Патенты автора Лазарев Василий Николаевич (RU)
Изобретение относится к способу получения препаратов против SARS-CoV-2 на основе компонента зеленого чая эпигаллокатехин-3-галлата (EGCG). В серии экспериментов проведен подбор нецитотоксической концентрации EGCG, которую затем использовали в экспериментах с живым вирусом, которые показали, что EGCG является наиболее мощным профилактическим агентом, его основной мишенью является поверхностный белок SARS-CoV-2. Эти данные подтверждены подробным исследованием in vitro и in silico по связыванию EGCG с оригинальными и мутантными вирусными S белками. Полученные результаты свидетельствуют о том, что EGCG, приготовленный согласно формуле изобретения, особенно эффективен в предотвращении заражения мутантным SARS-CoV-2. 6 ил.
Изобретение относится к атомной промышленности и может применяться для дезактивации крупногабаритного емкостного оборудования, например, при подготовке к выводу из эксплуатации и в процессе вывода из эксплуатации ядерно- и радиационно-опасных объектов, на объектах использования атомной энергии. В способе дезактивации крупногабаритного емкостного оборудования ультразвуковые излучатели монтируют на стенки дезактивируемой емкости снаружи. Дезактивируемую емкость заполняют дезактивирующим раствором до необходимого уровня, колебания от ультразвуковых излучателей передаются на внутреннюю поверхность емкости и интенсифицируют процесс химической дезактивации и растворения отложений внутри емкости. Отработавший дезактивирующий раствор, вобравший в себя удаленные радиоактивные загрязнения, удаляют из обрабатываемой дезактивируемой емкости. Изобретение позволяет полностью или частично снизить радиационный фон и обеспечить возможность фрагментирования данного оборудования для последующей утилизации. 1 з.п. ф-лы, 4 ил.
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии. Описан новый высоковирулентный штамм вируса инфекционной бурсальной болезни (ИББ) серотипа 1, обладающий высокой биологической активностью в нативном виде, а также высокой антигенной и иммуногенной активностью после инактивации. Штамм депонирован в Государственной коллекции вирусов в НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России под № 2888. Штамм «DD1» вируса ИББ может быть использован для производства высокоиммуногенных инактивированных сорбированных и эмульгированных вакцин. 3 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области атомной техники. Способ локальной дезактивации металлических поверхностей с трудноудаляемыми радиоактивными загрязнениями включает анодную поляризацию очищаемых металлических поверхностей. Электрохимическую обработку осуществляют при плотности тока 0,1-10 А/дм2 с одновременным воздействием на радиоактивно загрязненную металлическую поверхность ультразвуковых колебаний в диапазоне частот 18-100 кГц интенсивностью 2-20 Вт/см2. Носителем электролита является композиционный материал, выполненный из сорбента, иммобилизованного между верхним и нижним влагопроницаемыми слоями и насыщенного дезактивирующим раствором. Нижний слой контактирует с очищаемой металлической поверхностью, а на верхний слой укладывают катод в виде пластины или сетки. Изобретение позволяет повысить эффективность и производительность электрохимической вневанной дезактивации металлических поверхностей с трудноудаляемыми радиоактивными загрязнениями. 2 з.п. ф-лы, 3 табл., 3 пр.
Изобретение относится к генной инженерии. Описан генотерапевтический ДНК-вектор на основе генотерапевтического ДНК-вектора VTvaf17, несущий целевой ген, выбранный из группы генов COL1A1, COL1A2, ВМР2, ВМР7, для повышения уровня экспрессии этого целевого гена в организме человека и животных, при этом генотерапевтический ДНК-вектор VTvaf17-COL1A1, или VTvaf17- COL1A2, или VTvaf17- ВМР2, или VTvaf17-ВМР7 имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID №1 или SEQ ID №2 или SEQ ID №3 или SEQ ID №4 соответственно. Каждый из созданных генотерапевтических ДНК-векторов: VTvaf17-COL1A1, или VTvaf17-COL1A2, или VTvaf17-ВМР2, или VTvaf17-ВМР7 за счет ограниченного размера векторной части VTvaf17, не превышающего 3200 п.