Патенты автора Леонтьева Галина Федоровна (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Разработан способ количественной оценки содержания локальных антител в слюне с использованием в качестве антигена рекомбинантного S-белка SARS-CoV-2. Способ показал высокую результативность и позволяет повысить эффективность диагностики коронавирусной инфекции за счет определения вирус-специфических иммуноглобулинов в слюне. 4 ил., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области иммунологии, микробиологии и молекулярной генетики и может быть использовано в медицинской промышленности при производстве вакцин против вируса SARS-COV-2 и диагностикумов для его идентификации. Сущностью предлагаемого изобретения является создание рекомбинантной ДНК (обозначенной как cov1), полученной в результате полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием синтезированной ДНК, кодирующей S-белок коронавируса SARS-CoV-2, уникальных праймеров SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2 и рекомбинантной плазмиды pQE-cov1. Полученная с использованием экспрессионной плазмиды pQE-30 в клетках Е.coli M15 рекомбинантная ДНК cov1 кодирует уникальный рекомбинантный белок Cov1 молекулярной массы 24,5±0,5 кДа, который вызывает образование антител к белку S коронавируса SARS-CoV-2. В результате применения предлагаемого изобретения создана рекомбинантная плазмидная ДНК pQE-cov1, представляющая собой плазмидную ДНК pQE-30, несущую рекомбинантную ДНК cov1, и штамм-продуцент Е.coli M15-Cov1, позволяющий продуцировать рекомбинантный белок Cov1. 4 н.п. ф-лы, 7 ил., 5 пр.
Изобретение относится к области медицины, вирусологии, микробиологии, молекулярной генетики и биотехнологии и может быть использовано в медицинской промышленности при производстве живых вакцин для профилактики и лечения инфекций, вызванных вирусами гриппа. Создана живая вакцина на основе пробиотического биологически активного штамма Еnterococcus faecium L3 за счет включения в структуру его пилей фрагмента гена нейраминидазы вируса гриппа. В качестве вакцинного антигена использован один из двух поверхностных антигенов вакцинного вируса гриппа A17/утка/Потсдам/86/92(H5N2) - гликопротеин NA. Для оценки протективной эффективности полученной вакцины проводили пероральную вакцинацию мышей живой пробиотической вакциной и определяли специфические к нейраминидазе антитела в крови и вагинальных смывах мышей. Пероральное введение вакцины Еnterococcus faecium L3-NA стимулировало развитие специфического системного и местного иммунного ответа. На модели интраназальной летальной гриппозной инфекции у мышей было показано, что трехкратная пероральная вакцинация созданной живой пробиотической вакциной повышала защиту от летальной гриппозной инфекции. Конструирование живой вакцины на основе биологически активного пробиотического штамма Еnterococcus faecium L3 за счет включения в его пили антигена NA позволило объединить в одном препарате эффективность полезных свойств пробиотика и специфического антигенного стимула. Созданный вакцинный препарат проявил выраженный иммуногенный и протективный эффекты в отношении вируса гриппа, активируя все компоненты иммунной системы и вызывая сбалансированный прочный иммунный ответ. 6 ил., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, вирусологии, микробиологии, молекулярной генетики и биотехнологии и может быть использовано в медицинской промышленности при производстве живых вакцин для профилактики и лечения инфекций, вызванных вирусами гриппа. Разработана живая вакцина против вируса гриппа на основе биологически активного штамма Enterococcus faecium L3 за счет включения в структуру его пилей фрагмента гена, кодирующего консервативный участок молекулы гемагглютинина (LAH - long alpha helix from H1N1pdm09 virus) и четыре тандемных повтора эктодомена М2 белка вируса гриппа А. Задача решена путем введения единой ДНК, содержащей фрагменты гена LAH и гена М2е вируса гриппа, соединенных между собой гибким линкером, в хромосомную ДНК пробиотического штамма Enterococcus faecium L3 для экспрессии в пилях. Для получения необходимой конструкции lah+4m2e были взяты две плазмиды, одна из которых несла полноразмерный ген гемагглютинина (НА) штамма A/California/07/09 (H1N1), а другая - кассету из 4-х эпитопов М2е различной природы. В результате проведения нескольких последовательных ПЦР получен амплифицированный фрагмент ДНК, содержащий фрагменты lah и 4m2е, соединенные между собой гибким линкером. Клонирование амплифицированного фрагмента ДНК осуществляли с использованием плазмиды pJET1.2. В результате была получена плазмидная ДНК с нужной вставкой. Она была переклонирована из плазмиды pJET1.2 в суицидную плазмиду pT7ERMB с геном устойчивости к эритромицину. В результате клонирования была получена плазмида pentF-(lah+4m2e) с ожидаемой вставкой и геном устойчивости к эритромицину. В результате электропорации энтерококков созданной интегративной плазмидой pentF-(lah+4m2e) получен клон энтерококков, экспрессирующий ген LAH+4M2e белка, клон L3-(LAH+4M2e). Этот клон энтерококков выбран в качестве вакцинного препарата. Вакцинный препарат Enterococcus faecium L3-(LAH+4M2e) способен вызывать синтез анти-(LAH+4М2е) IgG антител, которые обладают протективными свойствами в отношении вируса гриппа. 2 н.п. ф-лы, 8 ил., 1 табл., 4 пр.
