Патенты автора Черепахина Ирина Яковлевна (RU)
Предлагаемое изобретение относится к медицинской микробиологии и касается способа оценки адгезивных свойств холерных вибрионов. Представленный способ включает следующие стадии: а) проводят подготовку монослоя клеток HuTu-80 путем их выращивания в пластиковых флаконах объемом 50 мл, по 100-150 тыс. на 1 мл с последующим трипсинизированием культуры и внесением ее в пенфлаконы с дисками (диски 12,0 X 0,11 SPL Lifesciences) по 50 тыс. клеток в объеме 1 мл; б) готовят бактериальную суспензию штаммов Vibrio cholerae El Tor и Vibrio cholerae O139, которые выращивают на агаре Мартена (рН 7,7) в течение 18 часов, после этого петлей засевают в бульон LB (рН 7,7) и выдерживают в термостате при 37°С в течение трех часов; в) эксперимент проводят в пенфлаконах с дисками, на которых сформировался разреженный монослой HuTu-80, туда добавляют 10 мкл бактериальной суспензии и 1 мл среды DMEM с 5% сыворотки эмбриональной бычьей, до концентрации холерных вибрионов 106 м.к./мл, затем проводят инкубирование в течение 90 минут при 37°С, удаляют питательную среду, дважды промывают монослой раствором Хенкса рН 7,4, фиксируют 5% формалином 1 час, после этого высушивают и окрашивают диски по Романовскому - Гимза 1:5 в течение 40 минут; г) проводят по окрашенным дискам подсчет связанных бактериальных клеток, для этого диски промывают раствором Хенкса рН 7,4, достают из флаконов, высушивают, просматривают под микроскопом и определяют адгезивные свойства холерных вибрионов по числу вибрионов, связавшихся с 100 клетками HuTu-80, и рассчитывают индекс адгезии по формуле
И
А
=
∑
К
Б
100
К
,
где ИА - индекс адгезии, ∑КБ - суммарное количество клеток бактерий, прикрепившихся к одной клетке линии HuTu-80, 100К - 100 клеток линии HuTu-80, оценивают результаты по полученному количественному индексу адгезии, если он больше 20, делают вывод, что исследуемый штамм - высокоадгезивный, от 10 до 20 - среднеадгезивный штамм, меньше 10 - штамм низкоадгезивный. Изобретение может быть использовано в лабораторной диагностике для определения индекса адгезии холерных вибрионов Vibrio cholerae El Tor и Vibrio cholerae O139 (Бенгал). 1 табл., 1 пр.
Изобретение относится к медицинской микробиологии. Исследуемую культуру V. cholerae выращивают на агаре Мартена, готовят бактериальную суспензию 1х109 м.к./мл по стандарту мутности ОСО ГИСК им. Тарасевича, вносят в 2 емкости с питательной средой с последующим культивированием при 37°C. По специальной методике определяют показатели внеклеточного и внутриклеточного продуцирования кадаверина. Проводят исследование проб в системе капиллярного электрофореза Backman. Учет результатов ведут с помощью компьютерных электрофореграмм с получением показателей образцов в момент детекции кадаверина. По формуле определяют количество продуцируемого кадаверина в исследуемых пробах. Изобретение позволяет по количественной концентрации кадаверина оценивать потенциал холерных вибрионов в реализации их адаптивных функций и возможности выживать в различных средах. 1 ил., 3 табл. 3 пр.
Изобретение относится к области медицинской микробиологии и может быть использовано при проведении лабораторного контроля продовольствия на зараженность патогенными биологическими агентами в условиях чрезвычайных ситуаций