н, обладает способностью эффективно проникать в клетки и экспрессировать клонированный в него целевой ген, выбранный из группы генов COL1A1, COL1A2, ВМР2, ВМР7. В составе генотерапевтического ДНК-вектора отсутствуют нуклеотидные последовательности вирусного происхождения и отсутствуют гены антибиотикорезистентности, обеспечивая возможность его безопасного применения для генетической терапии человека и животных. Создан также способ получения генотерапевтического ДНК-вектора на основе генотерапевтического ДНК-вектора VTvaf17, несущего целевой ген, выбранный из группы генов: COL1A1, COL1A2, ВМР2, ВМР7, который заключается в том, что каждый генотерапевтический ДНК-вектор: VTvaf17-COL1A1, или VTvaf17-COL1A2, или VTvaf17-ВМР2, или VTvaf17-ВМР7, получают следующим образом: кодирующую часть целевого гена из группы генов COL1A1, COL1A2, ВМР2, ВМР7 клонируют в ДНК-вектор VTvaf17 и получают генотерапевтический ДНК-вектор VTvaf17-COL1A1, SEQ ID №1, или VTvaf17-COL1A2, SEQ ID №2 или VTvaf17-BMP2, SEQ ID №3, или VTvaf17-BMP7, SEQ ID №4 соответственно. Способ применения созданного генотерапевтического ДНК-вектора на основе генотерапевтического ДНК-вектора VTvaf17, несущего целевой ген, выбранный из группы генов: COL1A1, COL1A2, ВМР2, ВМР7, для повышения уровня экспрессии этих целевых генов заключается во введении выбранного генотерапевтического ДНК-вектора или нескольких выбранных генотерапевтических ДНК-векторов в клетки, органы и ткани человека или животного, и/или во введении в органы и ткани человека или животного аутологичных клеток человека или животного, трансфицированных выбранным генотерапевтическим ДНК-вектором или несколькими выбранными генотерапевтическими ДНК-векторами, или в сочетании обозначенных способов. Представлен способ получения штамма Escherichia coli SCS110-AF/VTvaf17-COL1A1 или штамма Escherichia coli SCS110-AF/VTvaf17-COL1A2, или штамма Escherichia coli SCS110-AF/VTvaf17-BMP2, или штамма Escherichia coli SCS110-AF/VTvaf17-BMP7 заключается в электропорации компетентных клеток штамма Escherichia coli SCS110-AF созданным генотерапевтическим ДНК-вектором и последующей селекцией стабильных клонов штамма с использованием селективной среды. Представлен штамм Escherichia coli SCS110-AF/VTvaf17-COL1A1, или штамм Escherichia coli SCS110-AF/VTvaf17-COL1A2, или штамм Escherichia coli SCS110-AFA/Tvaf17-BMP2, или штамм Escherichia coli SCS110-AF/VTvaf17-BMP7, несущий генотерапевтический ДНК-вектор для его наработки с возможностью культивирования штамма без использования антибиотиков. Способ производства в промышленных масштабах генотерапевтического ДНК-вектора заключается в масштабировании бактериальной культуры штамма до количеств, необходимых для наращивания бактериальной биомассы в промышленном ферментере, после чего биомассу используют для выделения фракции, содержащей целевой ДНК-продукт - генотерапевтический ДНК-вектор VTvaf17-COL1A1, или VTvaf17-COL1A2, или VTvaf17-VTvaf17-BMP2, или VTvaf17-BMP7, многостадийно фильтруют и очищают хроматографическими методами. Изобретение может быть использовано в биотехнологии, медицине и сельском хозяйстве для создания препаратов генной терапии. 12 н. и 2 з.п. ф-лы, 14 ил., 19 пр.
Предложен способ получения рекомбинантного белка VP3 вируса инфекционной бурсальной болезни, включающий создание генно-инженерной конструкции. При этом используют клетки эмбриональной почки человека (линия Expi293F), трансфекцию которых проводят плазмидой pEG-VP3-His, содержащей вставку по сайтам рестрикции HindIII и BamHI нуклеотидной последовательности, кодирующей зрелый белок VP3 штамма DDI IBDV с 6-гистидиновым участком на С-конце и стоп-кодоном (нуклеотидная последовательность гена VP3-His - SEQ ID №1), под контролем немедленно-раннего промотера цитомегаловируса, а также содержащей ген, обеспечивающий устойчивость к неомицину и канамицину, под контролем промотера ранних генов вируса SV40. Отбирают клоны, растущие на селективном маркере G-418. Анализируют клоны на продукцию рекомбинантного VP3 с помощью вестерн-блоттинга с окраской моноклональными антителами на гистидиновый тэг. Переводят клетки целевого клона в суспензионную культуру, культивируют, затем получают цитоплазматическую фракцию клеток линии Expi293F/VP3-His. Рекомбинантный белок VP3 выделяют из указанной цитоплазматической фракции клеток с помощью аффинной хроматографии на колонке с сорбентом Ni-NTA-сефарозой, после чего проводят анализ антигенной активности выделенного рекомбинантного белка VP3. Изобретение обеспечивает получение стабильных линий клеток человека, продуцирующих правильно фолдированный и высокоиммуногенный белок VP3. 6 ил., 6 пр.
