Изобретение относится к медицинской биотехнологии и может быть использовано для получения биомассы листерий. Питательная среда содержит гидролизат речной рыбы панкреатический, гидролизат отходов производства мясной воды панкреатический, ферментированный яичный желток, хлорид натрия, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий фосфорнокислый двузамещенный, витамин В1, глюкозу, агар микробиологический и дистиллированную воду при предлагаемом соотношении компонентов. Предлагаемая среда позволяет получать биомассу листерий с сохранением S-формы выращиваемой культуры в количестве, достаточном для приготовления антигена, предназначенного для иммунизации животных-продуцентов при производстве листериозной агглютинирующей сыворотки. 1 табл.