Патенты автора Гамалей Светлана Георгиевна (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Представленная вакцина содержит штамм VACΔ6 вируса осповакцины с шестью нарушенными генами вирулентности C3L, N1L, J2R, A35R, A56R, B8R и стабилизатор, включающий сахарозу, желатин, пептон из сои и натрия хлорид при следующем содержании указанных компонентов готовой формы препарата после лиофильной сушки, масс. %: пептон из сои - 30,3, сахароза - 30,3, желатин - 30,3, смесь лиофилизата рекомбинантного штамма VACΔ6 вируса осповакцины с титром около 107 ООЕ и натрия хлорида - 9,1. Способ получения вакцины включает заражение монослоя культуры клеток посевным материалом аттенуированного вируса осповакцины - рекомбинантного штамма VACΔ6 вируса осповакцины с шестью нарушенными генами вирулентности, инкубирование вируса в клеточном монослое в бессывороточной питательной среде при температуре 37°С до получения примерно 100% цитопатического эффекта, замораживание полученной вируссодержащей суспензии на стадии ее сбора и накопления, очистку и концентрирование полученной вирусной суспензии путем обработки ее ультразвуком и центрифугирования, введение в очищенную вируссодержащую суспензию стабилизирующего состава в виде водных растворов натрия хлорида, пептона из сои, сахарозы и желатина и лиофильную сушку полученной смеси указанных компонентов с получением вакцины в сухой форме. В качестве культуры клеток для наработки вируса используют перевиваемую культуру клеток 4647 почки африканской зеленой мартышки, а в качестве бессывороточной питательной среды используют питательную среду ДМЕМ, содержащую дополнительно 10 ед./мл бензоназы эндонуклеазы и 1,5 мM MgCl2. В очищенную вируссодержащую суспензию вводят стерильный инфузионный физиологический раствор NaCl и компоненты стабилизирующего состава из расчета 27,6 мл 25% водного раствора желатина, 27,6 мл 25% водного раствора пептона из сои, 13,7 мл 50% водного раствора сахарозы на 160 мл инфузионного физиологического раствора натрия хлорида с получением титра вируссодержащей суспензии не менее 5×107 БОЕ/мл при следующем содержании указанных компонентов вакцины перед лиофильной сушкой: пептон - 0,006 г/0,2 мл; сахароза - 0,006 г/0,2 мл; желатин - 0,006 г/0,2 мл; суспензия рекомбинантного штамма VACΔ6 вируса осповакцины с титром 108 ООЕ в инфузионном физиологическом растворе натрия хлорида - остальное до 0,2 мл. Способ применения вакцины, характеризующийся тем, что для вакцинации используют вакцину, полученную на основе рекомбинантного штамма VACΔ6 вируса осповакцины с шестью нарушенными генами вирулентности, которую приготавливают следующим образом: при однократной схеме вакцинации одну дозу сухого препарата с титром 107 ООЕ растворяют в 0,2 мл воды для инъекций или раствора натрия хлорида для инфузий и наполняют инсулиновый шприц в объеме 0,2 мл с титром 107 ООЕ, а при двукратной схеме вакцинации содержимое ампулы - 10 доз сухого препарата с титром 107 ООЕ - растворяют в 2,0 мл воды для инъекций или раствора натрия хлорида для инфузий и наполняют инсулиновый шприц в объеме 0,2 мл с титром 106 ООЕ. Препарат вводят при однократной вакцинации внутрикожно в дозе 1×107 ООЕ, а при двукратной вакцинации - внутрикожно в дозе 1×106 ООЕ с интервалом 28 дней. Техническим результатом изобретения является расширение номенклатуры живых высокоаттенуированных и безопасных вакцин против натуральной оспы и других ортопоксвирусных инфекций человека. 3 н.п. ф-лы, 6 ил., 8 табл., 6 пр.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для получения противоопухолевого средства против метастазов костей в виде конъюгата белка-цитокина и аминобисфосфоната. Для этого проводят реакцию конъюгации аминобисфосфоната и противоопухолевого компонента с использованием сшивающего агента. Затем отделяют продукт конъюгации от несвязавшихся компонентов реакционной смеси. При этом в качестве противоопухолевого компонента используют белок ФНО-альфа человека, в качестве аминобисфосфоната алендроновую кислоту, в качестве сшивающего агента используют глутаровый альдегид, или водорастворимый N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимид, или сульфосукцинимидил-4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилат (Sulfo-SCMM). Перед проведением реакции конъюгации алендроновую кислоту или белок ФНО-альфа предварительно адсорбируют на нерастворимом носителе гидроксилапатите. Компонент, адсорбированный на носителе, активируют сшивающим агентом с последующей отмывкой указанного агента. После образования конъюгата на носителе вначале элюируют несвязавшийся белок ФНО-альфа, а затем полученный конъюгат алендроновой кислоты с белком ФНО-альфа. Полученный конъюгат белка ФНО-альфа с алендроновой кислотой имеет стехиометрическое соотношение 1:1. Изобретение позволяет синтезировать конъюгат белка ФНО-альфа человека с алендроновой кислотой с контролируемой стехиометрией, который сохраняет противоопухолевую активность ФНО-альфа и направлен против опухолевых метастазов костной ткани. 3 з.п. ф-лы, 11 ил.,10 пр., 1 табл.
Изобретение относится к области медицины и биотехнологии и касается противоопухолевого средства на основе наночастиц, несущих рекомбинантный фактор некроза опухоли альфа человека
