Патенты автора Евсегнеев Сергей Иванович (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения карбоксипептидазы В из поджелудочной железы свиней предусматривает гомогенизацию животного сырья, автолиз, экстракцию двойным объемом буферного раствора, содержащим 0,01М КH2PO4 0.001 М ZnCl2 при температуре 65°С с получением экстракта. Проводят осаждение сульфатом аммония в заданном соотношении и центрифугируют. Осадок растворяют в 0,05М трис-НCl-буфере, содержащем 0,001 М ZnCl2, фильтруют через стекловолоконный и картонный фильтры при заданных параметрах температуры. Фильтрат разводят в 0,005 М трис-НCl-буфере, содержащим 0,001 М ZnCl2, с последующей ультрафильтрацией в тангенциальном потоке на мембранном кассетном модуле из полиэфирсульфона с пределом отсечения 20 кДа и двукратной ионообменной хроматографией на клонке с UNO Shhere. Уравновешенной 0,005 М трис-НCl-буфером, содержащим 0,01 NaCl и на колонке с Macro Prep Q, уравновешенной тем же буфером. Изобретение позволяет повысить выход фермента и его активность. 2 пр.
Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в биотехнологии при получении генно-инженерных продуктов