Изобретение относится к вирусологии. Описан комбинированный вакцинный штамм ИнфлюБакт-H7/PspA - реассортант, формула генома 6:2 которого соответствует требованиям, предъявляемым к штаммам живой гриппозной вакцины: гены, кодирующие поверхностные белки гемагглютинин (НА) и нейраминидазу (NA), принадлежат потенциально-пандемическому вирусу А/Ануи/1/2013 (H7N9), а гены, кодирующие внутренние белки (РВ2, РВ1, PA, NP, М, NS), принадлежат донору аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2), полученному методом обратной генетики. При этом ген, кодирующий поверхностный белок НА, модифицирован: после сигнального пептида в ген встроен фрагмент бактериального гена PspA (160-262 а.о. gb|EHD89266.1| pneumococcal surface protein A [Streptococcus pneumoniae]). Изобретение может быть использовано в практическом здравоохранении для профилактики заболеваемости гриппом и пневмонии, вызванной Streptococcus pneumoniae. Комбинированный вакцинный штамм ИнфлюБакт-Н7/PspA активно размножается в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре 32°С, характеризуется температурочувствительностью, холодоадаптированностью и безвредностью для лабораторных животных. Обладает высокой генетической стабильностью и иммуногенен как против вируса гриппа, так и против пневмококка. 4 ил., 10 табл.
Изобретение относится к области медицины, вирусологии, микробиологии, молекулярной генетики и биотехнологии. Представлена живая вакцина Enterococcus faecium L3-pentF-covid-19, содержащая клон энтерококков COVID 19+ с введенным в его геном участком ДНК SEQ ID No: 1, обеспечивающий экспрессию белка, имеющего аминокислотную последовательность SEQID No: 2, стимулирующая гуморальный и клеточный иммунитет в отношении вируса SARS-CoV-2. Также представлен способ получения указанной вакцины на основе пробиотического штамма Enterococcus faecium L3, модифицированного в результате электропорации культуры энтерококков Enterococcus faecium L3 рекомбинантной плазмидной ДНК pentF-covid-19, SEQ ID No: 1, отличающийся тем, что в плазмиде pentF-pspf, участок pspf заменен на фрагмент гена шиповидного белка SARS-CoV-2, при этом ДНК pentF-covid-19 кодирует аминокислотную последовательность SEQ ID No: 2, которая выполняет функцию шиповидного белка вируса SARS-CoV-2, способного осуществлять стимуляцию гуморального и клеточного иммунитета в отношении вируса SARS-CoV-2. Пероральное введение вакцины Еnterococcus faecium pentF-covid-19 стимулирует развитие специфического системного и местного иммунного ответа, что проявляется выработкой специфических иммуноглобулинов классов G и А, а также повышенной продукцией интерферона гамма у вакцинированных животных. 2 н.п. ф-лы, 7 ил., 1 табл., 5 пр.
