Патенты автора МЕЛАРКОДЕ Рамакришнан (IN)

Настоящее изобретение относится к высокоспецифичному и селективному способу in vitro для выявления присутствия нейтрализующих антител против рекомбинантного человеческого инсулина (rHI) посредством анализа образца сыворотки. Предложенный способ включает стадии (а)-(в). На стадии (а) осуществляется предобработка образца сыворотки, включающая: кислотную диссоциацию и обработку углем, нейтрализацию и обработку полиэтиленгликолем (PEG), а также ресуспендирование осадка. На стадии (б) производят анализ на основе клеток, который включает посев клеток, имеющих рецептор рекомбинантного человеческого инсулина (rHI), голодание клеток в течение 18-22 ч в среде, не содержащей глюкозу, приведение в контакт популяции клеток с rHI и предобработанным образцом сыворотки, лизирование клеток и получение прозрачного лизата, а также оценку лизата в отношении фосфорилирования инсулинового рецептора. На стадии (в) производят выявление присутствия нейтрализующих антител против rHI посредством сравнения выявленного количества фосфорилирования с плавающей точкой деления, где плавающая точка деления представляет собой уровень ответа, где выявленное количество фосфорилирования, равное которому или ниже которого, показывает, что образец сыворотки содержит нейтрализующие антитела против rHI. Изобретение также относится к набору для предложенного способа, который содержит PEG 6000 (40%), приготовленный в PBS (фосфатно-солевой буферный раствор); уголь с декстраном (3%), приготовленный в PBS; поликлональное антитело против инсулина (PAb); 600 мМ ледяную уксусную кислоту (рН 2,5); 1 М буфер Tris (рН 9,5); фосфатно-солевой буферный раствор (PBS) и рекомбинантный человеческий инсулин. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 7 ил., 20 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области органической химии, в частности к способу очистки макролидов

 


Наверх