ф-лы, 11 ил., 3 табл., 2 пр.
СПОСОБ ГЕНЕРАЦИИ СПЕЦИФИЧЕСКОГО ИММУННОГО ОТВЕТА ПРОТИВ АНТИГЕНОВ ВИРУСА ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА // 2465324
Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу получения плазмидной ДНК из бактериальных клеток
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к медицине, иммунологии
Изобретение относится к биотехнологии и белковой инженерии
Изобретение относится к микробиологии, биотехнологии и медицине, а именно к созданию живых вакцин для ректального введения против вирусных инфекций на основе аттенуированных рекомбинантных штаммов сальмонелл, несущих протективные вирусные антигены
Изобретение относится к микробиологической и медицинской промышленности, генной и белковой инженерии
Изобретение относится к области биохимии и генной инженерии и может быть использовано в рыбоводстве
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии
ОПУХОЛЬ-АДРЕСОВАННЫЙ ПЕПТИД // 2273644
Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в медицине для лечения и диагностики аденокарциномы легкого и ее метастазов
