Патенты автора Калабеков Исмаил Мусаевич (RU)

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии. Описан способ выявления геномной РНК вируса болезни Ибараки (ВБИ) с помощью ПЦР с детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени с использованием олигонуклеотидных праймеров и зонда, комплементарных участку 10 сегмента генома ВБИ, кодирующему неструктурные белки NS3 и NS3a. Способ с помощью ПЦР-РВ проводят при следующем температурном режиме: 1) 5 мин предварительной денатурации кДНК при 94°С; 2) 5 циклов реакции (денатурация при 94°С - 15 сек, отжиг праймеров при 62°С - 15 сек, элонгация при 72°С - 15 сек); 3) 35 циклов реакции с детекцией на стадии отжига праймеров (денатурация при 94°С - 15 сек, отжиг праймеров при 62°С - 15 сек, элонгация при 72°С - 20 сек). Учет результатов реакции проводят, анализируя кривые накопления флуоресцентного сигнала для каждой пробы. Представлен нуклеотидный состав указанных праймеров и зонда: IbarF 5'-GATCAAACCATTTTGCGCTT-3' IbarR5'-CTCATCCTCACCGCCTCATTG-3' IbarZ 5'-[HEX] TCTTGTATGGTCAATCCGCTGGCT [BH2J-3'. Изобретение позволяет сократить время проведения исследования, а также осуществлять не только качественный, но и количественный анализ содержания НК в образцах. 3 н.п. ф-лы, 4 табл., 6 пр.

 


Наверх