Патенты автора Высоцкий Евгений Степанович (RU)
Изобретение относится к областям молекулярной и клеточной биотехнологии и, в частности, к люциферазам. Мутантная копеподная люцифераза для применения в качестве биолюминесцентного репортера in vitro и in vivo имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO:1, 2, 3, и получена путем направленной молекулярной эволюции из MLuc7 изоформы люциферазы Metridia longa, отличается от природной аминокислотной последовательности наличием аминокислотных замен Y72W, I73L, G81E, G90A и D146V с нумерацией по SEQ ID NO:1. Полученная люцифераза характеризуется увеличенной активностью, температурным оптимумом реакции в области 31-38°С и повышенной стабильностью люминесцентного сигнала. 5 ил., 1 табл., 4 пр.
СПОСОБ ОДНОВРЕМЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДВУХ АНАЛИТОВ БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫМ МОЛЕКУЛЯРНЫМ МИКРОАНАЛИЗОМ // 2497128
Способ одновременного определения двух аналитов биолюминесцентным молекулярным микроанализом относится к биохимии, а именно к способам проведения иммуноферментного и ДНК гибридизационного анализа. Способ одновременного определения двух аналитов биолюминесцентным молекулярным микроанализом включает обработку твердой фазы биоспецифическим реагентом, отделение непрореагировавшей жидкой фазы, обработку твердой фазы ферментосодержащим конъюгатом, разделение жидкой и твердой фаз и анализ твердой фазы, в котором в качестве биоспецифического реагента для первой обработки твердой фазы используют два иммуноглобулина или один иммуноглобулин с двойной специфичностью или два олигонуклеотида, а конечную обработку твердой фазы проводят одновременно двумя ферментсодержащими конъюгатами, состоящими, соответственно, из рекомбинантных Cа2+ зависимых фотопротеинов обелинов с разными характеристиками биолюминесценции и молекул разной биоспецифичностью, где в качестве рекомбинантных обелинов используют обелин W92F; H22E и обелин Y138F, с последующим анализом на планшетном биолюминометре с быстро перемещающимися широкополостными светофильтрами с разделением сигналов и по спектру и по времени. 4 ил., 3 пр.
Изобретение относится к биохимии и представляет собой укороченную мутантную люциферазу MLM4 из Metridia longa размером ~16 кДа с улучшенными свойствами для использования в качестве генетически-кодируемого биолюминесцентного репортера для визуализации молекулярных процессов в живых клетках. Аминокислотные замены I69L, H74E, K125V, W139F введены в последовательность укороченной люциферазы MLM4 из Metridia longa размером ~16 кДа. Изобретение позволяет получить люциферазу с повышенной термостабильностью и со сдвигом спектра в длинноволновую область, что обуславливает общее увеличение чувствительности биолюминесцентного репортера при использовании в живых клетках и организмах. 4 ил., 1 табл, 3 пр.
Изобретение относится к биотехнологии
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой мутантный фотопротеин для определения внутриклеточного кальция одновременно в разных органеллах клетки, обладающий светоизлучающей функцией и характеризующийся аминокислотной последовательностью кальций-регулируемого фотопротеина дикого типа, в которой природные остатки фенилаланина, относящиеся к консервативным областям названной последовательности и соответствующие остатку 119 фотопротеина обелина Obelia longissima, а также остатку 88 обелина Obelia longissima заменены другими остатками, отличными от фенилаланина, замены которых приводят к тому, что чувствительность кальций-регулируемого фотопротеина к ионам кальция уменьшается по сравнению с фотопротеином дикого типа и изменяется длина волны испускаемого света по сравнению с фотопротеином дикого типа
СПОСОБ ОДНОВРЕМЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДВУХ АНАЛИТОВ БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫМ МОЛЕКУЛЯРНЫМ МИКРОАНАЛИЗОМ // 2373540
Изобретение относится к биохимии, а именно к способам проведения иммуноферментного и ДНК-гибридизационного анализа