Изобретение относится к области биохимии и биотехнологии, в частности к рекомбинантной плазмидной ДНК pET15/N-Dest+. Указанная плазмидная ДНК предназначена для экспрессии в клетках Escherichia coli гена дестабилазы медицинской пиявки Hirudo medicinalis. Настоящее изобретение также относится к способу получения плазмидной ДНК pET15/N-Dest+ и к штамму Escherichia coli BL21(DE3)Gold/pET15/N-Dest+, полученному путем трансформации штамма Escherichia coli BL21(DE3)Gold плазмидой ДНК pET15/N-Dest+. Настоящий штамм является продуцентом рекомбинантной дестабилазы. Изобретение также относится к способу получения штамма Escherichia coli BL21(DE3)Gold/pET15/N-Dest+ и к способу получения рекомбинантной дестабилазы с использованием указанного штамма. Изобретение позволяет получить рекомбинантную дестабилазу с высоким выходом и чистотой. 5 н. и 5 з.п. ф-лы, 4 ил., 2 табл., 6 пр.
ШТАММ Escherichia coli BL21(DE3)Gold/pETmin-CypA - ПРОДУЦЕНТ РЕКОМБИНАНТНОГО ЦИКЛОФИЛИНА А ЧЕЛОВЕКА // 2557305
Изобретение относится к области биотехнологии и касается штамма Escherichia coli BL21(DE3)Gold/pETmin-CypA - продуцента рекомбинантного циклофилина А человека. Охарактеризованный штамм получен путем трансформации клеток штамма BL21(DE3)Gold плазмидой pETmin-CypA. Плазмида имеет размер 5865 пар нуклеотидов и содержит фрагмент XhoI-NdeI вектора рЕТ-22b(+), несущего ген устойчивости к ампициллину ampR, промотор и терминатор РНК-полимеразы фага Т7 и полилинкер. По сайтам XhoI-NdeI клонирован фрагмент, полученный с помощью ПЦР с использованием олигонуклеотидных праймеров 5′-TTATACATATGGTCAACCCGACCGTGTTCTTC и 5′-TTTCTCGAGTTATTCGAGTTGTCCACAGTCAGC плазмиды pCyPAwt/pGEX-2TK с клонированным фрагментом гена рчЦфА размером 498 п.н. Предложенный штамм высокопродуктивен, не требует сложной системы очистки и может быть использован в противоопухолевой терапии. 2 ил.
Изобретение относится к области генетической инженерии и биотехнологии. Предложен способ оценки биоактивности химических соединений, где на первой стадии проводят транзиентную трансфекцию клеток линии HEK 293 плазмидным вектором pX-Y-neo (X - любой транскрипционный фактор эукариот, Y - протеотипический пептид, соответствующий данному транскрипционному фактору), содержащим минимальный промотор аденовируса человека типа 5; ген зеленого флуоресцирующего белка; последовательность нуклеотидов, кодирующих сайт связывания транскрипционного фактора; последовательность нуклеотидов, кодирующих протеотипический пептид; ген устойчивости к неомицину, затем на второй стадии определяют активность транскрипционного фактора путем флуоресцентного анализа и хромато-масс-спектрометрического измерения содержания протеотипического пептида в трансфицированной культуре клеток в присутствии тестируемого вещества в сравнении с трансфицированной интактной культурой клеток. Изобретение позволяет быстро и с высокой чувствительностью оценить биоактивность химических соединений. 2 ил., 1 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ определения активности транскрипционных факторов. Изобретение может использоваться в фармакологии для первичного скрининга кандидатных соединений. Способ включает получение стабильно трансфицированных клеток линии HeLa путем введения в их хромосому плазмидного вектора pBI/neo/X (X - любой транскрипционный фактор эукариот), содержащего минимальный промотор цитомегаловируса человека, ген зеленого флуоресцирующего белка, последовательность нуклеотидов, кодирующих сайт связывания транскрипционного фактора, ген устойчивости к неомицину. Определяют активность транскрипционного фактора путем измерения интенсивности витальной флуоресценции полученной культуры клеток в присутствии тестируемого вещества в сравнении с интактной культурой клеток. Предложенное изобретение позволяет быстро и с высокой чувствительностью определять активность транскрипционных факторов эукариот. 2 ил., 1 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и молекулярной биологии, может быть использовано в фармацевтической промышленности и касается способов терапии внутриклеточных инфекций (хламидиозов)
Изобретение относится к области биотехнологии и молекулярной биологии
Изобретение относится к биотехнологии и генной инженерии, а именно к бактериальному сенсору для детекции изменения pH
СПОСОБ ОЧИСТКИ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ // 2297424
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способу очистки рекомбинантных белков из штаммов-продуцентов микроорганизмов, и может быть использовано в структурной протеомике, при рентгеноструктурном анализе белков с неизвестной функцией, антигенном картировании белков и создании вакцин на основе рекомбинантных белков