Настоящая группа изобретений относится к медицине, а именно к микробиологии, молекулярной генетике и биотехнологии, и касается создания живой вакцины на основе штамма Enterococcus faecium L3 для профилактики и лечения пневмонии, вызываемой пневмококками Streptococcus pneumoniae. Для этого в структуру пилей Еnterococcus faecium L3 включают антиген клинически актуального патогенного микроорганизма. Это достигалось введением гена pspf патогенных пневмококков в хромосомную ДНК пробиотического штамма Еnterococcus faecium L3. Вакцина, созданная на основе пробиотического штамма микроорганизмов, обладает выраженным иммуногенным и протективным эффектами, что обеспечивает ее эффективность в отношении любого серологического варианта пневмококка. 3 н.п. ф-лы, 12 ил., 1 табл., 6 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии и молекулярной генетики. Заявлен химерный рекомбинантный белок, состоящий из консервативных и иммуногенных фрагментов аминокислотных последовательностей поверхностных белков Streptococcus pyogenes: Sic, SpySEP, SpeA, ScpA, ScaAB и терминальных доменов флагеллина Salmonella typhiurium FliA и FliC, выполняющих функцию внутреннего адъюванта. Заявленный белок вызывает in vivo синтез антител класса G, специфических к указанному химерному белку и обладающих протективными свойствами в отношении Streptococcus pyogenes. Изобретение может быть использовано в медицинской промышленности при производстве вакцин против стрептококка группы А (СГА) Streptococcus pyogenes. 2 ил., 3 пр.
Изобретение относится к области биохимии, генной инженерии и биотехнологии, в частности к способу создания живой вакцины на основе биологически активного штамма Еnterococcus faecium L3 за счет включения в структуру его пилей антигена клинически актуального патогенного микроорганизма. Настоящий способ предусматривает получение слитого гена entF-bac, состоящего из двух отдельных фрагментов гена пробиотика E. faecium L3 и фрагмента гена bac и имеющего нуклеотидную последовательность, представленную на фиг. 7а, его клонирование и выявление бактериальных клонов, экспрессирущих нужный белок в пилях. Изобретение также относится к рекомбинантной плазмидной ДНК pentF-bac. Настоящая ДНК pentF-bac предназначена для создания живой вакцины на основе биологически активного штамма Е. faecium L3. Указанная ДНК pentF-bac представляет собой суицидную плазмиду pT7ERMB, по сайтам BamHI и KpnI которой вставлена последовательность ДНК слитого гена entF-bac. Настоящее изобретение также относится к вакцинному препарату E. faecium L3 Вас+. Указанный вакцинный препарат получают путем электропорации E. faecium L3 плазмидной ДНК pentF-bac. Настоящее изобретение позволяет получать живую вакцину на основе биологически активного штамма Е. faecium L3. 3 н.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области микробиологии и молекулярной генетики. Предложен комплекс рекомбинантных полипептидов для профилактики и лечения бактериальных инфекций, вызванных Streptococcus agalactiae и/или Streptococcus pyogenes. Комплекс содержит в равных долях рекомбинантные полипептиды Р6, recScaAB, StV, РВ1 и Csp1a, имеющее аминокислотные последовательности SEQ ID No: 1-5 соответственно. Комплекс не обладает токсическим действием на организм млекопитающих. Вызывает синергетический эффект в ходе синтеза специфических антител анти-P6, анти-recScaAB, анти-StV, анти-PB1 и анти-Csp1a, которые обладают протективным действием в отношении Streptococcus agalactiae и Streptococcus pyogenes, проявляя синергетический эффект в отношении Streptococcus agalactiae. 5 табл., 19 пр., 21 ил.
Изобретение относится к области микробиологии и молекулярной генетики и касается рекомбинантного полипептида StV, рекомбинантной ДНК stV, кодирующей указанный рекомбинантный полипептид StV, рекомбинантной плазмидной ДНК PQE-stV, представляющей собой плазмидную ДНК PQE-30, несущую указанную рекомбинантную ДНК stV, и штамма-продуцента Escherichia coli M15-StV, продуцирующего рекомбинантный полипептид StV. Представленные изобретения могут быть использованы в медицинской промышленности при производстве вакцин против Streptococcus agalactiae, т.е. стрептококков группы В (СГВ). 4 н.п. ф-лы, 6 ил., 2 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области микробиологии и молекулярной генетики и может быть использовано в медицинской промышленности при производстве вакцин против Streptococcus agalactiae
